Journal
/
Biochemistry
/
Ensayos de transferencia de energía de resonancia de Förster resueltos en el tiempo para la medición de proteínas STAT fosforiladas endógenas en células humanas
JoVE Journal
Biochemistry
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Journal Biochemistry
Time-resolved Förster Resonance Energy Transfer Assays for Measurement of Endogenous Phosphorylated STAT Proteins in Human Cells
Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

Ensayos de transferencia de energía de resonancia de Förster resueltos en el tiempo para la medición de proteínas STAT fosforiladas endógenas en células humanas

DOI:
10.3791/62915-v

•

07:12 min

•

September 09, 2021

•

, ,
1BioAuxilium Research

Chapters

  • 00:05Introduction
  • 01:02Stimulator or Inhibitor Titration Using the Two-Plate Assay Protocol with Adherent Cells
  • 04:33Results: Two-Plate and One-Plate Detection of STAT Proteins in Adherent and Suspension Cell Lines, and Intraplate Variability Study
  • 06:40Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Los protocolos de ensayo basados en células de transferencia de energía de resonancia de Förster resueltos en el tiempo se describen para la cuantificación simple, específica, sensible y robusta del transductor de señal fosforilada endógena y el activador de la transcripción (STAT) 1/3/4/5/6 proteínas en lisados celulares en un formato de 384 pocillos.

Tags

Keywords: Time-resolved FRETTR-FRETSTAT ProteinsJAK/STAT SignalingImmunoassayCell CultureCell StimulationCell LysisPhosphatase InhibitorsHigh-throughput ScreeningPharmacological Characterization

Article

Embed

ADD TO PLAYLIST

Usage Statistics

Related Videos

check_url/62915?article_type=v

Nuclear espectroscopía de resonancia magnética para la identificación de múltiples fosforilaciones de proteínas intrínsecamente desordenadas
check_url/62915?article_type=v

Resuelta en el tiempo de ionización por electrospray de hidrógeno-deuterio Espectrometría de Masas de cambio para el estudio de la estructura proteica y Dinámica
check_url/62915?article_type=v

Aislamiento y medidas respiratoria de las mitocondrias de Arabidopsis thaliana
check_url/62915?article_type=v

Utilizando un sistema de enriquecimiento integral inmunoprecipitación para identificar un perfil endógeno modificación poste-de translación de proteínas blanco
check_url/62915?article_type=v

Aislamiento de tilacoides fisiológicamente activos y su uso en ensayos de transporte dependiente de energía
check_url/62915?article_type=v

Uso en transferencia de energía de resonancia de la fluorescencia de Vitro para el estudio de la dinámica de los complejos de la proteína en una escala de tiempo de milisegundos
check_url/62915?article_type=v

Expresión, purificación, cristalización y ensayos enzimáticos de proteínas que contienen el dominio de la hidrolasa fumarilacetoacetato
check_url/62915?article_type=v

Eliminación Y Reemplazo De Ligandos Endógenos De Proteínas Ligadas A Lípidos Y Alérgenos
check_url/62915?article_type=v

Preparación rápida de la rejilla para la crio-microscopía electrónica resuelta en el tiempo
check_url/62915?article_type=v

Utilizando la mejora de la fluorescencia inducida por proteínas resueltas en el tiempo para identificar conformaciones locales estables un monómero α-sinucleína a la vez

Read Article