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Usando Microfluidos e Microscopia de Fluorescência para Estudar a Dinâmica de Montagem de Filamentos e Pacotes de Actin Único
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JoVE Journal Biochemistry
Using Microfluidics and Fluorescence Microscopy to Study the Assembly Dynamics of Single Actin Filaments and Bundles

Usando Microfluidos e Microscopia de Fluorescência para Estudar a Dinâmica de Montagem de Filamentos e Pacotes de Actin Único

DOI:
10.3791/63891-v

•

08:02 min

•

May 05, 2022

•

, , , ,
1Université Paris Cité, CNRS,Institut Jacques Monod

Chapters

  • 00:04Introduction
  • 00:40Polydimethylsiloxane (PDMS) Chamber Assembly
  • 01:45Connect Microfluidic Device
  • 03:11Configuring the Setup with Standard Flow Rates and Changing Solution
  • 04:21Basic Single Filament Experiment: Adenosine Diphosphate (ADP)-Actin Barbed End Depolymerization
  • 06:45Results: Polymerization of Actin Filaments from Spectrin-Actin Seeds when Exposed to Different Actin Binding Proteins
  • 07:24Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Apresentamos protocolos para ensaios microfluidos de filamento de actina simples, em combinação com microscopia de fluorescência, que permitem monitorar com precisão filamentos de actina individuais em tempo real, expondo-os sequencialmente a diferentes soluções proteicas.

Tags

Keywords: MicrofluidicsFluorescence MicroscopyActin FilamentsActin BundlesAssembly DynamicsActin-binding ProteinsPDMS ChamberF-bufferPressure ControlAir Bubbles

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