Journal
/
Genetics
/
Screening af sædceller for hurtig isolering af kimlinjeredigeringer hos zebrafisk
JoVE Journal
Genetics
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Journal Genetics
Screening Sperm for the Rapid Isolation of Germline Edits in Zebrafish

Screening af sædceller for hurtig isolering af kimlinjeredigeringer hos zebrafisk

DOI:
10.3791/64686-v

•

05:55 min

•

February 10, 2023

•

, ,
1Department of Molecular Biosciences,The University of Texas at Austin, 2Department of Nutritional Sciences,The University of Texas at Austin

Chapters

  • 00:04Introduction
  • 00:50Fish Sperm Collection
  • 02:11DNA Extraction and Amplification
  • 03:14PCR Amplicon Separation by Gel Electrophoresis
  • 04:20Results: Mutation Analysis of Sperm
  • 05:16Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

CRISPR-Cas-teknologier har revolutioneret genomredigering. At finde og isolere den ønskede kimlinjeredigering er dog fortsat en stor flaskehals. Derfor beskriver denne protokol en robust metode til hurtig screening af F0 CRISPR-injiceret zebrafisksæd for kimlinjeredigeringer ved hjælp af standard PCR-, restriktionsfordøje- og gelelektroforeseteknikker.

Tags

Sperm ScreeningGermline EditsZebrafishCRISPRF0IndelsGenome EditsIn Vitro FertilizationPCRGel ElectrophoresisAnesthesiaCloacaCapillary ActionSodium HydroxideThermal CyclerTris-HClPCR ReactionAgarose Gel

Article

Embed

ADD TO PLAYLIST

Usage Statistics

Related Videos

Novel RNA-bindende proteiner Isolering af den hurtige metode

High-Throughput robotersvejsede Assisted Isolering af temperaturfølsomme Lethal mutanter i<em> Chlamydomonas reinhardtii</em

Påvisning af Copy Number Ændringer Brug Single Cell Sequencing

Robust DNA isoleret og høj overførselshastighed sekventering bibliotek konstruktion til Herbarium prøver

Formaldehyd-assisteret Isolation af regulerende elementer til foranstaltning kromatin tilgængelighed i pattedyrceller

Parring-baserede overekspression bibliotek Screening i gær

Isolation, karakterisering og mikroRNA-baseret genetisk modificering af menneskelige Dental follikel stamceller

Screening af bomuld genotyper for Reniform nematode resistens

Kendetegner Histon posttranslationel modifikation ændringer i gær Neurodegenerative Proteinopathy modeller

Undersøgelse af den transkriptionelle rolle af en RUNX1 intronic LYDDÆMPER af crispr/Cas9 ribonucleoprotein i akutte myeloid leukæmiceller

Read Article