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ゼブラフィッシュの生殖細胞系列編集の迅速な分離のための精子のスクリーニング
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Screening Sperm for the Rapid Isolation of Germline Edits in Zebrafish
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ゼブラフィッシュの生殖細胞系列編集の迅速な分離のための精子のスクリーニング

DOI:
10.3791/64686-v

•

05:55 min

•

February 10, 2023

•

, ,
1Department of Molecular Biosciences,The University of Texas at Austin, 2Department of Nutritional Sciences,The University of Texas at Austin

Chapters

  • 00:04Introduction
  • 00:50Fish Sperm Collection
  • 02:11DNA Extraction and Amplification
  • 03:14PCR Amplicon Separation by Gel Electrophoresis
  • 04:20Results: Mutation Analysis of Sperm
  • 05:16Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

CRISPR-Cas技術は、ゲノム編集の分野に革命をもたらしました。ただし、目的の生殖細胞系列編集を見つけて分離することは、依然として大きなボトルネックです。したがって、このプロトコルは、標準的なPCR、制限消化、およびゲル電気泳動技術を使用して、F0 CRISPR注入ゼブラフィッシュ精子の生殖系列編集を迅速にスクリーニングするための堅牢な方法について説明しています。

Tags

Sperm ScreeningGermline EditsZebrafishCRISPRF0IndelsGenome EditsIn Vitro FertilizationPCRGel ElectrophoresisAnesthesiaCloacaCapillary ActionSodium HydroxideThermal CyclerTris-HClPCR ReactionAgarose Gel

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