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Concanavalin A-basierter Sedimentationsassay zur Messung der Substratbindung von Glucanphosphatasen
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Biochemistry
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JoVE Journal Biochemistry
Concanavalin A-Based Sedimentation Assay to Measure Substrate Binding of Glucan Phosphatases
DOI:

09:07 min

December 23, 2022

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Chapters

  • 00:04Introduction
  • 01:03Preparation of ConA‐Sepharose Beads and ConA‐Sepharose: Amylopectin Beads
  • 02:19Starch Excess4 (SEX4) Protein Binding with ConA‐Sepharose: Amylopectin Beads
  • 03:41Running SDS‐PAGE Gels
  • 04:27Western Blotting for Chemiluminescence Detection and Data Analysis
  • 06:28Results: Binding Affinity of SEX4 to ConA‐Sepharose‐Amylopectin Beads
  • 08:18Conclusion

Summary

Automatic Translation

Diese Methode beschreibt einen lektinbasierten in vitro Sedimentationsassay zur Quantifizierung der Bindungsaffinität von Glucanphosphatase und Amylopektin. Dieser Co-Sedimentations-Assay ist zuverlässig für die Messung der Glucan-Phosphatase-Substratbindung und kann auf verschiedene solubilisierte Glucan-Substrate angewendet werden.

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