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Neuroscience

प्रयोगशाला चूहे में मांग कोकीन के Footshock प्रेरित बहाली के अध्ययन के लिए एक प्रक्रिया

Published: January 6, 2011 doi: 10.3791/2265
Automatic Translation
1, 1, 1
1Psychology, University of Toronto Scarborough

Summary

पतन के पशु मॉडल, बहाली प्रक्रियाओं के रूप में जाना जाता है, को बड़े पैमाने पर इस्तेमाल किया गया है के लिए दवा की मांग के पतन में तनाव की भूमिका का अध्ययन. यहाँ, हम हल्के, आंतरायिक बिजली footshock तीव्र जोखिम के माध्यम से प्रयोगशाला चूहों में कोकीन की मांग की बहाली के उत्प्रेरण के लिए एक विधि पर रिपोर्ट.

Protocol

1. पशु आवास और acclimatization प्रक्रिया

  1. पुरुष लंबे इवांस चूहों, मछली पालने का बाड़ा में आगमन के समय में वजन 300-325 ग्राम, व्यक्तिगत मानक प्लास्टिक पुनर्नवीनीकरण कागज गोली बिस्तर युक्त तार ग्रिड lids के साथ पानी की बोतलें और खाद्य को समायोजित पिंजरों में रखे जाते हैं.
  2. चूहे एक रिवर्स प्रकाश अंधेरे अनुसूची (19:00 करने के लिए 07:00 पर रोशनी) पर रखा जाता है, तापमान और आर्द्रता नियंत्रित मछली पालने का बाड़ा में.
  3. खाद्य और पानी के प्रयोग भर घर पिंजरों में उपलब्ध विज्ञापन libitum हैं.
  4. चूहे और एक सर्जरी से पहले सप्ताह के लिए मछली पालने का बाड़ा और आवास की स्थिति के लिए acclimatize करने के लिए अनुमति दी जाती है. इस समय के दौरान चूहों नियमित सफाई के अपवाद के साथ undisturbed छोड़ दिया जाता है, भोजन, और वजन की निगरानी.

2. अंतःशिरा कैथीटेराइजेशन सर्जरी

  1. Isoflurane गैस संज्ञाहरण के तहत, और मानक सड़न रोकनेवाला सर्जिकल तकनीक का उपयोग कर, चूहों सही गले नस में silastic कैथेटर के साथ तैयार हैं. खोपड़ी की सतह पर एक संशोधित (एक प्लास्टिक) प्रवेशनी, और प्रवेशनी में कैथेटर आता है 'जौहरी शिकंजा और दंत सीमेंट के साथ खोपड़ी के लिए मुहिम शुरू की है. शल्यचिकित्सा की प्रक्रियाओं की जानकारी के लिए, 7, 8.
  2. सर्जरी के अंत में, कैथेटर लगभग एक 50% (1000 आइयू) हेपरिन और 50% डेक्सट्रोज (25 g/50 एमएल) युक्त समाधान के 0.2 एमएल के साथ प्लावित कर रहे हैं. एक प्लास्टिक अवरोधक बाहरी मलबे से कैथेटर की रक्षा, और कैथेटर प्रत्यक्षता बनाए रखने प्रवेशनी के उद्घाटन पर रखा गया है.
  3. सर्जरी के समय, और फिर सर्जरी के बाद दिन, चूहों एनाल्जेसिक ketoprofen के 5 मिग्रा / किग्रा, अनुसूचित जाति, प्रशासित रहे हैं.
  4. चूहे कम से कम सात दिनों के प्रयोग से पहले सर्जरी से उबरने के लिए अनुमति दी जाती है. इस समय के दौरान, चूहों घर पिंजरों में undisturbed छोड़ दिया जाता है सफाई और भोजन की दिनचर्या का अपवाद है, और वजन और सामान्य स्वास्थ्य की दैनिक निगरानी के साथ. वसूली अवधि के अंतिम दिन पर, कैथेटर हेपरिन / dextrose (खंड 2.2) समाधान कैथेटर प्रत्यक्षता की पुष्टि के साथ प्लावित कर रहे हैं.

3. व्यवहार प्रक्रिया

सभी व्यवहार प्रक्रियाओं मेड एसोसिएट्स इंक (सेंट Albans, VT) के द्वारा आपूर्ति उपकरणों का उपयोग कर बाहर किया जाता है. उपकरण, एक समर्पित कमरे में रखे, मानक operant कक्षों, प्रत्येक एक ध्वनि attenuating संलग्नक के भीतर निहित के एक सेट शामिल हैं. प्रत्येक operant कक्ष दो त्यागने योग्य लीवर, एक स्टेनलेस स्टील रॉड मंजिल से ऊपर दोनों ऊंचा 6.5 सेमी के साथ सुसज्जित है. एक सफेद उत्तेजना प्रकाश एक लीवर बस के ऊपर स्थित है, और कि लीवर (तथाकथित "सक्रिय" लीवर) उत्तेजना और एक जलसेक पंप (Razel वैज्ञानिक उपकरण, सेंट Albans प्रकाश सक्रियण के साथ - साथ रोशनी में परिणाम पर प्रतिक्रिया, VT). पंप operant चैम्बर के बाहर सिर्फ एक शेल्फ पर स्थित है, लेकिन ध्वनि - attenuating संलग्नक के भीतर है. अन्य लीवर (तथाकथित "निष्क्रिय" लीवर) कक्ष में विस्तारित सभी प्रयोगात्मक प्रक्रियाओं के दौरान छोड़ दिया है, इस लीवर पर प्रतिक्रिया परिणाम के बिना है. अंत में, प्रत्येक कक्ष एक scrambler के माध्यम से स्टील रॉड मंजिल के लिए निरंतर वर्तमान, आंतरायिक, अपरिहार्य, बिजली footshock देने के लिए सुसज्जित है. सभी प्रयोगात्मक शर्तों के (जैसे, उत्तेजना प्रस्तुतियों, दवा की सुई लेनी, सदमे प्रसव), के रूप में के रूप में अच्छी तरह से डेटा रिकॉर्डिंग और समेकन, परीक्षण कक्षों और एक केंद्रीय कंप्यूटर ऑपरेटिंग मेड एसोसिएट्स सॉफ्टवेयर (मेड चतुर्थ) के बीच इंटरफेस के माध्यम से पूरा कर रहे हैं.

5 चरणों में प्रयोग किया जाता है: 1) habituation, 2) कोकीन एसए, ड्रग मुक्त) 3 अवधि, 4) विलुप्त होने, और 5) बहाली के लिए परीक्षण. सभी चरणों (दवा मुक्त अवधि के लिए छोड़कर) में, चूहों दैनिक सत्रों के लिए आवास के कमरे से operant परीक्षण कक्ष में स्थानांतरित कर रहे हैं. पशु व्यक्तिगत रूप से स्थानांतरित कर रहे हैं, छोटे प्लास्टिक के कंटेनर में. खाद्य और पानी operant कक्षों में उपलब्ध नहीं हैं.

  1. Habituation
    1. पहली कोकीन SA सत्र (3.2 खंड देखें.) पिछले चौबीस घंटे, चूहों को एक एकल सत्र 2 घंटे के दौरान operant कक्षों को अभ्यस्त की अनुमति दी जाती है, इस सत्र के दौरान सक्रिय लीवर मुकर है.
  2. कोकीन एसए प्रशिक्षण
    1. प्रत्येक दैनिक प्रशिक्षण सत्र के पहले, चूहों आवास कमरे में तौल रहे हैं. इसके बाद वे operant कक्ष में स्थानांतरित कर रहे हैं.
    2. Operant कक्षों, एक बसंत और टयूबिंग विधानसभा (दवा जलसेक पंप से विस्तार) में रखा जा रहा करने पर खोपड़ी घुड़सवार प्रवेशनी के लिए जुड़ा हुआ है.
    3. चूहे के लिए अनुमति दी जाती है दैनिक के दौरान कोकीन एचसीएल स्वयं प्रशासन तीन घंटे 8-10 दिनों की एक कुल के लिए सत्र, (या तो लगातार या दो के बीच सत्र 5 और 6 के बीच दिनों की छुट्टी "के साथ).
    4. एसए (9:00-0:00) सुबह और दोपहर (13:00-16:00) के बीच वैकल्पिक सत्र. एसए सत्र के समय क्योंकि प्रयोग (यानी विलुप्त होने और परीक्षण) के बाद के चरणों में प्रक्रियाओं दोनों टी में पाए जाते हैं alternatedदिन के सभी जानवरों के लिए IMEs (धारा 3.4 और 3.5 देखें), इस प्रकार, इस व्यवस्था के बाद दवा व्यवहार की मांग पर किसी भी दिन के समय के confounding प्रभाव को रोकता है.
    5. प्रत्येक प्रशिक्षण सत्र acclimatization 5 मिनट की अवधि से पहले है, जिसके दौरान पशुओं सक्रिय लीवर मुकर साथ operant कोठरियों में रखा जाता है.
    6. प्रशिक्षण सत्र की शुरुआत में, सक्रिय लीवर चेंबर में बढ़ाया है और उत्तेजना प्रकाश (सक्रिय लीवर ऊपर स्थित) 30 के लिए प्रबुद्ध है एस इसके अलावा, घर प्रकाश इस समय सक्रिय है, और रहता है सत्र भर प्रबुद्ध. साथ में, इन घटनाओं कोकीन की उपलब्धता संकेत.
    7. सत्र के दौरान, सक्रिय लीवर पर प्रतिक्रियाएं कोकीन के एक 3 एक निश्चित अनुपात 1 सुदृढीकरण के शेड्यूल पर (0.23 μL mg/65, iv) जलसेक द्वारा प्रबलित रहे हैं. जलसेक पम्प और दवा वितरण के सक्रियण के साथ समवर्ती सक्रिय लीवर ऊपर प्रोत्साहन प्रकाश की एक 20 एस सक्रियण है. यह प्रकाश 20-एस प्रस्तुति एक "टाइम - आउट" अवधि के दौरान जो अतिरिक्त सक्रिय लीवर प्रतिक्रियाएं दर्ज हैं, लेकिन नहीं प्रबलित से मेल खाती है है.
    8. पशु 3 घंटे सत्र 50 प्रतिशत सुई लेनी की एक अधिकतम अनुमति दी जाती है. हम नियमित रूप से हमारे काम में इस कसौटी लगाने और हमारे अनुभव में पाया है कि यह बहुत अगर नहीं समाप्त करने के लिए जरूरत से ज्यादा होने के कारण होने वाली मौतों की घटनाओं को कम कर देता है.
    9. प्रत्येक दैनिक सत्र के अंत में, 'चूहों कैथेटर हेपरिन dextrose समाधान के 0.2-0.3 एमएल के साथ प्लावित कर रहे हैं (खंड 2.2 देखें) और चूहों उनके घर पिंजरे में लौट रहे हैं.
  3. दवा मुक्त अवधि
    1. अंतिम कोकीन SA सत्र के बाद, चूहों undisturbed छोड़ दिया जाता है (नियमित सफाई के अपवाद के साथ, भोजन, और वजन की निगरानी) सात दिनों की एक न्यूनतम के लिए उनके घर पिंजरे में.
  4. कोकीन प्रशिक्षित व्यवहार के विलुप्त होने
    1. चूहे विलुप्त होने के प्रशिक्षण के लिए 9:00-10:00 के बीच operant कक्ष में स्थानांतरित कर रहे हैं.
    2. बसंत और टयूबिंग विधानसभा प्रवेशनी खोपड़ी - घुड़सवार से जुड़ा है.
    3. लगातार SA प्रशिक्षण के लिए शर्तों के साथ, विलुप्त होने के प्रशिक्षण के प्रत्येक दिन acclimatization 5 मिनट की अवधि से पहले है, जिसके दौरान पशुओं सक्रिय लीवर मुकर साथ operant कोठरियों में रखा जाता है.
    4. चूहे तो चार 60 मिनट विलुप्त होने के सत्र में दिया जाता है, 30 मिनट के अंतराल के द्वारा अलग. प्रत्येक 60 मिनट सत्र एक ही घटनाओं है कि प्रशिक्षण सत्र के शुरू (यानी, घर में प्रकाश की रोशनी, सक्रिय लीवर के विस्तार, और सक्रिय लीवर ऊपर प्रोत्साहन प्रकाश की रोशनी 30 सेकंड) में पाए जाते हैं द्वारा शुरू की है. सत्र के दौरान सभी शर्तों एसए प्रशिक्षण के दौरान उपस्थित थे (यानी, 20 सेकंड और 3-जलसेक पंप के सक्रियण के लिए प्रतिक्रिया दल उत्तेजना प्रकाश की रोशनी) रखा जाता है कि सक्रिय लीवर प्रतिक्रियाओं को छोड़कर, कोकीन सुई लेनी के साथ कोई अब प्रबलित . 30 मिनट के अंतराल है कि प्रत्येक विलुप्त होने के 60 मिनट के सत्र अलग दौरान, सक्रिय लीवर मुकर गया है और घर में प्रकाश बुझा है.
    5. पिछले 60 मिनट के सत्र के अंत में, चूहों को उनके घर के पिंजरे में लौट रहे हैं.
    6. 3.4.1 कदम. 3.4.5 करने के लिए. लगातार 3 दिनों के लिए दोहराया है.
  5. कोकीन प्रशिक्षित व्यवहार के footshock तनाव द्वारा बहाली
    1. चूहे के बीच 9:00-10:00 operant कक्ष में स्थानांतरित कर रहे हैं
    2. Operant कक्षों में रखा जा रहा है पर, बसंत और टयूबिंग विधानसभा प्रवेशनी खोपड़ी - घुड़सवार से जुड़ा है.
    3. प्रशिक्षण और विलुप्त होने के लिए शर्तों के अनुरूप, acclimatization 5 मिनट की अवधि प्रदान की है, जिसके दौरान चूहों सक्रिय लीवर के साथ operant कक्षों में रखा जाता है मुकर.
    4. चूहे तो दो 60 मिन विलुप्त होने (3.4.4 देखें.) सत्र एक 30 मिनट के अंतराल के द्वारा अलग विलुप्त होने के चरण के दौरान दिए गए उन लोगों के लिए समान दिया जाता है.
    5. यदि दूसरे सत्र में 60 मिनट के बाद पहले सक्रिय लीवर पर प्रतिक्रियाओं की कुल संख्या 15 से कम है, पशुओं बहाली के लिए एक अतिरिक्त 30 मिनट के अंतराल के बाद एक परीक्षण दिया जाता है. इस 30 मिनट के अंतराल में, footshock या नकली footshock (यानी, कोई footshock) (3.5.6 देखें.) प्रशासित किया जाता है. यदि सक्रिय लीवर पर 15 या कम प्रतिक्रियाओं का एक कसौटी के दूसरे सत्र के बाद हासिल नहीं है, एक अतिरिक्त विलुप्त होने के सत्र (ओं) से पहले बहाली के लिए परीक्षण दिया जाता है.
    6. दूसरा विलुप्त होने के 60 मिनट के सत्र (या किसी भी अतिरिक्त 60 मिनट विलुप्त होने (ओं) सत्र के 15 या कम प्रतिक्रियाओं के विलुप्त होने की कसौटी को स्थापित करने की आवश्यकता के बाद) के बाद दस मिनट, आंतरायिक बिजली footshock तनाव के 20 मिनट (या नकली पशुओं को उजागर कर रहे हैं operant कक्ष में) footshock. Footshock एक बार जब सक्रिय लीवर मुकर गया है और घर और उत्तेजना रोशनी बुझा कर रहे हैं के दौरान दिया जाता है. Footshock 40 एस (10-70 एस रेंज) के एक मतलब अंतराल पर एक चर समय अनुसूची के अनुसार वितरित किया जाता है. प्रत्येक सदमे 0.9 मा की तीव्रता में दिया है, और अवधि में 0.5 एस है. Footshock के इन मापदंडों व्यापक पायलट काम पर आधारित हैंहमारी प्रयोगशाला में किए गए कोकीन की मांग की विश्वसनीय बहाली के लिए न्यूनतम footshock जोखिम की तीव्रता और अवधि के साथ स्थापित. इन मानकों के तहत, जानवरों 0.5 एस सदमे से एक reflexive कूद प्रतिक्रिया एक्ज़िबिट, और कभी कभी एक संक्षिप्त वोकलिज़ेशन फेंकना. हालांकि जानवरों सदमे अवधि भर में मनाया जाता है, सदमे की तीव्रता पर्याप्त परिमाण के संकट के और अधिक स्पष्ट संकेत प्रेरित नहीं है.
    7. Footshock सत्र के निम्नलिखित समाप्ति के तुरंत सक्रिय लीवर बढ़ाया और विलुप्त होने शर्तों (यानी के तहत चूहों के लीवर प्रेस करने की अनुमति दी कर रहे हैं, प्रतिक्रियाओं कोकीन के साथ नहीं प्रबलित रहे हैं, लेकिन उत्तेजना और जलसेक पंप के प्रकाश सक्रियण की रोशनी में परिणाम जारी ). समय के इस अवधि बहाली के लिए परीक्षण के रूप में परिभाषित किया गया है और अवधि में आम तौर पर 1-3 घंटे है. हाल जवाब (पहले 30 घंटे मिनट-1) परीक्षण सत्र के शुरुआती हिस्से में होता है, और बाद में और अधिक विस्तारित परीक्षण अवधि में extinguishes. इस प्रकार, एक 1 घंटे परीक्षण बहाली प्रभाव पर कब्जा करने के लिए पर्याप्त है, अब परीक्षण अवधि के साथ एक अधिक पूर्ण प्रभाव के विलुप्त होने प्रोफ़ाइल प्रदान है.
    8. जब दोहराया उपायों डिजाइन कार्यरत है, प्रत्येक चूहे footshock और नकली footshock शर्तों के तहत परीक्षण किया है. 3.5.1 कदम. 3.5.8 बाद में एक परीक्षण के दिन पर दोहराया जाता है, और बहाली (footshock या नकली footshock) के लिए वैकल्पिक परीक्षा दिलाई है.

4. प्रतिनिधि परिणाम:

चित्रा 1
चित्रा 1 शैली प्रतिक्रिया प्रोफाइल आत्म प्रशासन प्रशिक्षण, विलुप्त होने, और बहाली के परीक्षण के दौरान सक्रिय और निष्क्रिय लीवर पर गतिविधि के लिए. .

चित्रा 1 शैली operant प्रतिक्रिया प्रोफाइल, प्रयोगात्मक प्रोटोकॉल के साथ साथ वर्णित के विभिन्न चरणों के दौरान प्राप्त लोगों के विशिष्ट प्रस्तुत करता है.

1. सक्रिय लीवर प्रतिक्रियाओं

  1. कोकीन एसए प्रशिक्षण चित्रा 1 (बाएं पैनल) एक ठेठ कोकीन SA प्रशिक्षण वक्र है कि सुई लेनी और सक्रिय लीवर प्रेस की कुल संख्या के दोनों संख्या भी शामिल है दिखाता है. चूहे आम तौर पर 1-3 सत्रों के भीतर कोकीन एसए अधिग्रहण और, एक बार व्यवहार की स्थापना की है, नशीली दवाओं के सेवन के एक स्थिर दर (आमतौर पर कम से कम 20% के बीच सत्र विचरण) बाद के सत्रों में बनाए रखने के.
  2. यह चित्र 1 में देखा जा सकता है (मध्यम पैनल) है कि विलुप्त होने के दिन 1 पर है, जब प्रतिक्रियाओं पहली बार के लिए गैर प्रबलित रहे हैं, सक्रिय लीवर पर प्रतिक्रियाओं की कुल संख्या शुरू की तुलना में अधिक कोकीन प्रशिक्षित व्यवहार के विलुप्त होने. प्रशिक्षण चरण (एक तथाकथित "विलुप्त होने फट" करने के लिए इसी) के अंत में, धीरे - धीरे विलुप्त होने के चार सत्रों में, घट जाती है जवाब. विलुप्त होने के 2 दिन और 3 पर, (कि पिछले दिन के अंतिम सत्र के दौरान मनाया के सापेक्ष) प्रतिसाद के कुछ वसूली मनाया हो सकता है, तथापि, प्रतिक्रियाएं आम तौर पर कर रहे हैं विलुप्त होने के पिछले दिन के शुरू में कम से कम, और विलुप्त होने के आम तौर पर उस दिन के लिए चार सत्रों से अधिक आय और अधिक तेजी से.
  3. कोकीन की बहाली की मांग यह चित्रा 1 (सही पैनल) में देखा जा सकता है कि आंतरायिक footshock के लिए जोखिम के 20 मिनट गैर प्रबलित सक्रिय लीवर पर जवाब, कि पूर्ववर्ती विलुप्त होने के सत्र के अंत में मनाया सापेक्ष में वृद्धि लाती है. Footshock भी जिन स्थितियों में नकली footshock प्रशासित किया जाता है के तहत मनाया है कि सापेक्ष जवाब देने में वृद्धि लाती है. इस प्रकार, footshock तनाव से कोकीन की मांग की बहाली के रूप में भी व्यक्त कर सकते हैं: 1) footshock के लिए जोखिम के बाद गैर - प्रबलित प्रतिक्रियाओं की संख्या में वृद्धि, विलुप्त होने के सत्र में प्रतिक्रियाओं के सापेक्ष footshock या 2) गैर प्रबलित की संख्या में वृद्धि से पहले नकली footshock footshock रिश्तेदार के बाद प्रतिक्रियाओं.

2. निष्क्रिय लीवर प्रतिक्रियाओं

यह चित्रा 1 (लाल रेखा) है कि, सभी प्रयोगात्मक चरणों के दौरान, वहाँ बहुत कम प्रतिक्रिया निष्क्रिय लीवर के साथ जुड़े स्तर में देखा जा सकता है. हालांकि, इस लीवर पर जवाब देने में एक मामूली वृद्धि कभी कभी footshock तनाव के लिए निम्नलिखित जोखिम मनाया जाता है. में भी मामलों में जिसमें जवाब में ऐसी वृद्धि होती है, सक्रिय लीवर में वृद्धि जवाब अनुपात बहुत अधिक हो जाता है.

Discussion

पिछले कुछ दशकों में, एसए बहाली प्रक्रिया के तीन वेरिएशन प्रयोगशाला चूहों और बंदरों में दवा की मांग की बहाली का अध्ययन करने के लिए विकसित किया गया है. मतभेद है कि प्रक्रियात्मक विविधताओं को परिभाषित मुख्य रूप से है कि दवा SA, विलुप्त होने, और परीक्षण सत्र एक ही दिन के भीतर या अलग अलग दिनों पर 1 होते संबंधित. प्रक्रिया हम इस पत्र में वर्णित है सामान्यतः "के भीतर के बीच" सत्र भिन्नता है, क्योंकि दवा SA दैनिक सत्र के दौरान होता है (यानी, एक तरह से बीच सत्र में) है कि विलुप्त होने और परीक्षण सत्र से अलग कर रहे हैं के रूप में जाना जाता है, लेकिन विलुप्त होने परीक्षण और एक ही दिन (यानी, एक तरह से भीतर सत्र में) [जैसे 7, 9] पर होते हैं. वैकल्पिक रूप से, "सत्र के बीच में" तथाकथित प्रक्रियाओं में प्रयोग के सभी चरणों को क्रमिक रूप से होते हैं, जैसे कि एसए, विलुप्त होने, और परीक्षण सत्र अलग अलग दिनों पर दिया जाता है (यानी, सभी चरणों सत्र के बीच में हैं) [उदाहरण के लिए, 8, 10 , 11]. इसके विपरीत, "सत्र के भीतर पूरा प्रक्रियाओं में, एसए प्रशिक्षण, विलुप्त होने, और परीक्षण सत्र के सभी एक ही दिन के भीतर जैसे [12] होते हैं.

हालांकि footshock प्रेरित दवा बहाली प्रक्रिया के अलग अलग रूपों का उपयोग कर की मांग की बहाली की रिपोर्ट प्रकाशित कर रहे हैं, हम इस stressor (कम से कम कोकीन एसए के एक इतिहास के साथ पशुओं में) सबसे प्रभावी होगा जब विलुप्त होने और परीक्षण उसी पर होते पाया है दिन (अर्थात्, भीतर के बीच एक "" सत्र तरीके में). वैकल्पिक रूप से, हम "सत्र के बीच में" एक पूरी तरह का उपयोग कर प्रक्रिया की मांग कोकीन के विश्वसनीय footshock प्रेरित बहाली प्राप्त करने के साथ सफलता पड़ा है, लेकिन केवल तहत जिन स्थितियों में पशुओं एसए कक्षों में 8 प्रयोग, विलुप्त होने और परीक्षण के दौरान या कम से कम भर रखे जाते हैं 13. बीच सत्र दृष्टिकोण से अधिक है कि वर्तमान प्रोटोकॉल में वर्णित इस का नुकसान यह है कि यह कि और प्रशिक्षित किया जा सकता है एक समय में परीक्षण विषयों की संख्या की सीमा, जिससे डेटा संग्रह की क्षमता घट जाती है. हालांकि वर्तमान प्रोटोकॉल की शर्तों के तहत केवल पशुओं के एक समूह और बुझ जा सकता है एक निश्चित समय पर परीक्षण किया गया, अधिक से अधिक throughput के एक सप्ताह के द्वारा चूहों के दो समूहों के लिए एसए प्रशिक्षण चरण की शुरुआत समय विचलता द्वारा प्राप्त किया जा सकता है. इस परिदृश्य में, पहले समूह के चूहों की दवा मुक्त चरण में प्रवेश के रूप में दूसरे समूह एसए प्रशिक्षण के 2 सप्ताह में प्रवेश कर सकते हैं और बाद में, पहले समूह में विलुप्त होने और परीक्षण बाहर किया जा सकता है जबकि दूसरे समूह अपनी दवा में है मुक्त चरण. इस दृष्टिकोण संसाधनों के अधिक कुशल उपयोग परमिट और डाटा अधिग्रहण की दर accelerates, जबकि बहुत प्रभावी और विश्वसनीय footshock प्रेरित बहाली के लिए अग्रणी.

महत्वपूर्ण बात, हमारे प्रक्रिया में पहले दवा - प्रबलित व्यवहार और बहाली के लिए परीक्षण के विलुप्त होने का दवा जुड़े cues की उपस्थिति में होता है. हालांकि हम दवा जुड़े cues के अभाव में विलुप्त होने के प्रशिक्षण या परीक्षण नहीं किया है, यह हमारी समझ है, व्यक्तिगत संचार पर आधारित है, कि stressor के वास्तव में बहाली उत्प्रेरण में अप्रभावी हो सकता है जब परीक्षण बुझा cues के अभाव में होता है हो सकता है ( कम से कम कोकीन एसए के एक इतिहास के साथ पशुओं के मामले में). इस चर के एक व्यवस्थित परीक्षा है, और सैद्धांतिक निहितार्थ यह बन गया है, भविष्य के अनुसंधान के लिए एक महत्वपूर्ण सवाल है.

एक अंतिम प्रक्रियात्मक कारक है कि वारंट टिप्पणी है कि बहाली पर footshock तनाव के प्रभाव अत्यधिक संदर्भ के जोड़तोड़ के प्रति संवेदनशील होना प्रतीत होता है. उदाहरण के लिए, footshock तनाव केवल दवा की बहाली की मांग है अगर यह वातावरण में प्रशासित किया जाता है जिसमें दवा SA और विलुप्त होने होते उत्प्रेरण में प्रभावी है, है कि, footshock एक उपन्यास के संदर्भ में दवा की मांग अगर stressor करने के लिए जोखिम होता नहीं बहाल करता है, stressor के 14 बहाली पर इसके प्रभाव में दवा और पर्यावरण के बीच एक महत्वपूर्ण बातचीत का सुझाव दे.

निष्कर्ष footshock बहाली की प्रक्रिया में, इस पत्र में वर्णित उन लोगों की तरह, काफी सफलता के साथ प्रयोग किया गया है करने के लिए बुनियादी व्यवहार और neurobiological तनाव और नशीली दवाओं के पतन के बीच संबंधों को नियंत्रित करने तंत्र स्पष्ट. दरअसल, इन प्रक्रियाओं, जब औषधीय pretreatments या neurochemical जोड़तोड़ विशिष्ट neuronal substrates लक्ष्यीकरण को समायोजित करने के लिए संशोधित, शक्तिशाली उपकरण के रूप में तनाव से मांग दवा बहाली के तंत्रिका जीव विज्ञान के लिए निस्र्पक सेवा कर सकते हैं.

Disclosures

जानवरों पर प्रयोगों पशु की देखभाल और टोरंटो जानवरों की देखभाल समिति के विश्वविद्यालय के कनाडा परिषद द्वारा निर्धारित दिशा निर्देशों और नियमों के अनुसार में प्रदर्शन किया गया. इस वीडियो के उत्पादन मेड एसोसिएट्स इंक, जो इस लेख में इस्तेमाल किया उपकरण का उत्पादन द्वारा प्रायोजित किया गया था.

Materials

Name Type Company Catalog Number Comments
Basic Drug Self-Administration Test Package for Rat Package Med Associates, Inc. MED-008-CT-B1
Deep extra tall MDF sound attenuating cubicle Basic Drug Self-Administration Test Package for Rat Package Component Med Associates, Inc. ENV-018MD
Standard modular test chamber with drug infusion top and waste pan Basic Drug Self-Administration Test Package for Rat Package Component Med Associates, Inc. ENV-008CT
Stainless steel grid floor Basic Drug Self-Administration Test Package for Rat Package Component Med Associates, Inc. ENV-005
House light, hooded, 28V Basic Drug Self-Administration Test Package for Rat Package Component Med Associates, Inc. ENV-215M
Stimulus light 1” white lens Basic Drug Self-Administration Test Package for Rat Package Component Med Associates, Inc. ENV-221M
Low profile retractable response lever Basic Drug Self-Administration Test Package for Rat Package Component Med Associates, Inc. ENV-112CM
SmartCtrl 8 Input/16 output package Basic Drug Self-Administration Test Package for Rat Package Component Med Associates, Inc. DIG-716P2
Single speed syringe pump, 3.33 RPM Basic Drug Self-Administration Test Package for Rat Package Component Med Associates, Inc. PHM-100
Rat self infusion package Basic Drug Self-Administration Test Package for Rat Package Component Med Associates, Inc. PHM-119B-23-D
Drug Delivery, Arm assembly Basic Drug Self-Administration Test Package for Rat Package Component Med Associates, Inc. PHM-110-SAI
Square wave aversive stimulator Footshock Stress Component Med Associates, Inc. ENV-414S
Patented quick disconnect harness for stainless steel grid floor Footshock Stress Component Med Associates, Inc. ENV-005-QD
Shock output cable Footshock Stress Component Med Associates, Inc. SG-219G-10
MED-PC IV Software Software Med Associates, Inc. SOF-735

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References

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Kupferschmidt, D. A., Brown, Z. J.,… More

Kupferschmidt, D. A., Brown, Z. J., Erb, S. A Procedure for Studying the Footshock-Induced Reinstatement of Cocaine Seeking in Laboratory Rats . J. Vis. Exp. (47), e2265, doi:10.3791/2265 (2011).

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