Summary
Vivo में तंत्रिका चालन गुणों की माप neuromuscular बीमारियों के विभिन्न पशु मॉडल को चिह्नित करने के लिए एक शक्तिशाली उपकरण उदाहरण देना. यहाँ, हम anesthetized चूहों के sciatic नसों पर electrophysiological विश्लेषण किया जा सकता है जिसके द्वारा एक आसान और विश्वसनीय प्रोटोकॉल उपस्थित थे.
Abstract
Electrophysiological पढ़ाई अंतर्निहित pathophysiology 1 की समझ में, एक साथ नयूरोपथोलोगिकल तकनीक के साथ, विभिन्न neuromuscular बीमारियों की एक तर्कसंगत वर्गीकरण की अनुमति और मदद की है. यहाँ हम vivo में माउस sciatic नसों पर electrophysiological अध्ययन करने के लिए एक विधि का वर्णन.
पशुओं का परीक्षण चूहों के लिए पीड़ानाश सुनिश्चित करने के क्रम में isoflurane के साथ anesthetized और लगभग 30 मिनट / पशु ले कि माप के दौरान काम कर वातावरण undisturbed हैं. 37 डिग्री सेल्सियस के एक निरंतर शरीर का तापमान एक हीटिंग थाली से बनाए रखा और लगातार एक गुदा थर्मो जांच 2 से मापा जाता है. इसके अतिरिक्त, एक इलेक्ट्रोकार्डियोग्राम (ईसीजी) नियमित तौर पर लगातार जांच जानवरों की शारीरिक स्थिति पर नजर रखने के क्रम में माप के दौरान दर्ज की गई है.
Electrophysiological रिकॉर्डिंग sciatic तंत्रिका, वें का सबसे बड़ा तंत्रिका पर प्रदर्शन कर रहे हैंmotoric और संवेदी दोनों फाइबर इलाकों के साथ माउस पिछले अंग की आपूर्ति ई परिधीय तंत्रिका तंत्र (पीएन),. हमारे प्रोटोकॉल में, sciatic नसों बगल में रहते हैं और इसलिए निकाले या उजागर करने की जरूरत नहीं है, वास्तविक रिकॉर्डिंग के साथ साथ किसी भी प्रतिकूल तंत्रिका irritations बिना माप की इजाजत दी. उपयुक्त सुई इलेक्ट्रोड 3 का उपयोग हम gastrocnemius मांसपेशियों में संवेदन इलेक्ट्रोड के साथ प्रेषित क्षमता दर्ज प्रॉक्सिमल और बाहर तंत्रिका stimulations दोनों करते हैं. डाटा प्रोसेसिंग, विश्वसनीय और तंत्रिका चालन वेग (NCV) और मिश्रित मोटर कार्रवाई क्षमता (CMAP) के लिए अत्यधिक संगत मानों, सकल परिधीय तंत्रिका कामकाज की मात्रा का ठहराव के लिए मुख्य मापदंडों, हासिल किया जा सकता है के बाद.
Introduction
Electrophysiological माप नैदानिक और प्रयोगशाला वातावरण दोनों में परिधीय नसों के कार्यात्मक अखंडता की जांच के लिए एक अनिवार्य उपकरण हैं. मनुष्यों में, neuromuscular विकारों और न्यूरोपैथी की एक बड़ी संख्या लक्षणपूर्वक electrophysiological माप पर भरोसा करते हैं. चालन वेग या संकेत के संभावित आयाम के रूप में तंत्रिका गुणों को मापने के द्वारा, यह परिधीय तंत्रिका रोगों के किसी न किसी मूल चिह्नित करने के लिए संभव है.
तंत्रिका चालन वेग myelination रूप से सक्षम तेजी से संकेत प्रसार पर निर्भर है. इसलिए, demyelinating प्रक्रियाओं आम तौर पर चालन वेग 4 कमी आई दिखा. परिसर मोटर कार्रवाई क्षमता (CMAP) - कार्यात्मक axons की संख्या के साथ correlating - काफी 5 कम जब axonal क्षति के लिए एक संकेत है.
इस प्रकार, electrophysiological तरीकों के माध्यम से परिधीय तंत्रिका क्षति के एटियलजिऐसी वंशानुगत न्यूरोपैथी 6,7, मधुमेही न्यूरोपैथी 8,9, जीर्ण सूजन demyelinating polyneuropathies (CIDP) 10, या चयापचय न्यूरोपैथी 11 के लिए, के रूप में भेदभाव किया जा सकता है.
आम तौर पर, मानव आवेदन में पिडली का या ulnar तंत्रिका पर noninvasive रिकॉर्डिंग पसंद कर रहे हैं. और motoric और संवेदी प्रणाली के छोटे कैलिबर axons - चूहों में, यह sciatic नसों के तंत्रिका गुण, बड़े दोनों युक्त परिधीय तंत्रिका तंत्र (पीएन) का सबसे बड़ा तंत्रिका का विश्लेषण करने के लिए सरल है.
यहां प्रदर्शन के रूप में प्रक्रिया बरकरार माउस में परिधीय नसों पर इलेक्ट्रोफिजियोलॉजी के लिए प्रासंगिक सभी मानक मूल्यों को मापने के लिए एक त्वरित, आसान और विश्वसनीय तरीका है. एक संरक्षित जीव से रिकॉर्डिंग लेने से, तंत्रिका पर्यावरण की शारीरिक स्थिति की गारंटी है.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
वर्तमान अध्ययन जर्मनी के संघीय गणराज्य (Tierschutzgesetz der Bundesrepublik Deutschland) के पशु संरक्षण अधिनियम के अनुसार प्रदर्शन किया गया था और खाद्य सुरक्षा एवं उपभोक्ता संरक्षण (थुरिंगर Landesamt फर Lebensmittelsicherheit und Verbraucherschutz) के लिए थ्युरिनजियन राज्य कार्यालय द्वारा अनुमोदित किया गया था.
1. माप की स्थापना
- Isoflurane / ओ 2 साँस लेना द्वारा चूहों anesthetize - संज्ञाहरण 3% की दीक्षा के लिए, 100% ऑक्सीजन में रखरखाव 2 isoflurane% (चित्रा 1) के लिए. इस तरह के आंदोलन सजगता और कम ग्रेड दर्द के लिए संवेदनशीलता के परीक्षण के रूप में सरल सजगता परीक्षण द्वारा पर्याप्त संज्ञाहरण की पुष्टि करें. प्रक्रिया आम तौर पर कुल में सिर्फ 30 मिनट / पशु लेता है क्योंकि संज्ञाहरण के दौरान सूखापन को रोकने के लिए आंखों पर मरहम का उपयोग की सिफारिश की लेकिन अपरिहार्य नहीं है. अस्तित्व प्रयोगों के मामले में, पश्चात दर्द के प्रबंधन के लिए समय पर लंबे समय तक अभिनय दर्दनाशक दवाओं प्रशासन.
- एक बिजली के रेजर के साथ हिंद अंग को कवर फर दाढ़ी और जानवरों पीड़ानाश के तहत पहले से ही कर रहे हैं, जबकि एक व्यावसायिक रूप से उपलब्ध बाल हटाने क्रीम के साथ depilation प्रदर्शन करते हैं. प्रक्रिया के दौरान रोगज़नक़ मुक्त स्थिति को बनाए रखने के क्रम में, सड़न रोकनेवाला दस्ताने पहनते हैं और हमेशा ध्यान से 70% इथेनॉल के साथ साफ उपकरणों का उपयोग करें.
- एक प्रतिक्रिया नियंत्रित हीटिंग थाली और मलाशय थर्मो जांच (चित्रा 2) द्वारा नियंत्रण शरीर का तापमान स्थिरता. यदि आवश्यक हो, एक बाँझ प्रयोगात्मक वातावरण रखने के क्रम में पशुओं के बीच हीटिंग प्लेट कवर करने के लिए एक बाँझ कपड़ा का इस्तेमाल करें. इसके अलावा, यह इलेक्ट्रॉनिक रूप ऊतकों को नुकसान से बचने के लिए 40 डिग्री सेल्सियस ≤ को हीटिंग तापमान को सीमित करने के लिए एक एकीकृत संवेदक के माध्यम से नियंत्रित किया जाता है जो एक हीटिंग थाली, उपयोग करने के लिए सिफारिश की है.
चित्रा 1. ऍक्स्पमुंडा हिंद अंग के साथ एक anesthetized माउस दिखा erimental सेटअप. - (ईसीजी) रिकॉर्डिंग एक महत्वपूर्ण पैरामीटर के रूप में दिल की दर पर नजर रखने के लिए electrocardiography लो. गर्दन क्षेत्र में त्वचा के तहत प्रत्येक forelimb और एक इलेक्ट्रोड की त्वचा के नीचे एक इलेक्ट्रोड इस प्रकार है: ईसीजी रिकॉर्डिंग के लिए तीन इलेक्ट्रोड को स्थापित करें.
- इष्टतम चालकता / स्थानांतरण प्रतिरोध के लिए संपर्क जेल का उपयोग प्लेस अंगूठी इलेक्ट्रोड. (काले रंग में लेबल) संवेदन इलेक्ट्रोड gastrocnemius मांसपेशियों इसकी अधिकतम व्यास है जहां स्थिति पर रखा गया है. (लाल रंग में संकेत दिया) संदर्भ इलेक्ट्रोड बस संवेदन इलेक्ट्रोड के नीचे रखा गया है.
नोट: उपकरण जानने के लिए 'सामग्री तालिका' देखें. - समीपस्थ और बाहर का sciatic तंत्रिका उत्तेजना और नेतृत्व इलेक्ट्रोड के बीच पूर्व निर्धारित लेकिन लगातार दूरी के साथ माप की सही स्थिति के निशान. प्रायोगिक प्रस्ताव: संवेदन इलेक्ट्रोड से 4 मिमी की दूरी पर, बाहर का उत्तेजना जगह ले जाएगा.संवेदन इलेक्ट्रोड को 16 मिमी की दूरी में, समीपस्थ उत्तेजना (चित्रा 2) के बाहर किया जाएगा.
चित्रा 2. सिर्फ पूर्व माप की शुरुआत करने के लिए प्रयोगात्मक स्थिति दिखा प्रतिनिधि तस्वीर. सफेद तीर संवेदन (काला) और संदर्भ (लाल) बाईं पिछले अंग की gastrocnemius मांसपेशियों में इलेक्ट्रोड की स्थिति को दर्शाता है. सुई इलेक्ट्रोड से उत्तेजना काला संवेदन इलेक्ट्रोड के संबंध में निर्धारित पदों पर प्रदर्शन किया जाएगा. बाहर का उत्तेजना के बिंदु (बाएं पिछले अंग पर "डी एस" के साथ काला निशान) संवेदन इलेक्ट्रोड से 4 मिमी की दूरी है; समीपस्थ उत्तेजना ("पी" के साथ काला निशान) की जगह दूर 16 मिमी है. सही पिछले अंग पर लाल रेखा लगभग दिखाता है sciatic तंत्रिका के शारीरिक पाठ्यक्रम Imate. इसके अलावा, प्रासंगिक पिछले अंग की मांसपेशियों के किसी न किसी पदों स्थलों के रूप में दिखाया गया है. तारांकन गुदा थर्मल जांच इंगित करता है.
2. मापन
- सिद्धांत: monopolar डिस्पोजेबल 28 जी सुई इलेक्ट्रोड से 0.1 मिसे अवधि के repetitively उत्पन्न एकल वर्ग तरंग दालों के साथ तंत्रिका stimulations की एक श्रृंखला प्रदर्शन (पुनरावृत्ति दर 200 मिसे, चित्रा 3 देखें). बंद लाइन डेटा विश्लेषण के लिए, यह एक साथ होने के कारण तंत्रिका उत्तेजना को neuromuscular समारोह प्रतिक्रिया वक्र (3B चित्रा) के साथ मिलकर उत्तेजना संकेतों को प्राप्त करने के लिए सिफारिश की है. बाद में डेटा विश्लेषण के लिए अधिक से अधिक प्रतिक्रियाओं की एक श्रृंखला ("प्रतिनिधि neuromuscular समारोह प्रतिक्रिया") औसत. विश्वसनीय डेटा, रिकॉर्ड और उत्तेजना साइट और पशु प्रति बाद में औसत से कम से कम 3 स्वतंत्र, इष्टतम प्रतिक्रिया घटता उत्पादन के लिए.
p_upload/51181/51181fig3highres.jpg "src =" / files/ftp_upload/51181/51181fig3.jpg "/>
डाटा अधिग्रहण और विश्लेषण (योजनाबद्ध प्रस्तुति) के लिए चित्रा 3. प्रक्रिया. Repetitively उत्पन्न दालों सुई इलेक्ट्रोड (चित्रा 3 ए में ऊपरी पंक्ति) के माध्यम से sciatic तंत्रिका को लागू कर रहे हैं. इसके साथ ही, कई इसी neuromuscular प्रतिक्रिया घटता (चित्रा 3 ए में कम पंक्ति) दर्ज की गई हैं. संकेत प्रतिक्रिया के विलंबता के साथ ही अवधि और संकेत के आयाम संकेत दिया है और कर सकते हैं: औसत और बढ़ाया जब, कारण उत्तेजना दालों (चित्रा 3 बी में ऊपरी पंक्ति) के लिए neuromuscular प्रतिक्रिया घटता निम्नलिखित विशेषता गुण (चित्रा 3 बी में कम पंक्ति) दिखाने बाद में गणना और आँकड़ों के लिए प्राप्त किया जा. अनियमित संकेत चालन और / या suboptimal रिकॉर्डिंग आम तौर पर सिर्फ एक सकारात्मक और एक नकारात्मक विक्षेपन या संकेत विरूपण से अधिक के साथ विभिन्न संकेत विकृतियों में परिणामकम आयाम (चित्रा -3 सी) के साथ (bimodal आकार). - निर्धारित स्थान पर एक सुई इलेक्ट्रोड (चित्रा 2 में "पी") के साथ समीपस्थ उत्तेजना प्रदर्शन करना.
- अधिकतम आयाम के साथ सबसे अच्छी रिकार्डिंग की स्थिति को प्राप्त करने के लिए, उत्तेजना प्रक्रिया के लिए एक साथ वास्तविक प्रतिक्रिया घटता कल्पना. ऐसा करके, प्रयोगकर्ता तुरंत प्रतिक्रिया घटता के आकार के साथ ही आयाम के आकार का आकलन करने में सक्षम है.
- यदि आवश्यक हो, थोड़ा और ध्यान से स्थिति और / या sciatic तंत्रिका के संबंध में उत्तेजना सुई के कोण में हेरफेर. उत्तेजना शर्तों की यह कोमल अनुकूलन सबसे बड़ी संभव मूल्य और ठेठ biphasic आकार की एक प्रतिक्रिया वक्र (चित्रा 4) के साथ लगातार आयाम तक पहुँचने की अनुमति देता है.
- निर्धारित स्थान (चित्रा 2 में "डी एस") पर एक सुई इलेक्ट्रोड के साथ बाहर का उत्तेजना प्रदर्शन करना.
- Completio बादयह sternal अवलंबन बनाए रखने के लिए पर्याप्त होश आ गया है जब तक पता माप की एक अलग पिंजरे में परीक्षण किया माउस हस्तांतरण. यह पूरी तरह से संज्ञाहरण से बरामद किया है जब तक नायाब और अन्य जानवरों की कंपनी में एक जानवर न छोड़ें. पश्चात दर्द के प्रबंधन के लिए समय पर लंबे समय तक अभिनय दर्दनाशक दवाओं प्रशासन. Nonsteroidal विरोधी भड़काऊ दवाओं (NSAIDs) और नशीले पदार्थों की प्रणालीगत प्रशासन 1-3 दिनों के लिए सिफारिश कर रहे हैं.
- वैकल्पिक रूप से, गर्दन अव्यवस्था से जैसे जानवर के लिए किसी भी आगे दर्द, बिना एक त्वरित और मानवीय ढंग से अभी भी anesthetized माउस बलिदान.
चित्रा 4. अधिकतम आयाम के साथ CMAP रिकॉर्डिंग निर्धारित करने के चित्रण. एक पूरा पंजीकरण श्रृंखला प्रस्तुत किया है. (एक (ख) थोड़ा सा उत्तेजना सुई आंदोलन का परिणाम है. (ग) सुई नियुक्ति में अतिरिक्त परिवर्तन के पास अधिकतम आयाम सहित विभिन्न आयाम के साथ CMAP रिकॉर्डिंग का उत्पादन. पास अधिकतम आयाम के धारावाहिक CMAP रिकॉर्डिंग के साथ (डी) उत्तेजना सुई प्रतिस्थापन. नोट: CMAP आयाम में विशिष्ट घटती इष्टतम उत्तेजना साइट 12, 13 में दोहराव उत्तेजना के दौरान हो सकता है. सितारे औसत के लिए दर्शाया अधिकतम आयाम के साथ CMAP रिकॉर्डिंग से संकेत मिलता है.
3. विश्लेषण
- एक उपयुक्त सॉफ्टवेयर पैकेज (जैसे AtisaPro) का उपयोग प्रतिनिधि neuromuscular समारोह प्रतिक्रिया डेटा सेट के आधार पर तंत्रिका चालन मापदंडों निकालने.
नोट: विशेष देखभाल के साथ समय से संबंधित डेटा दृढ़ संकल्प संभाल कृपया क्योंकि परिसर मोटर कार्रवाई बर्तन के मोड़ बिंदु दृढ़ संकल्पential (CMAP) शुरुआत और समापन मुश्किल हो सकता है. सत्यापित reproducibility के साथ एक प्रक्रिया शुरू होने के बाद और समाप्ति से पहले संकेत deflections पर उभयनिष्ठ उपयोग किया जाता है, जहां चित्रा 3 बी, में दी गई है. - 'संकेत विलंबता' और 'CMAP' मूल्यों की गणना.
- CMAP अवधि 'लेटेंसी' प्रारंभिक नकारात्मक विक्षेपन के शिविर शुरू होने के बीच समय अवधि के आधारभूत कहा जाता है के लिए वापसी करने के लिए प्रारंभिक जबकि, उत्तेजना और CMAP शुरू होने के बीच के समय में देरी का प्रतिनिधित्व करता है '. बाहर का और प्रॉक्सिमल उत्तेजना साइटों के बीच की दूरी के साथ मिलकर चालन वेग की गणना करने के लिए बाहर का और प्रॉक्सिमल सुप्तावस्था के बीच अंतर करें.
उत्तेजना साइटों के बीच चालन वेग = विलंबता / दूरी - CMAP '(मिश्रित मोटर कार्रवाई संभावित) आयाम (एम वी में दी गई) CMAP संकेत का अधिकतम सकारात्मक और नकारात्मक प्रतिवर्तन बिंदु के बीच परिमाण का प्रतिनिधित्व करता है.
CMAP = मूल्य 'सकारात्मक प्रतिवर्तन बिंदु' - मूल्य 'नकारात्मक प्रतिवर्तन POINT '
- CMAP अवधि 'लेटेंसी' प्रारंभिक नकारात्मक विक्षेपन के शिविर शुरू होने के बीच समय अवधि के आधारभूत कहा जाता है के लिए वापसी करने के लिए प्रारंभिक जबकि, उत्तेजना और CMAP शुरू होने के बीच के समय में देरी का प्रतिनिधित्व करता है '. बाहर का और प्रॉक्सिमल उत्तेजना साइटों के बीच की दूरी के साथ मिलकर चालन वेग की गणना करने के लिए बाहर का और प्रॉक्सिमल सुप्तावस्था के बीच अंतर करें.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
प्रत्येक लिंग के 6 जानवर: हम इस अध्ययन के लिए कुल 12 चूहों के sciatic नसों पर vivo में electrophysiological माप की एक श्रृंखला आयोजित की. माप प्रस्तुत प्रोटोकॉल के साथ प्रदर्शन किया और निम्नलिखित परिणाम दिया गया:
दोनों पुरुष और महिला चूहों लगभग 20 मीटर / सेकंड की एक मतलब sciatic तंत्रिका चालन वेग (चित्रा 5) प्रदर्शित करते हैं. इस साहित्य में अन्य माप के अनुरूप है. इसके अलावा, यह पुरुषों और महिलाओं के बीच तंत्रिका चालन गति में कोई प्रासंगिक मतभेद हमारे आंकड़ों के अनुसार कर रहे हैं कि पता चलता है.
विवो में पुरुष और महिला चूहों के लिए मापा sciatic तंत्रिका की चित्रा 5. तंत्रिका चालन वेग.
विवो में sciatic तंत्रिका की चित्रा 6. CMAP आयाम समीपस्थ बाद (बैंगनी) और बाहर (लाल) उत्तेजना.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
वर्णित प्रोटोकॉल ब्याज की तंत्रिका बेनकाब करने के लिए आवश्यकता के बिना anesthetized चूहों पर sciatic तंत्रिका चालन गुण निर्धारित करने के लिए एक आसान और विश्वसनीय तरीका प्रदान करता है. फिर भी, इस प्रयोगात्मक प्रक्रिया सुई पंचर द्वारा ऊतक चोट का कारण बनता है. इसलिए यह रिकॉर्डिंग खत्म होने के बाद पशुओं का बलिदान करने के लिए एक उचित विकल्प है. हालांकि, पूर्व में रिकॉर्डिंग करने के लिए तंत्रिका की जोखिम की आवश्यकता होती है जो अन्य अधिक आक्रामक प्रक्रियाओं, की तुलना में, ऊतकों को नुकसान 3,14 तुलनात्मक रूप से छोटा है. इसलिए, दोहराया माप संभव हो रहे हैं और संबंधित अध्ययन के डिजाइन पर निर्भर करती है. हालांकि, कुछ बिंदुओं अनुरूप परिणाम को आश्वस्त करने के क्रम में विचार किया जाना है.
इष्टतम रिकॉर्डिंग शर्तों को करने के क्रम में, यह पूरी तरह से बाल हटाने, व्यापक त्वचा की सफाई से और विदेश मंत्रालय के दौरान एक उचित कम शोर स्तर / संदूषण परमिट जो सभी के संपर्क जेल का उपयोग करके त्वचा प्रतिरोध कम करने के लिए महत्वपूर्ण हैsurements.
चित्रा 3 बी में दिखाया गया है इसके अलावा, यह पता लगाया संकेतों के इष्टतम, biphasic वक्र आकार देखने के लिए महत्वपूर्ण है. कभी कभी हम भी फैल antidrome संकेत के माध्यम से या कुछ तंत्रिका शाखाओं द्वारा स्पष्ट रूप से अनियमित संकेत चालन का एक उत्पाद है कि घटता पता लगा. इस परिदृश्य सिर्फ एक सकारात्मक और अधिक से अधिक और एक नकारात्मक विक्षेपन के साथ या एक विभाजन संकेत आकार, कम आयाम, और / या चौड़ी संकेत (चित्रा -3 सी) के साथ अलग संकेत विकृतियों में यह परिणाम है. पेशी के लिए उत्तेजना की बात से शास्त्रीय orthodrome संकेत प्रसार सुनिश्चित करने के लिए, केवल उन रिकॉर्डिंग चित्रा 3 बी में दिखाया गया है एक स्पष्ट आकार प्रदर्शित करने वाले quantifications के लिए इस्तेमाल किया जाना चाहिए.
यह संज्ञाहरण परिधीय नसों पर electrophysiological रिकॉर्डिंग को प्रभावित कर सकते हैं कि ध्यान में रखा जाना चाहिए. पिछली रिपोर्टों से संकेत दिया है कि एक के लिए isoflurane के उपयोगnesthesia nonanesthetized स्थितियों 14 के तहत CMAP माप की तुलना में स्पष्ट रूप से CMAP मूल्यों को कम करता है. फिर भी, इस के साथ साथ प्रक्रिया का इस्तेमाल किया, NCV पर कम से कम प्रभाव पड़ता है प्रयोगात्मक प्रदर्शन के दौरान प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य डेटा बचाता है और चूहों 15 में परिधीय तंत्रिका कार्यों का मूल्यांकन करने के क्रम में संज्ञाहरण की सबसे सुरक्षित, सबसे प्रभावी तरीका है.
अंत में, एक sciatic तंत्रिका motoric और संवेदी दोनों फाइबर इलाकों में शामिल है कि विचार करने के लिए है. मोटर या संवेदी घटक या तो की एक अलग विश्लेषण क्योंकि बाहरी सुप्रा अधिक से अधिक तंत्रिका उत्तेजना और प्रेरित orthodrome संकेत प्रचार में इस्तेमाल किया यहाँ के असंभव है. इस मुद्दे के समाधान के लिए, हम भी पिडली का तंत्रिका 16, माउस के पिछले अंग के पार्श्व टखने में प्रेरित किया जा सकता है कि एक शुद्ध संवेदी तंत्रिका से electrophysiological रिकॉर्डिंग प्रदर्शन किया. हालांकि, पिडली का तंत्रिका के छोटे आकार के निम्न समस्याओं की ओर जाता है: पहला, आम तौर पर नहीं बल्कि एक SMAरिकॉर्डिंग के दौरान करूँगा संभावित आकार परिष्कृत डेटा विश्लेषण की आवश्यकता है, जो प्राप्त किया जा सकता है. रिकॉर्डिंग को पूरा करने की कोशिश कर रहा है, जबकि दूसरा कारण, puncturing के लिए अध्ययन के तहत पिडली का तंत्रिका के आकस्मिक चोटों की एक निश्चित संख्या टाला नहीं जा सकता.
हमारे मामले में sciatic तंत्रिका - - पिछले मापन के लिए अन्य प्रोटोकॉल 17 के विपरीत, यह ब्याज की तंत्रिका निकालने के लिए आवश्यक नहीं है. एक संरक्षित जीव से रिकॉर्डिंग लेने से, अक्षत तंत्रिका पर्यावरण की शारीरिक शर्तों के संरक्षित कर रहे हैं. इसके अलावा, चूहों को ऊतकों को नुकसान और अधिक आक्रामक प्रक्रियाओं की तुलना में छोटा है.
Sciatic तंत्रिका के संबंध में उचित इलेक्ट्रोड नियुक्ति के दृश्य पुष्टि संभव नहीं है क्योंकि दूसरी ओर, इस तकनीक का उपयोग तंत्रिका जोखिम की कमी stimulations के अनुरूप प्रजनन और अधिक कठिन बना देता है. हालांकि, recor दौरान प्रतिक्रिया घटता के एक साथ निगरानीdings मज़बूती से उचित उत्तेजना सुई स्थिति को परिभाषित करने के लिए एक आसान तरीका है.
इस विधि का प्रयोग, neuromuscular बीमारियों के विभिन्न मौजूदा और नए माउस मॉडल ठीक से तंत्रिका चालन संपत्तियों के मामले में लक्षण वर्णन किया जा सकता है: demyelinating phenotypes स्पष्ट रूप से वर्णित है, जहां पिछले एक काम के रूप में दिखाया है, उदाहरण के लिए मुख्य रूप से मांसपेशियों या axonal रोगों के पशु मॉडल से प्रतिष्ठित किया जा सकता विधि 7 प्रदर्शन किया गया है.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
लेखकों का खुलासा करने के लिए कुछ भी नहीं है.
Acknowledgments
इस काम SFB 604, DFG एमओ 1421/2-1 और Krebshilfe 107089 (एचएम के लिए) द्वारा समर्थित किया गया. बाल ट्यूमर फाउंडेशन (न्यू यार्क, संयुक्त राज्य अमरीका) से एक युवा अन्वेषक पुरस्कार के प्राप्तकर्ता है.
Materials
Name | Company | Catalog Number | Comments |
Concentric Needle Electrodes (Stimulation) | Natus Medical Incorporated, San Carlos, CA, USA | 9013S0901 | |
Digital Ring Electrodes (Recording) | Natus Medical Incorporated, San Carlos, CA, USA | 9013S0302 | |
ToM - Tower of Measurement (A/D converter) | GJB Datentechnik GmbH, Langewiesen, Germany | ||
AtisaPro, data acquisition and analysis software | GJB Datentechnik GmbH, Langewiesen, Germany | ||
HSE-Stimulator T | Hugo Sachs Elektronik, Hugstetten, Germany |
References
- Kimura, J. 3rd ed. Electrodiagnosis in Diseases of Nerve and Muscle. , Oxford University Press. (2001).
- Rutkove, S. B. Effects of temperature on neuromuscular electrophysiology. Muscle Nerve. 24, 867-882 (2001).
- Xia, R. H., Yosef, N., Ubogu, E. E. Dorsal caudal tail and sciatic motor nerve conduction studies in adult mice: technical aspects and normative data. Muscle Nerve. 41, 850-856 (2010).
- Zielasek, J., Martini, R., Toyka, K. V. Functional abnormalities in P0-deficient mice resemble human hereditary neuropathies linked to P0 gene mutations. Muscle Nerve. 19, 946-952 (1996).
- Raynor, E. M., Ross, M. H., Shefner, J. M., Preston, D. C. Differentiation between axonal and demyelinating neuropathies: identical segments recorded from proximal and distal muscles. Muscle Nerve. 18, 402-408 (1995).
- Pareyson, D., Scaioli, V., Laura, M. Clinical and electrophysiological aspects of Charcot-Marie-Tooth disease. Neuromol. Med. 8, 3-22 (2006).
- Schulz, A., et al. Merlin isoform 2 in neurofibromatosis type 2-associated polyneuropathy. Nat. Neurosci. 16, 426-433 (2013).
- Lamontagne, A., Buchthal, F.
Electrophysiological studies in diabetic neuropathy. J. Neurol. Neurosurg. Psychiatry. 33, 442-452 (1970). - Andersen, H., Nielsen, J. F., Nielsen, V. K. Inability of insulin to maintain normal nerve function during high-frequency stimulation in diabetic rat tail nerves. Muscle Nerve. 17, 80-84 (1994).
- Magda, P., et al. Comparison of electrodiagnostic abnormalities and criteria in a cohort of patients with chronic inflammatory demyelinating polyneuropathy. Arch. Neurol. 60, 1755-1759 (2003).
- Lindberg, R. L., et al. Motor neuropathy in porphobilinogen deaminase-deficient mice imitates the peripheral neuropathy of human acute porphyria. J. Clin. Invest. 103, 1127-1134 (1999).
- Massey, J. M.
Electromyography in disorders of neuromuscular transmission. Sem. Neurol. 10, 6-11 (1990). - Stalberg, E., Falck, B.
The role of electromyography in neurology. Electroencephalogr. Clin. Neurophysiol. 103, 579-598 (1997). - Osuchowski, M. F., Teener, J., Remick, D. Noninvasive model of sciatic nerve conduction in healthy and septic mice: reliability and normative data. Muscle Nerve. 40, 610-616 (2009).
- Oh, S. S., Hayes, J. M., Sims-Robinson, C., Sullivan, K. A., Feldman, E. L. The effects of anesthesia on measures of nerve conduction velocity in male C57Bl6/J mice. Neurosci. Lett. 483, 127-131 (2010).
- Dilley, A., Lynn, B., Pang, S. J. Pressure and stretch mechanosensitivity of peripheral nerve fibres following local inflammation of the nerve trunk. Pain. 117, 462-472 (2005).
- Vleggeert-Lankamp, C. L., et al. Electrophysiology and morphometry of the alpha- and beta-fiber populations in the normal and regenerating rat sciatic nerve. Exp. Neurol. 187, 337-349 (2004).