Protocol
Этот протокол следует рекомендациям местного комитета по этике человека.
1. Подготовка
- График измерение микроциркуляции, так что она не совпадает с другими процедурами, такими как забора крови. В доношенных новорожденных лучше всего осуществляется после кормления. Это предотвращает возбуждение и облегчить измерение.
- Убедитесь, что медсестра или родитель занимается поддержку и комфорт новорожденного во время обследования, с использованием принципов новорожденных Индивидуальной выхаживания и Программы оценки 12.
Примечание: Несмотря на то, измерения могут быть выполнены одним человеком, то настоятельно рекомендуется иметь второй человек помочь. Один держит камеру и ориентирована на новорожденных а другой работает компьютер и программное обеспечение. По нашему опыту, это приводит к более высоким качеством изображения и более короткой продолжительности процедуры. - Если клиническое состояние разрешений новорожденных, поместитеноворожденного в положении лежа на спине. Изображения Микроциркуляторное может быть выполнена в положении лежа, но это требует больше навыков и терпения.
- Убедитесь, что температура тела недоношенного ребенка находится в соответствующем диапазоне (36,5 - 37,5 градусов по Цельсию).
2. Порядок
- Установка устройства вдоль инкубаторе. Убедитесь, что инкубатор на правильной высоте.
- Положите одноразовый колпачок на камеру.
- Нанесите гель, масло или солевой раствор на кончике зонда; это поможет сгладить контакт между зондом и кожи.
- Поместите фотокамеру на вентромедиальном стороне младенцев плеча. Для предотвращения фокус-артефакты, убедитесь, что зонд находится перпендикулярно к коже. Это может потребовать репозиционирование младенцев руку.
Примечание: вентромедиальных сторона плеча является основным местом для измерения кожной микроциркуляции. Это место имеет немного волос лануго и, следовательно, менее склонны к артефактов. Это наиболее легко добратьсяесли пациент помещается в положении лежа на спине. - Чтобы свести к минимуму общую длину процедуры, выиграть время нахождения оптимальной глубины фокуса (Рисунок 3) при поиске места с наименьшим количеством артефактов.
Примечание: Глубина фокуса зависит прежде всего от послеродового возраста, а не гестационного возраста. Средняя глубина фокуса в первую неделю жизни 0 - 80 мкм. Далее, в связи с погашением кожи, глубина фокус быстро возрастает с средним значениям 80 - 200 мкм от 1 - 4 недель послеродового возраста (рисунок 2). В перспективе родился новорожденных средняя глубина фокуса 80 - 160 мкм при рождении. - Стабилизировать зонд, чтобы избежать артефактов движения. Для этого, отдых локоть на окно инкубатора и запястье рядом новорожденных. Кроме того, положение зонда наряду новорожденных на подушку.
- Избегайте артефакты давления, позволяя камеру только имеют ни малейшего контакта с кожей. Артефакты давления может быть гecognized во захвата изображения, если есть еще и вперед поток в сосудах или если крупные сосуды не являются перфузии, пока есть хороший поток в мелких сосудах. Кроме того, если картина течения совпадает по всей экране, остерегайтесь артефактов давления.
- Запись видео для минимальной длительностью 5 сек.
- После успешного захвата, перемещения камеры в другое место на предплечье.
Примечание: Рекомендуется, чтобы захватить всего 5 - 10 видео в 3 - 5 разных местах, а некоторые артефакты признаются только в автономном анализа, что означает, что видео в вопросе не может использоваться для анализа. - Осторожно удалить гель, масло или солевой раствор с кожи с небольшим марли.
3. Анализ на форуме
- Обрезать видео, если есть значительное движение, что препятствует анализу. Перейти в раздел «Сервис» и используйте кнопку "Редактор". Выберите интервал кадров, имеющих право на анализ и нажмите Ь '' обрезать видеоutton. Примечание: Видео являются приемлемыми, если движение в ½ от поля зрения 13.
- Выберите обрезанной видео и стабилизировать его. Перейти в раздел «Сервис» и используйте кнопку "Анализ". Нажмите кнопку '' стабилизации.
Примечание: Все фильмы должны быть стабилизировать до автоматического анализа могут быть выполнены. - Выберите стабилизированного видео. Перейти в раздел "Анализ" и нажмите "Detect" кнопка. Убедитесь, что выделены варианты, "Капилляры» и «Суда».
- После обнаружения (рисунок 4), нажмите кнопку "Де Бакер '' 'CNA или полный отчет микроциркуляторного. Этот отчет включает в себя наиболее часто используемые параметры итоговых как суммарная плотность судно (ТВД), перфузии плотности судно (PVD) и доля перфузии сосудов (PPV).
Примечание: В качестве альтернативы, видео можно экспортировать форума для анализа вручную. Эта опция может быть найден в разделе "Инструменты". СеLect опцию 'Export' и нажмите кнопку '' экспорт AVA.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Цифры 1 и 2 показывают представитель неподвижных изображений высокого качества MI видео. Эти примеры демонстрируют разницу в толщине кожи в одних и тех же детей между 1-й день (рис 1) и 28-й день (рис 2) послеродового возраста. 1 день, есть яркое освещение, достаточное внимание на микро сосудов и минимальным присутствием артефактов. На 28-й день это более трудно найти правильный баланс между акцентом на микро сосудов и артефактов из-за толстой кожей. Обратите внимание, что стабильность, продолжительность и артефакты давления не может быть оценена на этих неподвижных изображений. Это должно быть заметили, во время приобретения изображений или перед автономного анализа.
Рисунок 1. МИ недоношенного ребенка 24 недель Гестационный возраст, день 1. Чрескожная МЯ из ребенка, рожденного в сроке беременности 24 недель. Послеродовой возраст ребенка составляет 1 день. Использованный глубина фокуса 40 мкм. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.
Рисунок 2. МИ недоношенного ребенка 24 недель гестационного возраста, День 28. Чрескожная MI младенца, родившегося в гестационного возраста 24 недель. Послеродовой возраст ребенка составляет 28 дней. Использованный глубина фокуса составляет 160 мкм. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.
Рисунок 3. Различия находится в центре внимания Дepth. Эти два изображения той же самой области подчеркивают важность адекватной глубине фокуса. Неадекватные фокус (слева) приводит к потере видимости судна по сравнению с адекватной фокусе (справа). Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.
Рисунок 4. Результаты автоматического анализа форуме. На этом рисунке показаны результаты автоматического автономного анализа. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
В этой рукописи мы опишем и продемонстрировать подход к чрескожной микроциркуляторного изображений в недоношенных новорожденных. Визуализация этот метод поможет исследователям преодолеть два самых больших проблем в исследовании: воспроизводимость и времени и труда характер обучения новых методов. Этот метод может дать полезную информацию о периферической микроциркуляции у недоношенных младенцев в неинвазивным способом. Последовательные измерения могут помочь клиницистам оценить последствия терапевтических вмешательств. Микроциркуляция является областью, где последний шаг кислорода транспортной цепи происходит. Экспериментальные исследования показали связь между ухудшением микроциркуляции с течением времени и при наличии бактериальных инфекций 14. Как ухудшение периферической микроциркуляции является одним из первых признаков сепсиса у недоношенных детей, как правило, предположили, что периферийное микроциркуляции может помочь предсказать развитиесепсис.
Качество изображений, главным образом, зависит от навыков оператора. Хотя последние камеры устройства обеспечивают более технические характеристики и оборудование, это еще второстепенное значение. Операторы должны быть должным образом обучены изображений микроциркуляторного. Они должны быть знакомы с рекомендациями конференции круглого стола, состоявшегося в Амстердаме в 2006 15 и с критериями качества, разработанных Месси и др 13. Эти шесть критериев (освещение, продолжительность, направленность, содержание, стабильность, давления) являются основой высокого качества и надежных данных. Неопытные операторы, скорее всего, на провал в признании часто встречающиеся давление артефакты 16. Заметим, однако, что эти стандарты качества и рекомендации были разработаны для подъязычного измерения М.И. взрослых и не могут быть непосредственно экстраполированы на кожных измерений МИ у недоношенных детей. Критерии качества и продолжительности содержанияПоэтому труднее достичь.
Кроме того, настоятельно рекомендуется выполнять измерения с двумя операторами и попросить медсестру или родителя присутствовать. Камера должна быть постоянным, артефакты давления следует избегать, программное обеспечение должно работать и благополучия младенца должны быть рассмотрены. Особенно, если ребенок много двигается, это слишком много для одного оператора. Поэтому лучше, чтобы один человек справиться камеру и сосредоточиться на области измерения и другого человека работать с программным обеспечением и проверить жизненно важных функций младенца. Естественно, помимо технических аспектов ИМ, опыт в обращении (тяжелобольных недоношенных новорожденных) имеет важное значение для операторов.
Несмотря на неинвазивной характера, М. И. по-прежнему несет потенциальную нагрузку и риски. Ограничьте продолжительность измерений к минимуму, чтобы предотвратить что-инкубатор и, таким образом, температура тела падает слишком много. Всегда наносите одноразовый защитный колпачок на камеруперед измерениями. Функция этого колпачка двояка: Она защищает кожу от возможного потепления зонда и служит в качестве искусственного барьера для предотвращения бактериального передачи. Кроме того, М. И. оборудование должно регулярно дезинфицировать.
Кроме того, применяются только небольшое количество геля или масла на коже и осторожно удалить его после измерения. Если неправильно, сочетание масла и терапевтического фототерапии может иметь разрушительное воздействие на кожу. Несмотря на то, главным образом детей вряд ли реагировать на измерений, сердечно-дыхательная неустойчивость не может быть исключена. Это причина, почему мы рекомендуем, младенца, поддерживаемый одним из родителей или няни.
После сбора данных, отсутствует анализ видео должны быть выполнены в стандартизованной форме. Коммерческое программное обеспечение доступно для автоматического анализа MI видео в соответствии с руководящими принципами 15. Руководство анализ включает в себя три шага. Во-первых, повышение контрастности может быть ар курсировали в целях достижения оптимального контраста. Во-вторых, видео должно быть стабилизировано. Этот шаг принесет важность стабильности во время измерений. За малейшее дрейфа может сделать видео непригодным для анализа. В-третьих, суда должны быть сделаны и поток должен быть классифицированы. Обратите внимание, что этот последний шаг несет высокий риск плохого в том наблюдателя изменчивостью 17. Поэтому ручной анализ форума должны выполняться только обученными исследователями. Есть два способа отчетов о результатах мер. Традиционный метод анализа капиллярной сети (CNA) отражает общую длину сосудов, разделенных области измеряемой поверхности (мм / мм 2). В качестве альтернативы, тем меньше времени Де Бакер Оценка (DBS) могут быть использованы. В этот счет, три равноудаленных горизонтальных и три равноудаленных вертикальные линии нарисованы на экране. Плотность судно может быть вычислена как число сосудов, пересекающих линии, разделенных общей длины линий (Н / мм).
_content "> Есть недостатки в области исследований микроциркуляции. гетерогенности микроциркуляции делает Сложно установить эталонные значения. Таким образом, большинство исследований наблюдательные исследования или сравнения между группами. Довольно комплексная оценка микроциркуляции видео и субъективного вмешательства человека увеличивает возможность плохой воспроизводимости (Ван ден Берг, 2015 17). Поэтому важно, что метод получения видео стандартизирован.В ближайшем будущем, технический прогресс позволит улучшить исследования в кожной ИМ. Пример автоматизированного компьютерного анализа видеоизображений, которые заменят относительно субъективное человеческое оценку микрососудов и, таким образом, исключающих вариабельность наблюдателя. Хорошим примером стандартизировать эту область исследований является использование беспроводных датчиков изображения, которые последовательно измеряют микроциркуляцию в том же месте. Это сделает кожную MIменьше зависит от оператора.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Авторы не имеют ничего раскрывать.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Cytocam | Braedius | http://www.braedius.com/magnoliaPublic/braedius/products.html | Other well known handheld microscopes to visualize the microcirculation are MicroScan (Microvision Medical) using SDF technique or the CytoScan (CytoMetrics) using OPS technique |
| Disposable Lens Cover | Glycocheck | http://www.glycocheck.com/lenscovers.php | |
| CCTools | Braedius | http://www.braedius.com/magnoliaPublic/braedius/products.html | Another well known offline analysis programme is AVA (Microvision medical). |
References
- Groner, W., et al. Orthogonal polarization spectral imaging: a new method for study of the microcirculation. Nat Med. 5 (10), 1209-1212 (1999).
- Goedhart, P. T., Khalilzada, M., Bezemer, R., Merza, J., Ince, C. Sidestream Dark Field (SDF) imaging: a novel stroboscopic LED ring-based imaging modality for clinical assessment of the microcirculation. Opt Express. 15 (23), 15101-15114 (2007).
- Sherman, H., Klausner, S., Cook, W. A. Incident dark-field illumination: a new method for microcirculatory study. Angiology. 22 (5), 295-303 (1971).
- Trzeciak, S., et al. Early microcirculatory perfusion derangements in patients with severe sepsis and septic shock: relationship to hemodynamics, oxygen transport, and survival. Ann Emerg Med. 49 (1), 88-98 (2007).
- Sakr, Y., Dubois, M. J., De Backer, D., Creteur, J., Vincent, J. L. Persistent microcirculatory alterations are associated with organ failure and death in patients with septic shock. Crit Care Med. 32 (9), 1825-1831 (2004).
- De Backer, D., et al. Microcirculatory alterations in patients with severe sepsis: impact of time of assessment and relationship with outcome. Crit Care Med. 41 (3), 791-799 (2013).
- Buijs, E. A., et al. Early microcirculatory impairment during therapeutic hypothermia is associated with poor outcome in post-cardiac arrest children: A prospective observational cohort study. Resuscitation. , (2013).
- Genzel-Boroviczeny, O., Christ, F., Glas, V. Blood transfusion increases functional capillary density in the skin of anemic preterm infants. Pediatr Res. 56 (5), 751-755 (2004).
- Ergenekon, E., et al. Peripheral microcirculation is affected during therapeutic hypothermia in newborns. Arch Dis Child Fetal Neonatal Ed. 98 (2), F155-F157 (2013).
- Schwepcke, A., Weber, F. D., Mormanova, Z., Cepissak, B., Genzel-Boroviczeny, O. Microcirculatory mechanisms in postnatal hypotension affecting premature infants. Pediatr Res. , (2013).
- van Elteren, H. A., Ince, C., Tibboel, D., Reiss, I. K., de Jonge, R. C. Cutaneous microcirculation in preterm neonates: comparison between sidestream dark field (SDF) and incident dark field (IDF) imaging. J Clin Monit Comput. , (2015).
- Als, H., et al. Individualized Behavioral and Environmental Care for the Very-Low-Birth-Weight Preterm Infant at High-Risk for Bronchopulmonary Dysplasia - Neonatal Intensive-Care Unit and Developmental Outcome. Pediatrics. 78 (6), 1123-1132 (1986).
- Massey, M. J., et al. The microcirculation image quality score: development and preliminary evaluation of a proposed approach to grading quality of image acquisition for bedside videomicroscopy. J Crit Care. 28 (6), 913-917 (2013).
- Weidlich, K., et al. Changes in microcirculation as early markers for infection in preterm infants--an observational prospective study. Pediatr Res. 66 (4), 461-465 (2009).
- De Backer, D., et al. How to evaluate the microcirculation: report of a round table conference. Crit Care. 11 (5), R101 (2007).
- Sallisalmi, M., Oksala, N., Pettila, V., Tenhunen, J. Evaluation of sublingual microcirculatory blood flow in the critically ill. Acta Anaesthesiol Scand. 56 (3), 298-306 (2012).
- van den Berg, V. J., et al. Reproducibility of microvascular vessel density analysis in Sidestream dark-field-derived images of healthy term newborns. Microcirculation. 22 (1), 37-43 (2015).
