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Chemistry

मैट्रिक्स के माध्यम से सिंथेटिक पॉलिमर के लक्षण वर्णन लेजर सहायता Desorption उड़ान के Ionization समय (मालदी-तोफ) मास स्पेक्ट्रोमेट्री

Published: June 10, 2018 doi: 10.3791/57174
Automatic Translation
1, 1
1Department of Chemistry, Tulane University

Summary

मैट्रिक्स के लिए एक प्रोटोकॉल की सहायता से लेजर desorption उड़ान मास स्पेक्ट्रोमेट्री के ionization समय (मालदी-तोफ एमएस) सिंथेटिक पॉलिमर के लक्षण वर्णन नमूना तैयारी, वर्णक्रम अधिग्रहण, और डेटा विश्लेषण के अनुकूलन सहित वर्णित है ।

Abstract

वहां कई तकनीकों है कि सिंथेटिक homopolymers के लक्षण वर्णन में नियोजित किया जा सकता है, लेकिन कुछ के रूप में मैट्रिक्स के रूप में अंत में समूह विश्लेषण के लिए जानकारी के उपयोगी प्रदान-लेजर desorption ionization उड़ान मास स्पेक्ट्रोमेट्री (मालदी-तोफ MS) के समय की मदद की । इस ट्यूटोरियल नमूना तैयारी के अनुकूलन के लिए तरीकों को दर्शाता है, वर्णक्रमीय अधिग्रहण, और मालदी का उपयोग सिंथेटिक पॉलिमर के डेटा विश्लेषण--तोफ नमूना तैयारी के दौरान MS महत्वपूर्ण पैरामीटर मैट्रिक्स के चयन में शामिल हैं, एक उचित cationization नमक की पहचान, और मैट्रिक्स, कटियन, और analyte के सापेक्ष अनुपात ट्यूनिंग । इस तरह के मोड के रूप में अधिग्रहण मापदंडों (रैखिक या रिफ्लेक्टर), ध्रुवीकरण (सकारात्मक या नकारात्मक), त्वरण वोल्टेज, और देरी समय भी महत्वपूर्ण हैं । इस बहुलक को संश्लेषित करने और दोनों डेटा अधिग्रहण मानकों और नमूना तैयारी की स्थिति को अनुकूलित करने के लिए शामिल रसायन विज्ञान के कुछ ज्ञान को देखते हुए, स्पेक्ट्रा स्पष्ट करने के लिए सक्षम करने के लिए पर्याप्त संकल्प और बड़े पैमाने पर सटीकता के साथ प्राप्त किया जाना चाहिए सबसे homopolymers के अंत समूहों का निर्धारण (१०,००० नीचे जनता) दोहराने इकाई द्रव्यमान और समग्र आणविक वजन वितरण के अलावा । हालांकि पॉलिमर के एक सीमित सेट पर प्रदर्शन किया, इन सामांय तकनीक बड़े पैमाने पर वितरण का निर्धारण करने के लिए सिंथेटिक पॉलिमर की एक बहुत व्यापक रेंज के लिए लागू कर रहे हैं, हालांकि अंत समूह दृढ़ संकल्प संकीर्ण फैलाव के साथ homopolymers के लिए ही संभव है ।

Introduction

बहुलकीकरण तकनीकों के रहने में सुधार के साथ, मात्रात्मक रूप से कार्यात्मक अंत समूहों के साथ परिशुद्धता पॉलिमर तेजी से उपलब्ध है1। azide के समवर्ती विकास-alkyne और thiolene क्लिक करें chemistries अंय अणुओं के लिए moieties के लगभग मात्रात्मक युग्मन सक्षम है, संकर सामग्री2,3,4 की एक सीमा तक पहुंच प्रदान . हालांकि, सटीक विश्लेषणात्मक तकनीक दोनों प्रारंभिक सामग्री और इन बहुलक विकार प्रतिक्रियाओं के उत्पादों को चिह्नित करने के लिए आवश्यक हैं । मैट्रिक्स-असिस्टेड लेजर desorption/उड़ान मास स्पेक्ट्रोमेट्री के ionization समय (मालदी-तोफ एमएस) ionization पॉलिमर के लिए एक मूल्यवान नरम निस्र्पक विश्लेषणात्मक तकनीक है, क्योंकि यह न्यूनतम के साथ एक भी आरोप राज्य में बहुलक आयनों उत्पन्न कर सकते हैं विखंडन5,6. मालदी-तोफ एमएस बहुलक लक्षण वर्णन के अंय पारंपरिक तरीकों पर प्रमुख लाभ है क्योंकि यह व्यक्ति n के संकल्प के साथ बड़े पैमाने पर स्पेक्ट्रा प्रदान कर सकते है बहुलक जन वितरण के भीतर mers । एक परिणाम के रूप में, इस तरह के बड़े पैमाने पर स्पेक्ट्रा औसत आणविक वजन, दोहराने इकाई द्रव्यमान के बारे में सटीक जानकारी प्रदान कर सकते हैं, और आणविक वजन फैलाव7, जो बारी में कर सकते हैं स्पष्ट प्रतिस्पर्धा बहुलकीकरण तंत्र ऐसी श्रृंखला 8 स्थानांतरण के रूप में . तथापि, मालदी-तोफ MS विशेष रूप से के बारे में जानकारी प्रदान करने के लिए बहुलक अंत समूह9,10, जो अंत समूह संशोधनों की पुष्टि करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है10,11 और अन्य ट्रांस्फ़ॉर्मेशन12 जैसे बहुलक cyclizations11,13. समान रूप से महत्वपूर्ण, analyte की अपेक्षाकृत छोटी राशि (उप माइक्रोग्राम) बड़े पैमाने पर spectrometric विश्लेषण के लिए आवश्यक इस तकनीक लक्षण वर्णन जब केवल सामग्री की मात्रा का पता लगाने के लिए उपयोगी बनाता है उपलब्ध हैं ।

मालदी-तोफ एमएस विश्लेषण पॉलिमर के चार अलग चरणों में विभाजित किया जा सकता: नमूना तैयारी, साधन अंशांकन, वर्णक्रमीय अधिग्रहण, और डेटा विश्लेषण. नमूना तैयारी अनुकूलित मालदी-तोफ मास स्पेक्ट्रा पैदा करने के लिए सबसे आवश्यक कदम है और नमूना साधन14,15में पेश किया जाता है से पहले होता है । बहुलक analyte के रूप में समान घुलनशीलता मानकों के साथ एक उचित मैट्रिक्स के चयन के लिए उच्च गुणवत्ता मालदी प्राप्त करने के लिए महत्वपूर्ण है-तोफ मास स्पेक्ट्रा और मैट्रिक्स चयन के लिए दिशानिर्देश14,15अन्यत्र सूचना दी गई है, 16,17. नमूना तैयार करने के लिए बहुलक मालदी "व्यंजनों" का एक डाटाबेस भी ऑनलाइन18प्रकाशित किया गया है । उपंयास पॉलिमर के लिए, मैट्रिक्स चयन सबसे पहले बहुलक के घुलनशीलता को समझने और समान घुलनशीलता पैरामीटर14,19के साथ एक मैट्रिक्स का चयन करके संपर्क किया जा सकता है । उच्च प्रोटॉन संबध के साथ पॉलिमर सबसे मैट्रिक्स14 द्वारा protonated जा सकता है (जो अक्सर carboxylic एसिड समूह होते हैं), लेकिन अन्य पॉलिमर के लिए, एक cationization एजेंट14की आवश्यकता है । क्षार आयनों ऑक्सीजन युक्त प्रजातियों (जैसेपॉलिएस्टर और polyethers) के साथ अच्छी तरह से adduct, जबकि unसंतृप्त हाइड्रोकार्बन (जैसेpolystyrene) चांदी और तांबा आयनों14जैसे संक्रमण धातुओं के साथ adduct, 19. क्योंकि इस प्रयोग में बहुलक नमूनों में ऑक्सीजन परमाणुओं को रीढ़ में निहित, सोडियम या पोटेशियम trifluoroacetate (TFA) cationization एजेंट के रूप में इस्तेमाल किया गया । एक बार मैट्रिक्स और cationization एजेंटों का चयन किया गया है, analyte के सापेक्ष अनुपात, कटियन एजेंट, और मैट्रिक्स सावधानी से शोर करने के लिए उच्च संकेत सुनिश्चित करने के लिए अनुकूलित किया जाना चाहिए । इस कार्यविधि में, नमूना तैयारी के लिए पैरामीटर पहले से ही ऑप्टिमाइज़ किया गया है, हालांकि एक अनुभवजंय नमूना ऑप्टिमाइज़ेशन प्रक्रिया (चरण 1.4.1., आरेख 1) जो व्यवस्थित रूप से तीन घटकों की सांद्रता बदलता है (analyte, मैट्रिक्स और कटियन) तेजी से अपने इष्टतम अनुपात का निर्धारण करने के लिए प्रभावी है ।

डेटा अधिग्रहण भी मापदंडों के एक नंबर के अनुकूलन की आवश्यकता है । सबसे महत्वपूर्ण मापदंडों स्पेक्ट्रोमीटर, साधन आपरेशन मोड (रैखिक बनाम रिफ्लेक्टर), त्वरण वोल्टेज, और निष्कर्षण देरी समय के सकारात्मक या नकारात्मक आयन मोड शामिल हैं । एक और तरीका है कि संकल्प को बढ़ाया जा सकता है "reflectron" मोड20,21,22,23के उपयोग के माध्यम से है । Reflectron मोड मूलतः उड़ान ट्यूब के अंत में आयनों को प्रतिबिंबित करने से डिटेक्टर के उड़ान पथ युगल स्रोत के पास एक डिटेक्टर की ओर वापस जबकि अलग गति के साथ आयनों refocusing, और इसलिए हालांकि संकल्प में वृद्धि सिग्नल की शक्ति को कम. इसके अलावा, उच्च संकल्प स्पेक्ट्रा लेजर शक्ति है जो संख्या और collisions की ऊर्जा कम और इसलिए विखंडन और काइनेटिक सजातीयता को कम करने से संकेत-शोर अनुपात को कम करके प्राप्त किया जा सकता24। इन मापदंडों के सभी ट्यूनिंग द्वारा, आयनों प्रारंभिक स्थिति या वेग है कि लेजर desorption प्रक्रिया के दौरान होता है में किसी भी सजातीयता के प्रभाव को कम करने के लिए ध्यान केंद्रित किया जा सकता है । जब अधिग्रहण मानकों को अनुकूलित कर रहे हैं, isotopic संकल्प अक्सर १०,००० दा से अधिक में जनता के साथ आयनों के लिए प्राप्त किया जा सकता है, हालांकि इस उड़ान ट्यूब और साधन डिजाइन की लंबाई पर भी निर्भर है । सबसे कार्बनिक यौगिकों कि कम से एक heteroatom होते है जैसे लिथियम, सोडियम, और पोटेशियम के रूप में क्षार cations के साथ जटिल करने के लिए प्रवण हैं । क्षार धातुओं के कई monoisotopes या सीमित आइसोटोप के होते हैं और इसलिए वितरण व्यापक नहीं है.

जबकि साधन मापदंडों डेटा परिशुद्धता का अनुकूलन करने के लिए देखते किया जा सकता है, डेटा सटीकता केवल एक उपयुक्त अंशांकन11के साथ हासिल की है. प्रोटीन और पेप्टाइड्स मूल रूप से उनके monodispersity और उपलब्धता के कारण calibrants के रूप में इस्तेमाल किया गया है, लेकिन चर स्थिरता और दोष25के प्रसार से पीड़ित हैं । अधिक लागत प्रभावी और स्थिर विकल्प अकार्बनिक समूहों और polydisperse पॉलिमर26,27,28,29शामिल हैं । दुर्भाग्य से, इन विकल्पों की सुविधा आम जनता, जो बड़े पैमाने पर कार्य जटिल, साथ ही साथ छोटे आम जनता फैलाने, उंहें केवल १०,००० डा नीचे अंशांकन के लिए उपयोगी बना । इन मुद्दों का मुकाबला करने के लिए Grayson एट अल. 25 एक dendrimer आधारित, पॉलिएस्टर एमएस अंशांकन प्रणाली है कि monodisperse है विकसित की है, और दोनों व्यापक मैट्रिक्स और विलायक संगतता, शेल्फ जीवन स्थिरता (> 8 साल) समेटे हुए है, और कम उत्पादन लागत । इस प्रणाली की ताकत पर आधारित है, यह इन प्रयोगों के लिए calibrant के रूप में चुना गया था ।

वहाँ अंशांकन के दो मुख्य प्रकार हैं: आंतरिक और बाहरी30. जब बाह्य औजार, आम जनता के साथ एक मानक है कि ब्रैकेट analyte के मालदी लक्ष्य प्लेट पर analyte से एक अलग नमूना स्थिति में रखा जाता है जिसमें से एक अंशांकन फ़ाइल उत्पन्न किया जा सकता एक अलग जन स्पेक्ट्रम उत्पन्न करने के लिए. दूसरी ओर, सटीकता में वृद्धि अक्सर एक आंतरिक अंशांकन, जो दोनों calibrant और analyte संकेतों के साथ एक संकर स्पेक्ट्रम प्राप्त करने के लिए analyte के साथ calibrant मिश्रण शामिल है के साथ प्राप्त किया जा सकता है । नीचे वर्णित कार्यविधि में, एक बाहरी अंशांकन लागू किया गया था । जन पैमाने के उचित अंशांकन के बाद, सटीक analyte जन डेटा प्राप्त किया जा सकता है । सबसे सटीक अंशांकन सुनिश्चित करने के लिए, यह महत्वपूर्ण है कि डेटा प्राप्ति अंशांकन के बाद जल्द ही होता है ।

अंत में, एक बार अनुकूलित, नपेed डेटा सेट प्राप्त कर रहे थे, और डेटा बहुलक नमूनों के बारे में संरचनात्मक जानकारी प्रदान करने के लिए विश्लेषण किया गया । बहुलक वितरण के भीतर n-mers के बीच की रिक्ति दोहराई जाने वाली इकाई द्रव्यमान का सटीक माप प्रदान कर सकती है । संख्या औसत आणविक भार (एमएन) और अन्य जन वितरण गणना (जैसे, एमडब्ल्यू (वजन औसत आणविक भार) और Đ (फैलाव)) भी मास स्पेक्ट्रा में संकेत वितरण से निर्धारित किया जा सकता ( गणना के लिए ४.२ कदम) । शायद सबसे विशिष्ट, homopolymers के मामले में, अंत समूह जनता की राशि अकेले दोहराने इकाइयों के द्रव्यमान के संबंध में बहुलक वितरण की ऑफसेट निर्धारित करने से पुष्टि की जा सकती है । । जानकारी संपंन मालदी-तोफ मास स्पेक्ट्रा मूल्यवान लक्षणीय डेटा है कि और अधिक पारंपरिक बहुलक लक्षणीय तकनीकों जैसे आकार अपवर्जन क्रोमैटोग्राफी, रूपान्तर-बदलने अवरक्त स्पेक्ट्रोस्कोपी के पूरक है प्रदान करते हैं, और परमाणु चुंबकीय अनुनाद ।

Protocol

चेतावनी: सभी प्रतिक्रियाओं एक धुएं डाकू में चला रहे थे । कृपया उपयोग किए गए किसी भी केमिकल के लिए सभी सामग्री सुरक्षा डाटा शीट (MSDS) पढ़ें और उचित एहतियात बरतें ।

1. नमूना तैयारी

  1. मैट्रिक्स स्टॉक समाधान की तैयारी
    1. भंग 20 α-cyano-4-hydroxycinnamic एसिड (HCCA) के 1 मिलीलीटर में tetrahydrofuran-unअस्थिर (THF), और भंवर जब तक भंग ।
    2. भंग 20 के 2 मिलीग्राम, 5-dihydroxybenzoic एसिड (DHB) THF के 1 मिलीलीटर में, और भंवर जब तक भंग ।
  2. क्षारीय कटियन स्टॉक समाधान की तैयारी
    1. भंग 2 THF के 1 मिलीलीटर में सोडियम trifluoroacetate (NaTFA) के मिलीग्राम, और भंवर ।
    2. भंग 2 THF के 1 मिलीलीटर में पोटेशियम trifluoroacetate (KTFA) के मिलीग्राम, और भंवर ।
  3. analyte स्टॉक समाधान की तैयारी
    1. नमूना 1: भंग 2 पाली के मिलीग्राम (ईथीलीन ग्लाइकोल) 2-aminoethyl ईथर एसिटिक एसिड (एमएन = ५०००) THF के ०.५ मिलीलीटर में, और भंवर जब तक भंग ।
    2. 2 नमूना: भंग polyoxyethylene बीआईएस (azide) के 2 मिलीग्राम (एमएन = २०००) THF के ०.५ मिलीलीटर में, और भंवर जब तक भंग ।
    3. नमूना 3: (एल-lactide) पाली के 2 मिलीग्राम भंग, thiol समाप्त (एमएन = २५००) THF के ०.५ मिलीलीटर में, और भंवर जब तक भंग ।
  4. विश्लेषण के लिए नमूना मिश्रण की तैयारी
    1. मिश्रण मैट्रिक्स, analyte और कटियन समाधान के द्वारा समाधान की एक श्रृंखला तैयार करते हुए इस तरह के नौ अद्वितीय नमूनों मिश्रण किया जाता है कि घटकों के सापेक्ष अनुपात बदलती हैं । उदाहरण के लिए, जोड़े गए मैट्रिक्स स्टॉक समाधान स्थिरांक की मात्रा रखते हुए (उदा., 10 µ l), तीन का एक कारक द्वारा analyte समाधान की मात्रा बदलती है (उदा., ४५, 15, और 5 µ l), जबकि यह भी तीन के एक कारक द्वारा कटियन समाधान की मात्रा बदलती है (उदा ., 9, 3, और 1 µ l) । इन नमूनों को प्रभावी रूप से एक्स और वाई अक्ष (चित्रा 1) पर दो अलग एकाग्रता चर के साथ नमूनों की एक 3 एक्स 3 ग्रिड उपज ।
    2. प्रतिनिधि उदाहरण के लिए, पाली (एल-lactide) समाधान के 15 µ l का मिश्रण, DHB समाधान के 15 µ l के साथ, और µ समाधान का 1 NaTFA l.
    3. पिपेट 1 मालदी लक्ष्य प्लेट पर अच्छी तरह से एक व्यक्ति के नमूने पर प्रत्येक समाधान मिश्रण के μL (चित्रा 2) । नमूने को अच्छी तरह से बाहर बहने से नमूना को रोकने के लिए छोटे भागों में संवर्द्धित जोड़ें, प्रत्येक aliquot अतिरिक्त नमूना जोड़ने से पहले सूखापन के लिए लुप्त होने के लिए अनुमति देता है ।
      नोट: उच्च उबलते बिंदु सॉल्वैंट्स के लिए, एक हवा बंदूक विलायक वाष्पीकरण में तेजी लाने के लिए आवश्यक हो सकता है, हालांकि सावधानी नमूना प्लेट, जो थाली ताना करने के लिए कारण हो सकता है हीटिंग से बचने के लिए इस्तेमाल किया जाना चाहिए ।
  5. अंशांकन के लिए मानक नमूनों की तैयारी
    1. सुझाए गए आपूर्तिकर्ता प्रोटोकॉल का उपयोग करके अंशांकन मानक तैयार करें ।
      नोट: Dendrimer calibrants इस अध्ययन के लिए चयनित किया गया है और शुद्ध dendrimers या मैट्रिक्स, calibrant और कटियन के साथ अनुकूलित अनुपात में मिश्रित के रूप में उपलब्ध हैं ।

2. डेटा अधिग्रहण अनुकूलन

  1. डेटा प्राप्ति प्रारंभ करना
    1. खुला डेटा अधिग्रहण सॉफ्टवेयर "FlexControl" ।
    2. "Equation 1" बटन दबाकर लक्ष्य प्लेट की लोडिंग को सक्षम करने के लिए प्लेटफ़ॉर्म को बाहर निकालें ।
    3. धीरे उचित अभिविंयास में मंच पर भरी हुई calibrant और analyte नमूनों के साथ लक्ष्य प्लेट जगह है ।
    4. "Equation 1" बटन फिर से दबाकर मंच पर लक्ष्य प्लेट इंजेक्षन करने के लिए अधिग्रहण सॉफ्टवेयर का प्रयोग करें ।
    5. एक उपयुक्त डेटा अधिग्रहण विधि का चयन करें (सकारात्मक मोड अधिग्रहण विधि) फ़ाइल दबाकर । विधि का चयन करें।
      नोट: हमारे प्रतिनिधि analytes सहित सबसे बहुलक नमूनों के लिए, ionization एक कटियन के साथ रंग के माध्यम से उंमीद है और, इसलिए, एक सकारात्मक विधा अधिग्रहण विधि सबसे उपयुक्त है । साधन पर निर्भर करता है, कम द्रव्यमान पर्वतमाला के लिए (500 10000 डीए) या जब उच्च संकल्प वांछित है, एक रिफ्लेक्टर मोड विधि फ़ाइल का चयन करें । उच्च आणविक वजन नमूनों के लिए या जब उच्च संकेत संवेदनशीलता की जरूरत है, और कम संकल्प स्वीकार्य है, एक रैखिक मोड विधि फ़ाइल का चयन करें ।
    6. डेटा प्राप्त करने से पहले, सुनिश्चित करें कि डेटा एकत्रित करने के लिए एक उपयुक्त जन सीमा चयनित है-आदर्श रूप में जन सीमा में अपेक्षित वितरण में सबसे कम द्रव्यमान का आधा शामिल किया जाएगा और साथ ही अपेक्षित वितरण में उच्चतम द्रव्यमान दोगुना होगा । पता लगाने टैब पर क्लिक करके और मास रेंजदेखने के द्वारा इस की जाँच करें ।
      नोट: यह सुनिश्चित करने में मदद करता है कि कम आणविक भार ह्रास टुकड़े या उच्च आणविक भार समुच्चय (डिमर) है कि नमूना में मौजूद हो सकता है से संकेत डेटा सेट में शामिल हैं । इसके अलावा, ध्यान दें कि मैट्रिक्स oligomers अक्सर उच्च संकेत तीव्रता के साथ सबसे मालदी-तोफ मास स्पेक्ट्रा में देखा जाता है, उच्च तीव्रता शोर प्रदान करने के रूप में अधिक के रूप में के रूप में १,००० दा, इस मास नीचे उलझी विश्लेषण । हालांकि अंशांकन एक अंतिम डेटा सेट प्राप्त करने से पहले की आवश्यकता होगी, एक सटीक अंशांकन फ़ाइल केवल अगर समान अधिग्रहण मापदंडों विशेष analyte के लिए अनुकूलित उन के रूप में उपयोग किया जाता है प्राप्त किया जा सकता है । इसलिए, analyte जन स्पेक्ट्रम के एक प्रारंभिक अनुकूलन अंशांकन से पहले की आवश्यकता है, एक नपे analyte बड़े पैमाने पर स्पेक्ट्रम के अधिग्रहण के बाद.
  2. प्रारंभिक डेटा प्राप्ति
    1. अधिग्रहण सॉफ्टवेयर से, लक्ष्य प्लेट जो वांछित analyte से मेल खाता है पर स्थिति का चयन करें ।
    2. संकेत को अधिकतम करने के लिए नमूना के आसपास लेजर लक्ष्य चलती जबकि डेटा एकत्रित करना आरंभ करें । डेटा संग्रह आरंभ करने के लिए, प्रारंभकरें दबाएं ।
      नोट: लेजर दोहराया नमूना के बाद एक विशेष स्थान पर मैट्रिक्स निकास कर सकते हैं ।
    3. कैमरे की खिड़की के बाईं ओर स्लाइड पट्टी का उपयोग करना, लेजर शक्ति को समायोजित ऐसे कि isotopic संकल्प प्राप्त करने के लिए आवश्यक न्यूनतम शक्ति हासिल की है.
      नोट: analyte, कटियन, और मैट्रिक्स के इष्टतम अनुपात की पुष्टि करने के लिए कई नमूनों का विश्लेषण करते समय, उन अधिग्रहण मापदंडों के लिए सबसे अच्छा संकेत प्रदर्शित करता है जो नमूना निर्धारित करने के लिए analyte नमूनों में से प्रत्येक पर एक ही लेजर शक्ति का उपयोग करें । नमूना है कि शोर अनुपात के लिए सबसे अच्छा संकेत प्रदर्शित करने के लिए प्रकट होता है के साथ भविष्य अधिग्रहण अनुकूलन जारी रखें ।
  3. डेटा प्राप्ति ऑप्टिमाइज़ेशन
    1. ब्याज की व्यापक रेंज के बीच में एक व्यक्ति के शिखर पर ज़ूम इन करें, त्वरण वोल्टेज में अंतर (इस अध्ययन में उपकरणों के लिए समायोजन द्वारा संकल्प का अनुकूलन, यह "IS2" मूल्य समायोजन शामिल है), जो स्पेक्ट्रोमीटर में है tab.
      नोट: यह सबसे तेजी से बड़े कदम में IS2 मूल्य अलग से अनुकूलित है, नोट ले जो मूल्य का सबसे अच्छा संकल्प (यानी, आधा अधिकतम संकेत तीव्रता पर सबसे छोटी पूर्ण चोटी चौड़ाई) उत्पंन करता है, और फिर आगे के छोटे चरणों में अनुकूलन IS2 मान । आमतौर पर, इष्टतम IS2 मान अधिक है (IS1 के करीब) कम मास पॉलिमर के लिए, और उच्च मास पॉलिमर के लिए कम है ।
    2. यदि वांछित, reflectron मोड का उपयोग कर संकल्प बढ़ाएं ।
      नोट: Reflectron मोड डिटेक्टर के लिए एक लंबा पथ में एक ही एम/z मूल्य के उच्च वेग आयनों मजबूर द्वारा एक ही एम/जेड के आयनों के आरंभिक वेग में विसंगतियों के मुआवजे के लिए अनुमति देता है । डिटेक्टर के लिए पथ में यह वृद्धि एक ही m/z मूल्य की धीमी आयनों के लिए अनुमति देता है डिटेक्टर पर एक साथ आने के लिए, प्रभावी ढंग से वृद्धि की संकल्प के लिए आयनों ध्यान केंद्रित । हालांकि reflectron मोड आम तौर पर संकेत संकल्प में सुधार, कमजोर संकेत तीव्रता के साथ नमूनों के लिए, रैखिक मोड डेटा कल्पना करने के लिए आवश्यक हो सकता है.
    3. अंत में, के रूप में संभव के रूप में कम के रूप में अभी भी शोर अनुपात करने के लिए एक उचित संकेत पैदा (जैसे, लगभग 10 के शोर अनुपात के लिए संकेत) लेजर शक्ति में कमी से लेजर शक्ति का अनुकूलन ।
      नोट: क्योंकि उच्च लेजर शक्तियों आम तौर पर संकल्प को कम करने और विखंडन पैदा कर सकते हैं, सबसे अच्छी गुणवत्ता के साथ बड़े पैमाने पर स्पेक्ट्रा कम लेजर शक्ति का उपयोग कर अधिग्रहीत कर रहे हैं, लेकिन स्कैन की एक उच्च संख्या ।
    4. अधिग्रहण मापदंडों अनुकूलित कर रहे हैं एक बार, फ़ाइल का चयन करके और फिर के रूप में फाइल करने के लिए स्पेक्ट्रम बचाने के लिएunतुले हुए मास स्पेक्ट्रा को बचाने । बाहरी अंशांकन के लिए, calibrant के एक नए अधिग्रहण के तहत इन समान, अनुकूलित मापदंडों से पहले किया जाना चाहिए एक नया अधिग्रहण analyte के नपे जन स्पेक्ट्रम उत्पंन करने के लिए शुरू की है ।

3. मालदी अंशांकन

  1. अंशांकन द्रव्यमान स्पेक्ट्रम का अधिग्रहण
    1. अधिग्रहण पहले से ही analyte के लिए अनुकूलित मापदंडों का प्रयोग, बड़े पैमाने पर मानकों के नमूने के एक अनुकूलित व्यापक स्पेक्ट्रम प्राप्त ।
      नोट: आदर्श रूप में, अंशांकन सेट ब्याज की सीमा से ऊपर एक मानक, नीचे एक, और ब्याज की सीमा में कम से एक शामिल होना चाहिए । अंशांकन की सटीकता सबसे अच्छा है अगर सभी अधिग्रहण मापदंडों दोनों नमूनों के लिए समान हैं ।
  2. एक अंशांकन फ़ाइल बनाएं
    1. सुनिश्चित करें कि किसी भी मौजूदा अंशांकन या स्पेक्ट्रोमीटर टैब के अंतर्गत अमान्य अंशांकन दबाकर अधिलेखित किया जा करने के लिए स्थिति में voided है ।
    2. एक ही अधिग्रहण मापदंडों (जैसे, लेजर शक्ति, IS2 वोल्टेज) का उपयोग करना, लेजर को अच्छी तरह से calibrant युक्त नमूना करने के लिए कदम (जैसे, dendrimer मानक, पेप्टाइड) कर्सर के साथ अच्छी तरह से चयन करके और एक अधिग्रहण स्टार्टदबाकर स्पेक्ट्रम ।
  3. एक बार पर्याप्त संकेत प्राप्त कर लिया गया है, डेटा प्राप्त करना समाप्त करने के लिए प्रारंभ दबाएं ।
  4. एक बार calibrant के एक बड़े पैमाने पर स्पेक्ट्रम का अधिग्रहण किया गया है, अंशांकन टैब है कि अंशांकन मानक से मेल खाती है में जन नियंत्रण सूची ड्रॉपडाउन मेनू का चयन करें । उपयुक्त जन नियंत्रण सूची में उपयुक्त कटियन के साथ चयनित calibrant का संदर्भ जनता के पास होगा.
    नोट: ये calibrant आपूर्तिकर्ता से उपलब्ध होना चाहिए, और जब isotopic संकल्प हासिल किया है monoisotopic मास मूल्यों का उपयोग करने के लिए सुनिश्चित करें (उदा, रिफ्लेक्टर मोड m/z = ५००० के नीचे), और एक औसत जन मूल्यों जब isotopic संकल्प प्राप्त नहीं किया जा सकता (उदा., रेखीय मोड के ऊपर m/z = ५०००),
  5. प्रत्येक चयनित calibrant पीक करने के लिए संगत संदर्भ चोटी से मेल खाने से पहले, सुनिश्चित करें कि एक उपयुक्त पीक खरीदना प्रोटोकॉल संसाधन टैब का चयन करके उपयोग किया जा रहा है ।
    नोट: पीक खरीदना प्रोटोकॉल वर्णक्रमीय रिज़ॉल्यूशन पर आधारित भिन्न हो सकते हैं । एक औसत मास गणना के लिए, सॉफ्टवेयर isotopic चोटियों की पूरी श्रृंखला में बड़े पैमाने पर औसत ले जाना चाहिए । एक monoisotopic मास गणना के लिए, सॉफ्टवेयर केवल पहले isotopic चोटी के सटीक द्रव्यमान की गणना करने के लिए सेट किया जाना चाहिए ।
  6. जन नियंत्रण सूची से संदर्भ जन हित के शिखर के बाईं ओर के क्षेत्र का चयन और फिर लागू करने के लिए नियंत्रण सूची में इसी मास पर क्लिक करके calibrant जन स्पेक्ट्रम के लिए इसी संकेत करने के लिए लागू होते हैं । शेष calibrant चोटियों के लिए प्रक्रिया जारी रखें ।
    नोट: लक्ष्य प्लेट ऊंचाई में सूक्ष्म भिन्नता अंशांकन की सटीकता को प्रभावित कर सकते हैं, क्योंकि सबसे सटीक और सटीक अंशांकन के लिए, analyte और calibrant नमूने के रूप में करीब एक साथ लक्ष्य प्लेट पर संभव के रूप में रखें ।
  7. analyte स्पेक्ट्रम का अधिग्रहण एक बार अनुकूलित अधिग्रहण मापदंडों के लिए जन पैमाने पर तुले हुए हैं ।

4. डेटा विश्लेषण और व्याख्या

  1. चोटी उठा
    1. डेटा विश्लेषण सॉफ़्टवेयर (FlexAnalysis) में analyte स्पेक्ट्रम खोलें ।
    2. अगर isotopic संकल्प एक्स-रेंज बटन में ज़ूम का चयन करके हासिल किया गया है की पहचान करने के लिए एक चोटी पर ज़ूम ।
    3. प्रेस जन सूची । चोटियों का चयन करने के लिए खोजें । यदि monoisotopic पीक हल हो गई है, का चयन isotopic वितरण में यह पहली चोटी एक monoisotopic पीक-खरीदना प्रोटोकॉल का उपयोग कर अपने मास निर्धारित करने के लिए । monoisotopic पीक हल नहीं है, तो एक औसत मास-चोटी खरीदना प्रोटोकॉल का उपयोग करें, और संपूर्ण isotopic वितरण का औसत द्रव्यमान का निर्धारण ।
    4. इस चोटी प्रत्येक n के लिए प्रक्रिया उठा जारी रखें बहुलक वितरण में मेर ।
  2. बहुलक लक्षण वर्णन और अंत समूह विश्लेषण गणना
    नोट: जब सही ढंग से इस्तेमाल किया, मालदी-तोफ एमएस बहुलक की जन वितरण गणना के लिए मूल्यवान, सटीक डेटा प्रदान कर सकते हैं । यह ध्यान दिया जाना चाहिए कि जन वितरण डेटा ही सही है जब बहुलक नमूना के फैलाव अपेक्षाकृत कम है (जैसे, लगभग Đ= १.३ या नीचे) ।
    1. संख्या औसत आणविक वजन की गणना, प्रत्येक जन अंश के तिल की संख्या के संबंध में जन औसत, सूत्र का उपयोग:
      Equation 2
      कहां Ni = एक विशिष्ट आणविक वजन और एममैं = उन अणुओं के विशिष्ट आणविक वजन के अणुओं की संख्या ।
    2. वजन औसत आणविक भार की गणना, प्रत्येक जन अंश के वजन के संबंध में जन औसत, सूत्र का उपयोग:
      Equation 3
      कहां N i = एक विशिष्ट आणविक वजन और एम मैं = उन अणुओं के विशिष्ट आणविक वजन के अणुओं की संख्या ।
    3. एक बार दोनों एमडब्ल्यू और एमएन गणना की गई है, आणविक वजन के अनुपात का उपयोग कर वितरण की चौड़ाई को बढ़ाता है mw/Mn जो फैलाव, Đकहा जाता है ।
    4. मालदी की सबसे अनोखी और शक्तिशाली सुविधा-तोफ एमएस डेटा विश्लेषण निर्धारित करने या homopolymers के अंत समूहों की पुष्टि करने की क्षमता है । मास स्पेक्ट्रम में एक एन-मेर के मनाया जन के लिए निम्नलिखित सूत्र को व्यवस्थित करके अंत समूह का निर्धारण (एमएन-मेर):
      mn-मेर = n (mरॐ ) + mEG1 + मEG2 + mआयन
      जहां n = बहुलकीकरण की डिग्री,
      MEG1 = जन का α-समा समूह,
      मीEG2 = ω के मास-एंड ग्रुप,
      Mनिय = बहुलक की दोहराने इकाई के द्रव्यमान,
      और एमआयन आयन के द्रव्यमान = कि बहुलक के साथ परिसरों ।

Representative Results

नमूना 1: पाली का एक नमूना (ईथीलीन ग्लाइकोल) 2-aminoethyl ईथर एसिटिक एसिड (एमएन = ५०००) (चित्रा 3) trifluoroacetate के साथ एक cationization एजेंट के रूप में पोटेशियम HCCA का उपयोग मैट्रिक्स के रूप में विश्लेषण किया गया था. स्पेक्ट्रम की उंमीद K+ adducts के रूप में अच्छी तरह से अवशिष्ट Na+से मनाया उन का प्रदर्शन किया ।

मालदी-तोफ MS के संकीर्ण वितरण (चित्रा 3) की पुष्टि पाली (ईथीलीन ग्लाइकोल) 2-aminoethyl ईथर एसिटिक एसिड (एमएन = ५०००) । क्योंकि monoisotopic चोटी (विशेष रूप से सबसे प्रचुर मात्रा में तात्विक आइसोटोप, अर्थात् 12सी, 1ज 16हे, और 14N) पर्याप्त अपनी पहचान को सक्षम करने के लिए हल नहीं है, एक लेने के प्रोटोकॉल का उपयोग किया जाता है कि प्रत्येक n-मेर पीक के लिए संपूर्ण isotopic वितरण में औसत द्रव्यमान निर्धारित करता है । इसी तरह, सभी सैद्धांतिक गणना औसत का उपयोग कर निर्धारित कर रहे हैं, बजाय monoisotopic, प्रत्येक तत्व के लिए जन. समीकरणों से चरण 4 का उपयोग करते हुए, विश्लेषण सॉफ़्टवेयर बहुलक जन वितरण की निंन विशेषताओं की गणना करने के लिए उपयोग किया गया था: mn: ४७००, mw: ४७१०, Đ: १.०० ।

आदेश में अंत समूहों की पहचान की पुष्टि करने के लिए, एक व्यक्ति n-मेर (१०४) आगे विश्लेषण (चित्रा 4) के लिए चुना गया था । जन वितरण गणना के साथ के रूप में, क्योंकि monoisotopic चोटी का समाधान नहीं किया जा सकता है, औसत सामूहिक मूल्यों अनुवर्ती गणना के लिए इस्तेमाल किया गया । १०४ के सैद्धांतिक जन मूल्य-पाली के मेर (ईथीलीन ग्लाइकोल) 2-aminoethyl ईथर एसिटिक एसिड दोहराने इकाइयों के द्रव्यमान का शामिल है (४४.०५३० × १०४) प्लस α के जन-अमीन अंत समूह (+ १६.०२३००) और ω के द्रव्यमान-carboxyl अंत समूह (+ ५९.०४४०) प्लस पोटेशियम कटियन के द्रव्यमान (+ ३९.०९७७५) जो ४६९५.६७६७५ के कुल १०४-मेर द्रव्यमान पैदावार । १०४ के लिए मनाया जन मूल्य-मेर + K+ ४६९५.५ है जो सैद्धांतिक मूल्य से मेल खाता है, औसत द्रव्यमान गणना की परिशुद्धता दिया । छोटे की श्रृंखला, स्पेक्ट्रम में ऑफसेट चोटियों, जहां १०४ के सैद्धांतिक द्रव्यमान मूल्य-मेर दोहराने इकाइयों के द्रव्यमान (४४.०५३० × १०४) से अधिक α-अमीन अंत समूह (+ १६.०२३००) प्लस के द्रव्यमान शामिल है के साथ बहुलक के साथ संगत करने के लिए मेल खाती है ω के मास-carboxyl एंड ग्रुप (+ ५९.०४४०) प्लस सोडियम कटियन के द्रव्यमान (+ २२.९८९२२) ४६७९.५६८२२ की कुल १०४-मेर जन दे. १०४ के लिए मनाया जन मूल्य-मेर + ना+ ४६७९.४ है जो केवल ०.२ डीए सैद्धांतिक मूल्य से अलग है । अंत समूह द्रव्यमान का अधिक सटीक निर्धारण कई चोटियों के पार औसत को मापने के द्वारा निर्धारित किया जा सकता है, और11कहीं चर्चा की गई है ।

पाली (ईथीलीन ग्लाइकोल) 2-aminoethyl ईथर एसिटिक एसिड (एमएन = ५०००) नमूना 2, 4-dinitrofluorobenzene (DNFB) (चित्रा 6) के साथ प्रतिक्रिया द्वारा चयनात्मक कार्यात्मक (चित्रा 5) जब अपने संकीर्ण वितरण बनाए रखा. स्पेक्ट्रम का प्रदर्शन सोडियम adducts और मैट्रिक्स के रूप में HCCA इस्तेमाल किया ।

मालदी-तोफ एमएस (ईथीलीन ग्लाइकोल) पाली के संकीर्ण वितरण (चित्रा 6) की पुष्टि करता है 2-aminoethyl ईथर एसिटिक एसिड (एमएन = ५०००) जब DNFB के साथ संशोधित । समीकरणों से चरण 4 का उपयोग करते हुए, विश्लेषण सॉफ़्टवेयर बहुलक जन वितरण की निंन विशेषताओं की गणना करने के लिए उपयोग किया गया था: mn: ४९४०, mw: ४९५० Đ: १.०० ।

निर्धारित करने के लिए यदि पाली (ईथीलीन ग्लाइकोल) 2-aminoethyl ईथर एसिटिक एसिड (एमएन = ५०००) के पूरा functionalization DNFB के साथ हुई थी, वितरण के एक व्यक्ति n-मेर विश्लेषण के लिए चुना गया था (चित्रा 7) । कार्यात्मक १०४ के सैद्धांतिक जन-पाली के मेर (ईथीलीन ग्लाइकोल) 2-aminoethyl ईथर एसिटिक एसिड 2 के साथ प्रतिक्रिया व्यक्त की, 4-dinitrofluorobenzene ४४.०५३० × १०४ (दोहराने इकाइयों के द्रव्यमान) + १८२.११५ (α-अमीन समूह के जन 2, 4 के साथ प्रतिक्रिया के शामिल है- dinitrofluorobenzene) + ५९.०४४ (द्रव्यमान का carboxyl समूह) + २२.९८९२२ (द्रव्यमान का सोडियम कटियन) = ४८४५.६६०२२. n = १०४ के लिए मनाया जन मूल्य ४८४५.८ जो है-०.१ डीए सैद्धांतिक मूल्य से अलग है । सैद्धांतिक और स्वीकार्य मूल्यों के बीच इस बंद के समझौते के उत्पाद के लिए शुरू सामग्री का एक पूर्ण संशोधन का संकेत है, लेकिन अधिक महत्वपूर्ण है, इस के लिए शुरू सामग्री, ४८११.७२७२२ और ४८५५.७८०२२ के साथ जुड़े संकेतों की कमी मास रेंज, या किसी भी अतिरिक्त प्रतिफल अमीन के मात्रात्मक चयनात्मक functionalization की पुष्टि करता है । एक दूसरी चोटी ४८२३.८ में मनाया जाता है जो १०३-कार्यात्मक बहुलक के मेर मैच, लेकिन carboxylic एसिड अंत समूह पर प्रोटॉन की हानि के साथ कि एक सैद्धांतिक द्रव्यमान के साथ एक और सोडियम आयन के साथ परिसरों ४८२३.५८८९९ का अंतर है जो-०.२ डा.

नमूना 2: polyoxyethylene बीआईएस (azide) (एमएन = २०००) (चित्रा 8) का एक नमूना एक cationization एजेंट और मैट्रिक्स के रूप में HCCA के रूप में सोडियम trifluoroacetate का उपयोग कर विश्लेषण किया गया था और केवल अपेक्षित Na+ adducts प्रदर्शित.

इस कम मास रेंज में प्राप्त संकल्प के कारण, n-mers में से प्रत्येक के लिए monoisotopic चोटियों आसानी से हल किया जा सकता है, और इसलिए एक monoisotopic चोटी उठा प्रोटोकॉल का चयन किया गया था (केवल isotopic वितरण में पहली चोटी के बड़े पैमाने पर संकेत औसत ) और सभी इसी गणना प्रत्येक तत्व के monoisotopic जनता का उपयोग किया । मालदी-तोफ MS polyoxyethylene बीआईएस (azide) (Mn = २०००) के संकीर्ण वितरण (चित्रा 8) की पुष्टि करता है । समीकरणों से चरण 4 का उपयोग करते हुए, विश्लेषण सॉफ़्टवेयर बहुलक जन वितरण की निंन विशेषताओं की गणना करने के लिए उपयोग किया गया था: mn: १९४०, mw: १९५०, Đ: १.०१ ।

आदेश में अंत समूह functionalization की पुष्टि करने के लिए, एक व्यक्ति n-मेर (४२) का चयन किया गया (9 अंक) । जन वितरण के ऊपर निर्धारित के साथ के रूप में, monoisotopic जनता क्योंकि monoisotopic चोटियों अच्छी तरह से हल कर रहे थे प्रत्येक n-मेर isotopic वितरण में इस्तेमाल किया गया । ४२ के सैद्धांतिक जन मूल्य-polyoxyethylene बीआईएस के मेर (azide) ४४.०२६२१ × ४२ से मेल खाती है (दोहराने इकाइयों के बड़े पैमाने पर) + ४२.००९२२ (मास ऑफ द azido एंड ग्रुप) + ७०.०४०५२ (मास ऑफ द azidoethyl एंड ग्रुप) + २२.९८९२२ (मास ऑफ़ सोडियम कटियन) = १९८४.१३९७८. n = ४२ के लिए मनाया जन मूल्य १९८३.९५ जो ०.१९ डीए सैद्धांतिक मूल्य से अलग है । यह ध्यान दिया जाना चाहिए कि विशेष रूप से उच्च लेजर शक्तियों पर, azide कार्यक्षमता metastable टुकड़े प्रदर्शित कर सकते हैं; हालांकि, यह इस विशेष मामले में31नहीं देखा गया था ।

polyoxyethylene भा मा ब् यूरो (azide) (Mn = २०००) नमूना अपने संकीर्ण वितरण बनाए रखा जब चुनिंदा एक तांबे catalyzed द्वारा कार्यात्मक azide-alkyne cycloaddition प्रतिक्रिया (चित्रा 10) के साथ 1-ethynyl-4-fluorobenzene(EFB) (चित्रा 11) एक 4-fluorophenyltriazolyl (FPT) समूह उपज के लिए । स्पेक्ट्रा एक cationization एजेंट और मैट्रिक्स के रूप में HCCA के रूप में सोडियम trifluoroacetate का उपयोग करने से अपेक्षित एनए+ adducts प्रदर्शन किया ।

मालदी-तोफ MS EFB के साथ functionalization के बाद polyoxyethylene बीआईएस (azide) (एमएन = २०००) के संकीर्ण वितरण (चित्रा 11 ) की पुष्टि करता है । समीकरणों से चरण 4 का उपयोग करते हुए, विश्लेषण सॉफ़्टवेयर निम्न बहुलक विशेषताओं की गणना करने के लिए उपयोग किया गया था: mn: २२४०, mw: २२५०, Đ: १.००.

नमूने की पूरी functionalization की पुष्टि करने के लिए, monoisotopic जन को चयनित व्यक्ति का विश्लेषण करने के लिए उपयोग किया गया n-मेर (४२) (चित्रा 12) । ४२ के सैद्धांतिक जन मूल्य-polyoxyethylene बीआईएस के मेर (azide) 1 के साथ प्रतिक्रिया-ethynyl-4-fluorobenzene से मेल खाती है ४४.०२६२१ × ४२ (दोहराने इकाइयों के द्रव्यमान) + १६२.०४६७५ (मास के FPT अंत समूह) + १९०.०७८०५ (मास के FPT एथिल अंत समूह 1-ethynyl-4-fluorobenzene) + २२.९८९२२ (सोडियम कटियन के द्रव्यमान) = २२२४.२१४८४ । n = ४२ के लिए मनाया जन मूल्य २२२४.१६ जो ०.०५ डीए सैद्धांतिक मूल्य से अलग है ।

नमूना 3: पाली (एल-lactide) का एक नमूना, thiol समाप्त (एमएन = २५००) (चित्रा 13) एक cationization एजेंट के रूप में सोडियम trifluoroacetate का उपयोग कर विश्लेषण किया गया था और केवल अपेक्षित ना+ adducts और DHB मैट्रिक्स के रूप में प्रदर्शित.

मालदी-तोफ MS (L-lactide) पाली के संकीर्ण वितरण की पुष्टि, thiol समाप्त (एमएन = २५००) (चित्रा 13). चरण 4 से समीकरणों का उपयोग करते हुए, प्रोग्राम विश्लेषण निम्न बहुलक विशेषताओं की गणना करने के लिए उपयोग किया गया था: mn: २३१०, mw: २३६०, Đ: १.०२.

नमूने की पूरी functionalization की पुष्टि करने के लिए, monoisotopic मास का उपयोग किसी चयनित व्यक्ति का विश्लेषण करने के लिए किया गया था n-मेर (26) (चित्रा 14) । 26 के सैद्धांतिक जन मान-पाली के मेर (L-lactide), thiol समाप्त (एमएन = २५००) ७२.०२११३ × 26 से मेल खाती है (दोहराने इकाइयों के बड़े पैमाने पर) + १७.००२७४ (हाइड्रॉक्सिल समूह के बड़े पैमाने पर) + ६१.०११२ (ω के मास-thiol अंत समूह) + २२.९८९२२ (सोडियम के द्रव्यमान कटियन) = १९७३.५५२५४. n = 26 के लिए मनाया मास मान १९७३.६२ है जो है-०.०७ डीए सैद्धांतिक मूल्य से अलग है । एक छोटे संकेत २०४५.७४ में मनाया जाता है जो ७२.०२११३ × 27 (दोहराने इकाइयों के द्रव्यमान) + १७.००२७४ (हाइड्रॉक्सिल अंत समूह के द्रव्यमान) + ६१.०११२ (ω-thiol अंत समूह के द्रव्यमान) + २२.९८९२२ (द्रव्यमान सोडियम कटियन के) से मेल खाती है । सैद्धांतिक द्रव्यमान २०४५.५७३६७ है जो मनाया द्रव्यमान से एक ०.१७ अंतर है । यह छोटी सी तीव्रता, विषम-क्रमांकित दोहराने इकाई लैक्टिक अम्ल के बहुलकीकरण की अंगूठी खोलने के दौरान transesterification का संकेत है । एक तिहाई, बहुत मामूली चोटी २०५७.७३ पर मनाया जाता है । यह है-०.१४ दा एक carboxylic एसिड अंत समूह के साथ एक पाली (एल-lactide) के सैद्धांतिक द्रव्यमान से अलग (बजाय thiol अंत समूह) ७२.०२११३ × 27 (दोहराने इकाइयों के द्रव्यमान) के एक सैद्धांतिक द्रव्यमान के साथ + १७.००२७४ (हाइड्रॉक्सिल अंत समूह के द्रव्यमान) + ७३.०२८९५ (मास of carboxylic acid) + २२.९८९२२ (द्रव्यमान का सोडियम कटियन) = २०५७.५९१४२. इस अतिरिक्त मामूली नापाक संभावना lactide मोनोमर की अंगूठी खोलने बहुलकीकरण के दौरान पानी से दीक्षा का परिणाम है ।

पाली (एल lactide), thiol समाप्त (एमएन = २५००) नमूना एक thiol-िेने प्रतिक्रिया (चित्रा 15) के साथ maleimide (चित्रा 16) के द्वारा कार्यात्मक चयनात्मक जब अपनी संकीर्ण वितरण बनाए रखा । स्पेक्ट्रा एक cationization एजेंट और मैट्रिक्स के रूप में DHB के रूप में सोडियम trifluoroacetate का उपयोग करने से अपेक्षित एनए+ adducts प्रदर्शन किया ।

मालदी-तोफ MS (L-lactide) पाली के संकीर्ण वितरण की पुष्टि करता है, thiol (एमएन = २५००) के बाद maleimide (चित्रा 16) के साथ एक thiol-िेने प्रतिक्रिया के बाद। समीकरणों से चरण 4 का उपयोग करते हुए, विश्लेषण सॉफ़्टवेयर निम्न बहुलक विशेषताओं की गणना करने के लिए उपयोग किया गया था: mn: २३१०, mw: २३४०, Đ: १.०१. यह ध्यान दिया जाना चाहिए कि शुरू सामग्री की तुलना में एमएन और एमडब्ल्यू की कमी ionization पूर्वाग्रह के कारण है (मालदी-तोफ एमएस की कमियों में से एक) । जब प्रारंभिक सामग्री के लिए संशोधन अपेक्षाकृत छोटा है (~ ९७ इस विशेष संशोधन में दा) और फैलाव के बाद संशोधन, मालदी-तोफ औसत आणविक वजन के एमएस गणना कम सटीक बन सकता है ।

पाली (एल-lactide) की पूरी functionalization की पुष्टि करने के लिए, thiol समाप्त (एमएन = २५००) maleimide के साथ एक thiol-िेने प्रतिक्रिया के माध्यम से, monoisotopic जनता के लिए एक चयनित व्यक्ति n-मेर (26) (चित्रा 17) का विश्लेषण किया गया । 26 के सैद्धांतिक जन मूल्य-पाली के मेर (एल-lactide) thiol समाप्त ७२.०२११३ × 26 (दोहराने इकाइयों के द्रव्यमान) से मेल खाती है + १७.००२७४ (मास ऑफ द हाइड्रॉक्सिल एंड ग्रुप) + १५८.०२७५७ (मास ऑफ़ ω-thiol एंड maleimide से जुड़े समूह) + २२.९८९२२ (मास ऑफ द सोडियम कटियन) = २०७०.५६८९१. n = 26 के लिए मनाया मास मान २०७०.५४ है जो ०.०३ डीए सैद्धांतिक मूल्य से अलग है । एक ही पोटेशियम के साथ संबंधित प्रजातियों में भी २०८६.४९ पर मनाया जाता है, जो एक ०.०५ दा अंतर के अनुरूप सैद्धांतिक जन फार्म. एक बहुत छोटी चोटी २१६७.५८ में मनाया जाता है जो ७२.०२११३ × 28 (दोहराने इकाइयों के द्रव्यमान) + १७.००२७४ (हाइड्रॉक्सिल अंत समूह के द्रव्यमान) + ७२.०२१६८ (मास ऑफ carboxylate आयनों) + २२.९८९२२ (द्रव्यमान of सोडियम कटियन) + ३८.९६३७१ (मास पोटेशियम कटियन) से मेल खाती है । सैद्धांतिक द्रव्यमान २१६७.५६८४४ है जो मनाया द्रव्यमान से एक-०.०१ अंतर है और पानी दीक्षा कि शुरू सामग्री में मनाया गया था से एक ही ट्रेस नापाक का संकेत है. यह बहुलक एक सोडियम के बराबर, पोटेशियम की एक, और एक प्रोटॉन की हानि के साथ ionization दर्शाती है । carboxylic एसिड प्रोटॉन और दो cations के साथ जटिल के नुकसान monocarboxylic एसिड कार्यात्मक पॉलिमर के लिए ionization की एक आम विधा है । यह नोट करने के लिए महत्वपूर्ण है कि मास में एक ही बदलाव thiol-िेने प्रतिक्रिया उत्पादों के लिए मनाया जाता है इस carboxylic एसिड के लिए उत्पन्न नहीं होती है-यौगिक जो आगे इंगित करता है कि यह thiol अंत समूह कमी functionalization प्रतिक्रिया से गुजरना करने के लिए.

Figure 1
चित्रा 1:3 x 3 नमूना अनुपात निर्धारण के लिए ग्रिड । नमूनों की एक 3 एक्स 3 ग्रिड का उपयोग करना, cationization एजेंट के रिश्तेदार सांद्रता-analyte-मैट्रिक्स व्यवस्थित empirically एक अनुकूलित नमूना तैयारी का निर्धारण करने के लिए अलग किया जा सकता है । यह आम तौर पर तीन चर स्थिरांक (15 µ l of analyte solution) में से एक धारण करके किया जाता है जबकि अंय दो (cationization एजेंट (y-अक्ष) और मैट्रिक्स (x-अक्ष)) घटकों को एक सेट से कई गुणा (3-गुना उदाहरण में दर्शाया गया है) की मात्रा बढ़ाना । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।

Figure 2
चित्र २: मालदी-तोफ MS लक्ष्य प्लेट. मालदी-तोफ एमएस टारगेट प्लेट एक मेटल प्लेट है जो MALD-तोफ एमएस के नमूनों को व्यक्तिगत कुओं में विश्लेषण के लिए रखती है । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।

Figure 3
चित्रा 3: मालदी-की तोफ बड़े पैमाने पर स्पेक्ट्रम का नमूना 1. इस पूर्ण स्पेक्ट्रम पाली (ईथीलीन ग्लाइकोल) के समग्र वितरण से पता चलता है 2-aminoethyl ईथर एसिटिक एसिड (एमएन= ५०००) दोनों ना+ और कश्मीर+के साथ । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।

Figure 4
चित्रा 4: मालदी-1 नमूना की एक व्यक्ति दोहराने इकाई की तोफ जन स्पेक्ट्रम. इस स्पेक्ट्रम पाली की एक व्यक्ति दोहराने इकाई (ईथीलीन ग्लाइकोल) 2-aminoethyl ईथर एसिटिक एसिड (एमएन = ५०००) अंत समूह के विश्लेषण के लिए दिखाता है । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।

Figure 5
चित्रा 5: नमूना 1 संशोधन के लिए प्रतिक्रिया योजना. प्रारंभिक सामग्री के अंत समूहों की पुष्टि करने के लिए, पाली (ईथीलीन ग्लाइकोल) 2-aminoethyl ईथर एसिटिक एसिड 2, 4-dinitrofluorobenzene के साथ प्रतिक्रिया व्यक्त की (भी गाया जाता है के रूप में जाना जाता है) । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।

Figure 6
चित्र 6: मालदी-नमूना 1 संशोधन की तोफ जन स्पेक्ट्रम । इस पूर्ण स्पेक्ट्रम पाली (ईथीलीन ग्लाइकोल) 2-aminoethyl ईथर एसिटिक एसिड (एमएन = ५०००) 2, 4-dinitrofluorobenzene के साथ कार्यात्मक के समग्र वितरण से पता चलता है । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।

Figure 7
चित्रा 7: मालदी-एक व्यक्तिगत दोहराने इकाई के नमूना 1modification की तोफ जन स्पेक्ट्रम । अंत समूह functionalization की पुष्टि करने के लिए, इस स्पेक्ट्रम 2, 4-एसिटिक के साथ प्रतिक्रिया के बाद पाली (ईथीलीन ग्लाइकोल) 2-aminoethyl ईथर dinitrofluorobenzene एसिड (एमएन = ५०००) की एक व्यक्ति दोहराने इकाई से पता चलता है । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।

Figure 8
चित्र 8: मालदी-नमूना 2 की तोफ मास स्पेक्ट्रम । यह पूर्ण स्पेक्ट्रम polyoxyethylene बीआईएस (azide) के समग्र वितरण से पता चलता है (एमएन = २०००) Na+ adducts के साथ । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।

Figure 9
चित्र 9: मालदी-नमूना 2 की एक व्यक्तिगत दोहराने इकाई की तोफ बड़े पैमाने पर स्पेक्ट्रम । इस स्पेक्ट्रम polyoxyethylene बीआईएस की एक दोहराने इकाई-azide (एमएन = २०००) से पता चलता है ताकि अंत समूहों की पुष्टि करने के लिए कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।

Figure 10
चित्रा 10: नमूना 2 संशोधन के लिए प्रतिक्रिया योजना. प्रारंभिक सामग्री के अंत समूहों की पुष्टि करने के लिए, polyoxyethylene बीआईएस-azide (एमएन = २०००) एक तांबे-catalyzed azide-alkyne cycloaddition (CuAAC) के माध्यम से 1-ethynyl-4-fluorobenzene के साथ प्रतिक्रिया व्यक्त की थी. कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।

Figure 11
चित्र 11: मालदी-नमूना 2 संशोधन की तोफ जन स्पेक्ट्रम । इस पूर्ण स्पेक्ट्रम polyoxyethylene बीआईएस (azide) (एमएन = २०००) के समग्र वितरण से पता चलता है 1-ethynyl-4-fluorobenzene के साथ कार्यात्मक । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।

Figure 12
चित्र 12: मालदी-नमूना 2 संशोधन के एक व्यक्ति दोहराने इकाई की तोफ जन स्पेक्ट्रम । इस स्पेक्ट्रम polyoxyethylene बीआईएस (azide) (एमएन = २०००) के एक व्यक्ति दोहराने इकाई से पता चलता है 1 के साथ प्रतिक्रिया-ethynyl-4-तांबे catalyzed azide के माध्यम से fluorobenzene-alkyne cycloaddition अंत समूह functionalization की पुष्टि करने के लिए । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।

Figure 13
चित्र 13: मालदी-3 के सैंपल की तोफ मास स्पेक्ट्रम । यह पूर्ण स्पेक्ट्रम पाली (एल-lactide), thiol समाप्त (एमएन = २५००) के समग्र वितरण से पता चलता है । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।

Figure 14
चित्र 14: मालदी-3 नमूना की एक व्यक्ति दोहराने इकाई की तोफ जन स्पेक्ट्रम । स्पेक्ट्रम पाली की एक व्यक्ति दोहराने इकाई (एल-lactide), thiol समाप्त (एमएन = २५००) अंत समूहों की पुष्टि करने के लिए दिखाता है । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।

Figure 15
चित्र 15: नमूना 3 संशोधन के लिए प्रतिक्रिया योजना । शुरू सामग्री के अंत समूहों की पुष्टि करने के लिए, पाली (एल-lactide), thiol समाप्त (एमएन = २५००) maleimide के साथ एक thiol-िेने युग्मन के माध्यम से प्रतिक्रिया व्यक्त की थी । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।

Figure 16
चित्र १६: मालदी-नमुना ३ संशोधन की तोफ जन स्पेक्ट्रम. इस पूर्ण स्पेक्ट्रम पाली (एल-lactide), thiol समाप्त (एमएन = २५००) और maleimide के बीच प्रतिक्रिया के उत्पाद के समग्र वितरण से पता चलता है. कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।

Figure 17
चित्र 17: मालदी-नमूना 3 संशोधन के एक व्यक्ति दोहराने इकाई की तोफ जन स्पेक्ट्रम । अंत समूह functionalization की पुष्टि करने के लिए, इस स्पेक्ट्रम maleimide के साथ thiol-िेने प्रतिक्रिया के बाद पाली (एल-lactide), thiol समाप्त (एमएन = २५००) की एक व्यक्तिगत दोहराने इकाई से पता चलता है । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।

Discussion

मालदी-तोफ मास स्पेक्ट्रोमेट्री की वजह से अपनी क्षमता का बहुलक लक्षण वर्णन के लिए एक अमूल्य विश्लेषणात्मक उपकरण के लिए अकेले आरोप लगाया राज्य में बहुलक आयनों पैदा करने के लिए और ंयूनतम विखंडन के साथ है । इस नरम ionization तकनीक लघु लेजर दालों का इस्तेमाल करने के लिए ठोस desorb बहुलक analyte के राज्य के नमूनों में एंबेडेड एक मैट्रिक्स यौगिक गैस चरण में बहुलक आयनों उत्पंन करने के लिए । अणुओं आम तौर पर cations कि मैट्रिक्स में शामिल करने के लिए जन स्पेक्ट्रोमेट्री द्वारा उनके विश्लेषण को सक्षम कर रहे है के साथ रंग से जुड़े हैं । इन macromolecular आयनों तो एक निष्कर्षण वोल्टेज से त्वरित कर रहे हैं उन्हें क्षेत्र में लाने के लिए उड़ान ट्यूब जो उनके एम/जेड सक्षम कर सकते हैं के लिए अपने समय के आधार पर निर्धारित किया जा सकता है के क्षेत्र में मुक्त-उड़ान आयन स्रोत और डिटेक्टर के बीच5 , ३२.

अन्य बहुलक लक्षणीय तकनीक की तुलना में, मालदी-तोफ एमएस स्पेक्ट्रा गुणवत्ता भारी डेटा अधिग्रहण मापदंडों और नमूना तैयारी पर निर्भर है । हालांकि नमूना तैयारी के लिए कोई फार्मूला सेट है, नमूना तैयारी के प्रत्येक घटक के समारोह को समझने और अधिक तेजी से अनुभवजंय अनुकूलन के लिए अनुमति देता है । मालदी नमूना तैयारी में सबसे महत्वपूर्ण कारक मैट्रिक्स का चयन है क्योंकि बहुलक analyte के साथ मैट्रिक्स की अनुकूलता उत्तेजित मैट्रिक्स की अनुमति देने के लिए महत्वपूर्ण है एकल, desorbed अणुओं में एक के5राज्य, 15,17,19. एक बार उपयुक्त मैट्रिक्स और cationization एजेंटों का चयन किया गया है, analyte, मैट्रिक्स, और cationization एजेंट का सही अनुपात निर्धारित किया जाना चाहिए । यह नमूनों की एक दो आयामी ग्रिड बनाने के द्वारा empirically प्राप्त किया जा सकता है (चित्रा 1) मालदी पर-तोफ एमएस लक्ष्य प्लेट (चित्रा 2) एक धुरी पर बढ़ती मैट्रिक्स एकाग्रता और बढ़ती cationization एजेंट एकाग्रता के साथ अन्य.

मालदी नमूना तैयारी के समान, डेटा प्राप्ति पैरामीटर निर्धारित करने के लिए कोई सूत्र सेट नहीं है; हालांकि, कुछ प्रवृत्तियों वर्णक्रमीय अनुकूलन को तेज करने के लिए विचार किया जाना चाहिए । Reflectron मोड, जो संकल्प बढ़ जाती है, लेकिन समग्र संकेत घटाता है, आम तौर पर कम द्रव्यमान पर्वतमाला के लिए चुना है (इन उदाहरणों में, नीचे ४,००० Da) जहां isotopic संकल्प प्राप्त किया जा सकता है । इन मामलों में, monoisotopic मास परिकलन और पीक picking विधियों का उपयोग किया गया था । ४,००० दा ऊपर जनता के साथ बहुलक नमूनों के लिए, रैखिक मोड औसत द्रव्यमान गणना के साथ प्रयोग किया जाता था और उठा तरीकों नुकीला । संकेत संकल्प में सुधार करने के लिए, आयन स्रोत वोल्टेज छोटे वेतन वृद्धि में बड़े जन पॉलिमर एक बड़ा वोल्टेज अंतर होने के सामान्य प्रवृत्ति के साथ समायोजित किया जाना चाहिए (IS1 बनाम IS2).

जबकि अनुकूलित नमूना तैयारी और अधिग्रहण मापदंडों परिशुद्धता प्रदान कर सकते हैं, बड़े पैमाने पर सटीकता केवल प्रभावी अंशांकन के माध्यम से प्राप्त किया जा सकता है । समय की उड़ान के लिए एक दिया द्रव्यमान चर अधिग्रहण मापदंडों और यहां तक कि प्लेट पदों के लिए संमान के साथ आसानी से भिंन हो सकते हैं, इसलिए एक अंशांकन अनुकूलित अधिग्रहण मापदंडों के प्रत्येक सेट के लिए बाहर किया जाना चाहिए ताकि सही द्रव्यमान उपज के लिए निर्धारण५,३०. एक बार अधिग्रहण मापदंडों और नमूना तैयारी अनुकूलित किया गया है, स्पेक्ट्रा इन सटीक एक ही स्थिति का उपयोग कर नपेed किया जाना चाहिए ।

क्योंकि असाधारण संकल्प और बड़े पैमाने पर सटीकता की अनुकूलित मालदी में मनाया-बहुलक की तोफ मास स्पेक्ट्रा, इस तकनीक बहुलक जन वितरण डेटा का निर्धारण करने के लिए एक मूल्यवान मानार्थ उपकरण बन गया है । हालांकि, इसके लिए बहुलक जन वितरण के भीतर व्यक्तिगत दोहराने इकाइयों को हल करने की क्षमता अंत समूह ऐसे जेल permeation क्रोमैटोग्राफी (GPC) और परमाणु के रूप में अंय बहुलक लक्षण वर्णन तकनीकों के सापेक्ष विश्लेषण के लिए एक विशेष लाभ प्रदान करता है चुंबकीय अनुनाद (एनएमआर) । यह अंत समूह functionalization प्रतिक्रियाओं और अंत समूह conjugations प्रतिक्रियाओं की मात्रात्मक प्रकृति की निष्ठा का निर्धारण करने के लिए विशेष रूप से मूल्यवान है । इस पांडुलिपि को बड़े पैमाने पर सटीकता के दो दशमलव अंक के साथ व्यक्तिगत बहुलक दोहराने इकाइयों के द्रव्यमान को हल करने की क्षमता का प्रदर्शन किया है, विश्वास के एक उच्च स्तर के साथ अंत समूह संशोधनों की पुष्टि को सक्षम करने । सटीक बहुलक संश्लेषण के क्षेत्र में हाल ही में किया गया है कि पर्याप्त अग्रिम के साथ, मालदी-तोफ एमएस macromolecular संरचना और कार्यक्षमता निर्धारित करने के लिए एक तेजी से महत्वपूर्ण उपकरण बनता जा रहा है.

Disclosures

लेखक इस अध्ययन में प्रयुक्त गोलाकार calibrants से संबंधित वित्तीय हित है ।

Acknowledgments

लेखक स्मार्ट सामग्री डिजाइन, विश्लेषण, और प्रसंस्करण कंसोर्टियम (SMATDAP) सहकारी समझौते आईआईए के तहत राष्ट्रीय विज्ञान फाउंडेशन द्वारा वित्त पोषित-१४३०२८० और ला बोर्ड रीजेंट्स के एक स्नातक फैलोशिप (एमईपी) के लिए स्वीकार करते हैं । इन प्रयोगों के लिए पॉलिमर के नमूने MilliporeSigma (सिग्मा-Aldrich) द्वारा प्रदान किए गए थे ।  ओपन एक्सेस इस लेख के प्रकाशन MilliporeSigma द्वारा प्रायोजित है ।

Materials

Name Company Catalog Number Comments
polyoxyethylene bis(azide) (Mn=2000) MilliporeSigma (Aldrich) 689696 http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/aldrich/689696?lang=en&region=US
poly(ethylene glycol) 2-amino-ethyl ether acetic acid (Mn= 5000) MilliporeSigma (Aldrich) 757918 http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/aldrich/757918?lang=en&region=US
poly(L-lactide), thiol terminated (Mn=2500) MilliporeSigma (Aldrich) 747386 http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/aldrich/747386?lang=en&region=US
SpheriCal®  peptide low MilliporeSigma (Sigma-Aldrich) PFS20 http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sial/pfs20?lang=en&region=US
SpheriCal®  peptide medium MilliporeSigma (Sigma-Aldrich) PFS21 http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sial/pfs21?lang=en&region=US
SpheriCal®  peptide high MilliporeSigma (Sigma-Aldrich) PFS22 http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sial/pfs22?lang=en&region=US
2,4 dinitrofluorobenzene TCI A5512
maleimide MilliporeSigma (Aldrich) 129585 http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/aldrich/129585?lang=en&region=US
1-ethynylfluorobenzene  Fisher Scientific 766-98-3
triethylamine MilliporeSigma (Sigma-Aldrich) 471283 http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sial/471283?lang=en&region=US
N,N,N',N",N"-pentamethyldiethylenetriamine MilliporeSigma (Aldrich) 369497 http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/aldrich/369497?lang=en&region=US
Copper(I)Bromide MilliporeSigma (Aldrich) 254185 http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/aldrich/254185?lang=en&region=US
glacial acetic acid Fisher Scientific A38212
sodium metabisulfite MilliporeSigma (Sigma-Aldrich) 13459 http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigald/13459?lang=en&region=US
potassium trifluoroacetate MilliporeSigma (Aldrich) 281883 http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/aldrich/281883?lang=en&region=US
trans-2-[3-(tert-butylphenyl)-2-methyl-2-properylidene]malononitrile MilliporeSigma (Aldrich) 727881 http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/aldrich/727881?lang=en&region=US
a-cyano-4-hydroxycinnamic acid MilliporeSigma (Sigma) C8982 http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma/c8982?lang=en&region=US
tetrahydrofuran Fisher Scientific T425-1
dichloromethane VWR Analytical BDH1113-4LG

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रसायन विज्ञान अंक १३६ रसायन विज्ञान बहुलक मास स्पेक्ट्रोमेट्री बहुलक विश्लेषण बहुलक लक्षण वर्णन अंत समूह विश्लेषण उड़ान के समय डेटा विश्लेषण मैट्रिक्स-असिस्टेड लेजर desorption ionization
मैट्रिक्स के माध्यम से सिंथेटिक पॉलिमर के लक्षण वर्णन लेजर सहायता Desorption उड़ान के Ionization समय (मालदी-तोफ) मास स्पेक्ट्रोमेट्री
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Payne, M. E., Grayson, S. M.… More

Payne, M. E., Grayson, S. M. Characterization of Synthetic Polymers via Matrix Assisted Laser Desorption Ionization Time of Flight (MALDI-TOF) Mass Spectrometry. J. Vis. Exp. (136), e57174, doi:10.3791/57174 (2018).

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