Summary
Den nåværende protokollen beskriver en standardisert kirurgisk metode for den elastaseinduserte AAA-modellen gjennom direkte påføring av elastase til adventitia av infrarenal abdominal aorta hos mus.
Abstract
Abdominal aorta aneurisme (AAA), men først og fremst asymptomatisk, er potensielt livstruende da bruddet på AAA vanligvis har et ødeleggende utfall. For tiden er det flere forskjellige eksperimentelle modeller av AAA, som hver understreker et annet aspekt i patogenesen til AAA. Den elastaseinduserte AAA-modellen er den nest mest brukte gnageren AAA-modellen. Denne modellen innebærer direkte infusjon eller påføring av svinepankreaselastase (PVU) til det infrarenale segmentet av aorta. På grunn av tekniske utfordringer utføres de fleste elastaseinduserte AAA-modellen i dag med den eksterne applikasjonen i stedet for en intraluminal infusjon av PVU. Infiltrasjonen av elastase vil forårsake nedbrytning av elastisk lamell i mediallagene, noe som resulterer i tap av aortaveggintegritet og etterfølgende utvidelse av bukaorta. Imidlertid er en ulempe ved den elastaseinduserte AAA-modellen den uunngåelige variasjonen av hvordan operasjonen utføres. Spesielt den kirurgiske teknikken for å isolere det infrarenale segmentet av aorta, materialet som brukes til aortainnpakning og PPE-inkubasjon, den enzymatiske aktiviteten til PVU, og varigheten av PPE-applikasjonen kan alle være viktige determinanter som påvirker den endelige AAA-formasjonshastigheten og aneurismediameteren. Spesielt kan forskjellen i disse faktorene fra forskjellige studier på AAA føre til reproduserbarhetsproblemer. Denne artikkelen beskriver en detaljert kirurgisk prosess av den elastaseinduserte AAA-modellen gjennom direkte påføring av PVU til adventitia av den infrarenale abdominal aorta i musen. Etter denne prosedyren er en stabil AAA-formasjonshastighet på rundt 80% hos mannlige og kvinnelige mus oppnåelig. Konsistensen og reproduserbarheten til AAA-studier ved hjelp av en elastaseindusert AAA-modell kan forbedres betydelig ved å etablere en standard kirurgisk prosedyre.
Introduction
Abdominal aorta aneurisme (AAA) er definert som en segmental dilatasjon av abdominal aorta med minst 50% økning av kardiameter1. AAA er potensielt dødelig, da bruddet kan resultere i en ekstremt høy dødelighet, selv med intervensjon 2,3,4. Det har blitt rapportert at AAA er ansvarlig for omtrent 13.000 dødsfall årlig i USA, noe som gjør det til dentiende ledende dødsårsaken 1,5.
Patogenesen til AAA er ennå ikke helt forstått 6,7,8. For å undersøke den molekylære mekanismen til AAA og teste potensielle terapeutiske mål, er flere eksperimentelle AAA-modeller etablert 9,10. Gnagermodeller av AAA inkluderer elastase, kalsiumklorid, angiotensin II og xenograftmodeller, blant annet den elastaseinduserte AAA-modellen er den nest mest brukte modellen 10,11,12,13,14,15,16,17. Denne modellen innebærer direkte infusjon eller påføring av svinepankreaselastase (PVU) til det infrarenale segmentet av aorta. Penetrasjonen av elastase i det mediale laget av aorta vil forårsake nedbrytning av elastisk lamell og infiltrasjon av inflammatoriske celler, noe som fører til tap av aortaveggintegritet og etterfølgende utvidelse av abdominal aorta 7,18. Den elastaseinduserte AAA-modellen ble først rapportert av Anidjar et al. i 1990 ved hjelp av rotter, der et isolert segment av aorta ble perfundert med elastase17. Senere i 2012 ble en modifisert modell ved hjelp av en periadventitial anvendelse av PVU rapportert av Bhamidipati et al.19. I dag er de fleste operasjoner for den elastaseinduserte AAA-modellen inspirert av Bhamidipatis gruppe og utføres med den eksterne applikasjonen i stedet for intraluminal perfusjon av PVU. Selv om den eksterne applikasjonen har mindre krav til fine kirurgiske ferdigheter, er forekomsten av AAA relativt lavere og størrelsen noe mindre enn for intraluminal perfusjon11,19.
Selv om den er mye brukt i AAA-studier, har den elastaseinduserte AAA-modellen visse begrensninger. En advarsel til denne modellen er de uunngåelige variasjonene av hvordan operasjonen utføres, noe som kan føre til spørsmålet om reproduserbarhet. For eksempel kan forskjellen eksistere i den kirurgiske prosedyren om hvordan det infrarenale segmentet av aorta er isolert og hvilken del av segmentet som er valgt for PPE-applikasjon blant forskjellige laboratorier. Den enzymatiske aktiviteten til PVU og varigheten av PPE-inkubasjon kan også variere. Disse er imidlertid alle essensielle determinanter som påvirker den endelige AAA-formasjonshastigheten og aneurismediameteren. Variasjonen av disse kritiske determinantene gjør datasammenligning av AAA-studier fra forskjellige grupper som bruker denne modellen svært vanskelig. Derfor er det nødvendig med en standardisert kirurgisk prosedyre som et verktøy for å få sammenlignbare resultater fra ulike institusjoner.
Denne artikkelen beskriver en standardisert kirurgisk protokoll for den elastaseinduserte AAA-modellen gjennom direkte påføring av PVU til adventitia av infrarenal abdominal aorta hos mus. Detaljer om kirurgisk materiale og prosedyrer som er avgjørende for vellykket og robust generering av AAA hos mus som bruker denne modellen, vil også bli diskutert.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Dyreprotokollene ble godkjent av University of Michigan Institutional Animal Care and Use Committee (PRO00010092). Mannlige og kvinnelige C57BL/6J wild-type (WT) mus, ~ 7 ukers alder, ble brukt til forsøkene.
1. Dyreforberedelse
- Fôr musene med standard chow diett (se Materialtabell) før og etter operasjonen.
MERK: Ulike stammer og alder på mus kan brukes. Alder fra 5,5-12 uker anbefales imidlertid for å oppnå maksimal forekomst. - For hver mus, administrer 5 mg/kg Carprofen subkutant 30 min før induksjon av anestesi.
- Etter 30 min, administrer 100 mg/kg Ketamin og 5 mg/kg Xylazin via intraperitoneal injeksjon for å indusere anestesi.
2. Forberedelse for kirurgi
- Forbered det kirurgiske materialet.
- Skjær nitrilhanskene i strimler på 4 cm x 4 mm. Klipp bomullsputene i stykker på 3 cm x 2 mm. Autoklaver disse med andre kirurgiske instrumenter, inkludert kirurgisk saks, vevs tang og Halsted-Mosquito hemostater (se Materialfortegnelser).
- Plasser musen i liggende stilling på en steril absorberende dressing pad. Immobiliser fremre og bakre poter med kirurgisk tape.
- Bruk bomullsspissede applikatorer (se Materialfortegnelse) til å børste hårfjernerlotion over det midterste og nedre bukområdet, og vattpinne området med kirurgisk gasbind for å fjerne håret.
- Desinfiser det kirurgiske området minst tre ganger i en sirkulær bevegelse med vekslende anvendelser av 70% alkohol og en jodbasert eller klorhexidinbasert skrubb. La tørke.
3. Kirurgi prosedyre
- Utfør følgende trinn for å få tilgang til bukhulen.
- Test musen for mangel på tå-klype respons før hud snitt.
- Lag et 2,5 cm langsgående snitt på huden langs midtlinjen i midten og underlivet ved hjelp av kirurgisk saks.
- Trekk forsiktig opp den underliggende muskelen og gjør et 2,5 cm langsgående snitt langs linea alba for å få tilgang til bukhulen.
- Eksponer abdominal aorta.
- Bruk fuktede bomullsspissede applikatorer for å flytte tarmene og magen til høyre side av musen.
MERK: Ideelt sett vil dette eksponere det infrarenale segmentet av aorta. Hvis aorta er vanskelig å finne, kan høyre nyre og høyre nyrearterie identifisere aorta (da høyre nyre har en litt lavere anatomisk plassering enn venstre nyre). - Bruk tang for å forsiktig fjerne bindevevet som dekker abdominal aorta og dårligere vena cava (IVC).
MERK: Abdominal aorta og IVC er inneholdt i samme karhylse. Det er unødvendig å fjerne alt bindevevet, da fullstendig fjerning vil øke risikoen for å skade disse to karene. - Bruk tang for å forsiktig dissekere baksiden av abdominal aorta og IVC fra de underliggende musklene.
MERK: Spissene på tangene skal gå inn på baksiden av hylsen tverrgående og lage et hull i fasciaen som forbinder hylsen til de underliggende musklene. Når hullet er laget, forlenge størrelsen ved å sakte slippe tangene. - Plasser et stykke av hanskestripen på 4 cm x 4 mm (som nevnt tidligere, trinn 2.1.1) gjennom baksiden av abdominal aorta og IVC, og rett deretter stripen. Plasser stripen ~0,5 cm fra høyre nyrearterie.
MERK: Pass på at hullet er stort nok til at den omkringliggende fasciaen ikke vrir stripen. - Over stripen legger du et stykke 3 cm x 2 mm bomullspute gjennom baksiden av bukaorta og IVC, og retter deretter bomullsputen.
- Bruk fuktede bomullsspissede applikatorer for å flytte tarmene og magen til høyre side av musen.
- Inkuber elastase.
- Bruk en pipette til å slippe 30 μL av svinepankreaselastase (total enzymatisk aktivitet på 1,8 enhet, se Materialbord) på aortasegmentet over bomullsputen, og pakk deretter bomullsputen og stripen rundt aorta og IVC. Skyll et stykke 10 cm x 10 cm gasbind med steril 0,9% saltvann og legg det på magen.
MERK: Gasbindet trenger bare delvis skylling, da overdrivning vil risikere å fortynne elastasen under. - Etter 30 min, fjern stripen og bomullsputen med tang.
- Bruk en pipette til å slippe 30 μL av svinepankreaselastase (total enzymatisk aktivitet på 1,8 enhet, se Materialbord) på aortasegmentet over bomullsputen, og pakk deretter bomullsputen og stripen rundt aorta og IVC. Skyll et stykke 10 cm x 10 cm gasbind med steril 0,9% saltvann og legg det på magen.
- Lukk bukhulen ved å følge trinnene nedenfor.
- Irriger aorta og bukhule med 500 μL steril 0,9% saltvann. Bruk en 10 cm x 10 cm gasbind for å absorbere gjenværende saltvann.
- Reapproximate muskellagene med en løpende 6-0 ikke-absorberbar monofilament sutur.
- Lukk huden med 3-4 avbrutte 6-0 ikke-absorberbare monofilament suturer.
4. Postoperativ omsorg
- Administrer 5mg/kg Carprofen subkutant på den postoperative dag 1.
- Fjern hud suturer på postoperativ dag 10.
5. Måling av abdominal aorta aneurisme diameter
- Euthanize musene ved CO2 overdosering på postoperativ dag 14. Dette representerer tidspunktet for maksimal dilatasjon.
- Få tilgang til bukhulen som beskrevet i trinn 3.1.
- Utfør vaskulær perfusjon ved å injisere 10 ml 0,9% saltvann i sirkulasjonen gjennom venstre ventrikel.
- Eksponer det infrarenale segmentet av abdominal aorta som beskrevet i trinn 3.1-3.2. Fjern forsiktig det omkringliggende bindevevet og skille abdominal aorta fra IVC.
- Mål diameteren på abdominal aorta med en kaliper.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Totalt ble tjuetre 7 uker gamle wild-type (WT) mus, inkludert 12 kvinner og 11 menn, operert etter den presenterte protokollen. Overlevelsesraten var 100% (kirurgisk dødelighet utelukket). Maksimal abdominal aorta diameter ble målt av en kaliper.
AAA ble definert som å utvide abdominal aorta med en 50% kar diameter økning. Derfor ble en 50% økning i maksimal abdominal aorta diameter valgt som avskjæringspunkt for vellykket AAA-induksjon. Basert på dette kriteriet var forekomsten av AAA på postoperativ dag 14 91,7% for kvinnelige dyr, med 11 av 12 som gjennomgikk kirurgi utviklet AAA; mens forekomsten for mannlige dyr var 72,7 %, med 8 av 11 som gjennomgikk kirurgi utviklet AAA (figur 1A). Blant de 19 dyrene der AAA oppstår, er det en 1,7 ganger og 1,6 ganger økning av maksimal abdominal aorta diameter hos kvinner og menn sammenlignet med ikke-kirurgi kontroller, henholdsvis (Figur 1B). Representative bilder av aortaene fra ikke-kirurgi- og operasjonsgrupper på postoperativ dag 14 er vist i figur 1C.
Figur 1: Karakterisering av AAA hos mus gjennomgår kirurgi. All måling gjøres på postoperativ dag 14. (A) Forekomsten av AAA hos mus som gjennomgikk kirurgi. (B) Maksimal diameter på den infrarenale aorta hos mus fra både ikke-kirurgi (n = 4 for både kvinner og menn) og kirurgigrupper (n = 12 for kvinner; n = 11 for menn). Data er gjennomsnittlige ± SEM. *p < 0,05. (C) Representative bilder av aortas hos mus fra både ikke-kirurgi og kirurgi grupper. Skalastang = 2 mm. Klikk her for å se en større versjon av denne figuren.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Den elastaseinduserte AAA-modellen ble først rapportert av Anidjar et al. ved hjelp av rotter i 199017. En rekke modifiserte versjoner har blitt introdusert de siste tretti årene, sammen med betydelig forbedring i kirurgiske teknikker 19,20,21,22. Hundrevis av institutter bruker elastaseinduserte AAA-modeller som den nest mest brukte gnager eksperimentelle modellen for AAA-studier12. Det er bare naturlig at ulike grupper vil utføre operasjonen for denne modellen litt annerledes. Som et resultat er en advarsel om denne modellen de uunngåelige variasjonene av hvordan operasjonen utføres, noe som gjør sammenligningen av data fra forskjellige grupper som bruker denne modellen svært vanskelig. Variasjonene inkluderer, men er ikke begrenset til, hvor infrarenal segmentet av aorta er utsatt, hvor omfattende fasciallaget som dekker aorta rengjøres, hvor lenge inkubasjonsperioden er, samt materialet som brukes til aortainnpakning og elastase inkubasjon og volumet av elastase lagt på innpakningsmaterialet. Disse er imidlertid alle essensielle determinanter som påvirker den endelige forekomsten og diameteren til AAA. En standardisert kirurgisk prosedyre er nødvendig for å løse problemet med reproduserbarhet forårsaket av disse variasjonene. En standardisert kirurgisk protokoll presenteres her for den elastaseinduserte AAA-modellen gjennom direkte påføring av PVU til adventitiaen til den infrarenale abdominal aorta i musen.
Bortsett fra den konsekvente induksjonsraten til AAA, eier denne protokollen fordelene med lave utgifter og kort driftstid. Det kirurgiske materialet som brukes i denne protokollen kan alle enkelt oppnås til lave kostnader. Gjennomsnittlig driftstid for denne protokollen er 50 min, inkludert 30 min med PPE-inkubasjon. Disse fordelene vil tillate enklere ledning av mange dyrestudier, noe som bidrar til mer betydelig statistisk kraft og reproduserbarhet.
Eksponering av abdominal aorta er det mest kritiske trinnet i denne protokollen. Det er viktig å fjerne bindevevet i karhylsen som omgir abdominal aorta og IVC slik at elastase vil ha en bedre sjanse til å trenge inn i mediallaget av aorta. Å fjerne disse bindevevene er imidlertid tidkrevende og risikerer å skade den underliggende aorta og IVC. Dette er trinnet som de fleste kirurgisk dødelighet er forårsaket av. Hvis IVC eller aorta er skadet, vil de fleste dyr ikke overleve følgende 48 timer selv om de overlever operasjonen, muligens på grunn av kontinuerlig blødning etter operasjonen som fører til ekssanguinasjon. Av denne grunn trenger en delikat balanse mellom å utsette aorta i størst grad og ikke skade de store fartøyene å tenke over. Å etterlate en liten mengde bindevev på karhylsen vil redusere perioperativ dødelighet betydelig mens det ikke påvirker AAAs forekomst. Derfor anbefales det ikke å fjerne bindevevet som dekker aorta og IVC for eksponering for abdominal aorta. Likevel må det utvises ekstrem forsiktighet under abdominal aorta- og IVC-disseksjon fra tilstøtende bindevev.
Anatomisk er abdominal aorta og IVC nært festet via et tynt fascialag og inneholdt sammen i samme karhylse. Noen eksperimentelle modeller som venøs trombose kan kreve separering av aorta fra tilstøtende IVC. Det er imidlertid unødvendig å gjøre det i den elastaseinduserte AAA-modellen23. Noen foretrekker kanskje å rotere karhylsen med klokken slik at aorta vil være rett over IVC, og elastase kan deretter påføres direkte på aorta. Dette er unødvendig ettersom bomullsputen under er mettet med elastase, og aorta vil kontinuerlig bli utsatt for elastase uavhengig av det anatomiske forholdet til IVC. Det anbefales at baksiden av aorta og IVC skilles tilstrekkelig fra de underliggende musklene via tang. I tilfelle disseksjonen ikke er omfattende nok i dette trinnet, vil spenningskraften bli opprettet av den omkringliggende fascia og muskler på stripen og bomullsputen, noe som resulterer i vridning og påfølgende ineffektiv absorbans av elastase.
En begrensning i denne protokollen er den endelige formen på den induserte AAA. Det er uunngåelig at når det slippes på aorta, vil noe elastase strømme til andre segmenter av aorta som ikke er pakket inn av bomullsputen. I tillegg kan nærliggende blødning forårsaket av disseksjon, selv av liten mengde, vaske elastase bort fra bomullsputen til andre aortasegmenter i løpet av 30 min inkubasjonsperioden. Disse vil føre til elastase gjennomtrengende andre segmenter av aorta, og dermed forårsake nedbrytning av mediallaget og utvidelse av abdominal aorta ikke begrenset til segmentet innpakket av bomullsputen. Som et resultat, i stedet for å vise fusiformformede aneurisme forårsaket av fokal dilatasjon, viser noen dyr generell utvidelse av et langt segment av buka aorta. Imidlertid viser den maksimale aortadiameteren hos disse dyrene som har kontinuerlig utvidelse av aorta fortsatt en mer enn 50% økning sammenlignet med kontroller. I mellomtiden observeres ingen forskjell i maksimal aortadiameter mellom dyr som viser kontinuerlig utvidelse og fokal utvidelse av bukaorta, noe som tyder på at aneurismeformen er en indikator på verken vellykket AAA-induksjon eller faktisk AAA-størrelse i dette tilfellet protokoll.
En annen begrensning i denne protokollen er å bruke denne metoden på større dyr. Den aktuelle elastaseinduserte AAA-modellen skal enkelt påføres andre små dyr som rotter. Imidlertid kan elastase alene ikke være nok for større dyr som griser eller primater til å indusere en konsistent AAA-fenotype. For eksempel rapporterte Marinov et al. at elastaseperfusjon alene i svin kan forårsake noen histologiske endringer, inkludert elastinforstyrrelser, men kunne ikke indusere konsistent aneurisme24. Shannon A et al. rapporterte en svinemodell av infrarenal AAA indusert av elastase. Det krever imidlertid en kombinasjon av ballong angioplastikk, perfusjon, aktuell elastase og en diett som inneholder BAPN (en lysyloksidasehemmer som forhindrer kollagenkrysskobling) gitt den betydelige holdbarheten til aorta25. Derfor ser det ut til at anvendelsen av en standardisert elastaseindusert AAA-protokoll hos større dyr fortsatt er ganske utfordrende på grunn av forskjellen i størrelse og holdbarhet av aorta mellom mus og større dyr, de tekniske utfordringene og den potensielt høye prisen.
Oppsummert, til tross for noen begrensninger, kan AAA induseres konsekvent hos både mannlige og kvinnelige mus i denne standardiserte protokollen. Konsistensen og reproduserbarheten av AAA-studier ved hjelp av den elastaseinduserte AAA-modellen forventes å bli betydelig forbedret ved å etablere denne standard kirurgiske prosedyren.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Forfatterne har ingenting å avsløre.
Acknowledgments
Vi takker Enheten for laboratoriedyrmedisin ved University of Michigan for deres hjelp med dyrefôring og avl. Denne studien støttes av NIH RO1 HL138139, NIH RO1 HL153710 til J. Zhang, NIH RO1 HL109946, RO1 HL134569 til Y.E. Chen, og American Heart Association gir 20POST35110064 til G. Zhao.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 6-0 non-absorbable monofilament suture | Pro Advantage | P420697 | |
| Carprofen | Zoetis Inc. | NDC: 54771-8507 | |
| Chow Diet | LabDiet | 3005659-220 | PicoLab 5L0D |
| Cotton Applicator | Dynarex | 4303 | |
| Cotton Pad | Rael | UPC: 810027130969 | |
| GraphPad Prism 8 | GraphPad Software Inc. | Version 8.4.3 | |
| Grarfe Forceps | Fine Science Tools | 11051-10 | |
| Halsted Mosquito Hemostats | Fine Science Tools | 13009-12 | |
| Ketamine | Par Pharmaceutical | NDC: 42023-0115-10 | |
| Nitrile gloves | Fisherbrand | 19-130-1597 | |
| Penicillin-Streptomycin | Thermo Fisher | 15140122 | |
| Porcine pancreatic elastase | Sigma-Aldrich | E1250-100MG | |
| Scissors | Fine Science Tools | 14068-12 | |
| Sterile 0.9% saline solution | Baxter | 2B1324X | |
| Xylazine | Akorn | NDC: 59399-110-20 |
References
- Kent, K. C. Clinical practice: Abdominal aortic aneurysms. The New England Journal of Medicine. 371 (22), 2101-2108 (2014).
- Karthikesalingam, A., et al. Mortality from ruptured abdominal aortic aneurysms: Clinical lessons from a comparison of outcomes in England and the USA. Lancet. 383 (9921), 963-969 (2014).
- Noel, A. A., et al. Ruptured abdominal aortic aneurysms: The excessive mortality rate of conventional repair. Journal of Vascular Surgery. 34 (1), 41-46 (2001).
- Lederle, F. A., et al. Rupture rate of large abdominal aortic aneurysms in patients refusing or unfit for elective repair. JAMA. 287 (22), 2968-2972 (2002).
- Kochanek, K. D., Xu, J., Murphy, S. L., Minino, A. M., Kung, H. C. Deaths: Final data for 2009. National Vital Statistics Reports. 60 (3), 1 (2011).
- Daugherty, A., Cassis, L. A. Mechanisms of abdominal aortic aneurysm formation. Current Atherosclerosis Reports. 4 (3), 222-227 (2002).
- Quintana, R. A., Taylor, W. R. Cellular mechanisms of aortic aneurysm formation. Circulation Research. 124 (4), 607-618 (2019).
- Kuivaniemi, H., Ryer, E. J., Elmore, J. R., Tromp, G. Understanding the pathogenesis of abdominal aortic aneurysms. Expert Review of Cardiovascular Therapy. 13 (9), 975-987 (2015).
- Trollope, A., Moxon, J. V., Moran, C. S., Golledge, J. Animal models of abdominal aortic aneurysm and their role in furthering management of human disease. Cardiovascular Pathology. 20 (2), 114-123 (2011).
- Patelis, N., et al. Animal models in the research of abdominal aortic aneurysms development. Physiological Research. 66 (6), 899-915 (2017).
- Senemaud, J., et al. Translational relevance and recent advances of animal models of abdominal aortic aneurysm. Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 37 (3), 401-410 (2017).
- Lysgaard Poulsen, J., Stubbe, J., Lindholt, J. S. Animal models used to explore abdominal aortic aneurysms: A systematic review. European Journal of Vascular and Endovascular Surgery. 52 (4), 487-499 (2016).
- Tsui, J. C. Experimental models of abdominal aortic aneurysms. Open Cardiovascular Medicine Journal. 4, 221-230 (2010).
- Manning, M. W., Cassi, L. A., Huang, J., Szilvassy, S. J., Daugherty, A. Abdominal aortic aneurysms: Fresh insights from a novel animal model of the disease. Vascular Medicine. 7 (1), 45-54 (2002).
- Chiou, A. C., Chiu, B., Pearce, W. H. Murine aortic aneurysm produced by periarterial application of calcium chloride. Journal of Surgical Research. 99 (2), 371-376 (2001).
- Allaire, E., Guettier, C., Bruneval, P., Plissonnier, D., Michel, J. B. Cell-free arterial grafts: Morphologic characteristics of aortic isografts, allografts, and xenografts in rats. Journal of Vascular Surgery. 19 (3), 446-456 (1994).
- Anidjar, S., et al.
- Sun, J., et al. Mast cells modulate the pathogenesis of elastase-induced abdominal aortic aneurysms in mice. Journal of Clinical Investigation. 117 (11), 3359-3368 (2007).
- Bhamidipati, C. M., et al. Development of a novel murine model of aortic aneurysms using peri-adventitial elastase. Surgery. 152 (2), 238-246 (2012).
- Pyo, R., et al. Targeted gene disruption of matrix metalloproteinase-9 (gelatinase B) suppresses development of experimental abdominal aortic aneurysms. Journal of Clinical Investigation. 105 (11), 1641-1649 (2000).
- Tanaka, A., Hasegawa, T., Chen, Z., Okita, Y., Okada, K. A novel rat model of abdominal aortic aneurysm using a combination of intraluminal elastase infusion and extraluminal calcium chloride exposure. Journal of Vascular Surgery. 50 (6), 1423-1432 (2009).
- Busch, A., et al. Four surgical modifications to the classic elastase perfusion aneurysm model enable haemodynamic alterations and extended elastase perfusion. European Journal of Vascular and Endovascular Surgery. 56 (1), 102-109 (2018).
- Liang, W., et al. KLF11 protects against venous thrombosis via suppressing tissue factor expression. Thrombosis and Haemostasis. , (2021).
- Marinov, G. R., et al. Can the infusion of elastase in the abdominal aorta of the Yucatan miniature swine consistently produce experimental aneurysms. Journal of Investigative Surgery. 10 (3), 129-150 (1997).
- Shannon, A. H., et al. Porcine model of infrarenal abdominal aortic aneurysm. Journal of Visualized Experiments. (153), e60169 (2019).
