通过双路西法酶检测系统构建CRISPR质粒和检测哺乳动物细胞的挖空效率

在这里，我们提出了一个协议，描述了一个简化的方法，用于有效生成质粒，同时表达CRISPR酶和相关的单导RNA（sgRNA）。哺乳动物细胞与这种sgRNA/CRISPR载体的共转染，以及检查双链断裂修复的双荧光素酶报告器载体，可以评估敲除效率。