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Genetics
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JoVE Journal Genetics
Application de l’interférence CRISPR (CRISPRi) pour le silençage génique chez les espèces pathogènes de Leptospira
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Application de l’interférence CRISPR (CRISPRi) pour le silençage génique chez les espèces pathogènes de Leptospira

Article DOI: 10.3791/62631-v • 14:49 min • August 14th, 2021
August 14th, 2021 •
1,2, 1, *2, *1
1Infectious Bacterial Diseases Research Unit, National Animal Disease Center, Agricultural Research Service, United States Department of Agriculture, 2Laboratório de Desenvolvimento de Vacinas, Instituto Butantan
* These authors contributed equally

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Ici, l’application de l’interférence CRISPR (CRISPRi) pour le silençage génétique spécifique chez les espèces de Leptospira est décrite. Les cellules de Leptospira sont transformées par conjugaison avec des plasmides exprimant dCas9 (Catalytiquement « mort » Cas9) et un ARN monoguide (SGRNA), responsable de l’appariement de base à la cible génomique souhaitée. Des méthodes pour valider le silençage génique sont présentées.

Tags

Génétique Numéro 174 Leptospira leptospirose mutagenèse interférence CRISPR silençage des gènes conjugaison
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