Homing гемопоэтических клеток в костном мозге
Summary
В этой статье описывается протокол, используемый для исследования самонаведения гемопоэтических клеток в свои ниши в костном мозге.
Abstract
Homing это явление, когда трансплантировали гемопоэтические клетки способны совершать поездки и прививать или установить место жительства в костном мозге. Различные chemomkines и рецепторы вовлечены в самонаведения гемопоэтических стволовых клеток. [1, 2]
В настоящем документе излагается классическая самонаведения протокол, используемый в исследованиях гемопоэтических стволовых клеток. В целом это предполагает выделение клеточной популяции которого самонаведения должна быть исследована, окрашивание этой группе населения с красителем интересов и инъекционных эти клетки в кровь из животного-реципиента. Животного-реципиента затем приносили в жертву на заранее заданный промежуток времени после инъекции и костного мозга для оценки процент или абсолютное число клеток, которые являются положительными для красителя интересов. В одной из наиболее распространенных экспериментальных схем, самонаведения эффективность гемопоэтических клеток от двух генетически различных животных (диких животных типа и соответствующие нокаут) сравнивается. В этой статье описывается гемопоэтических самонаведения протокол в рамках таких как эксперимент.
Protocol
Discussion
Homing является процесс, при котором клетки костного мозга, в том числе стволовых клеток, клеток-предшественников и дифференцированных клеток, их путь в костном мозге после введения в поток крови или костного мозга полость мышей. Как видно из определения, ученый может выбрать для изучения…
Acknowledgements
Этот протокол был протестирован и оптимизирован в лаборатории д-ра Дэвида Скадден. Финансирование предоставляется Дана Фарбер институт рака / Massachusetts General Hospital клинической гематологии и онкологии Fellowship Program.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| DPBS (Dulbecco’s Phosphate Buffered Saline | Mediatech, Inc | 21-031-CV | ||
| Sterile Fetal Bovine Serum | Valley Biomedical, Inc | BS3033 | ||
| 0.5M EDTA (pH 8.0) | Boston BioProducts | BM-150 | ||
| Tryphan Blue solution | Mediatech, Inc | 25-900-CI | ||
| ACK Lysing Buffer | Lonza | 10-548E | ||
| Isopropranolol U.S.P. | Denison Pharmaceuticals, Inc | |||
| Vybrant DiD cell-labelling solution | Invitrogen | V22887 | ||
| Vybrant DiI cell-labelling solution | Invitrogen | V22885 |
References
- Adams, G. B., et al. Stem cell engraftment at the endosteal niche is specified by the calcium-sensing receptor. Nature. 439 (7076), 599-603 (2006).
- Broxmeyer, H. E. Chemokines in hematopoiesis. Curr Opin Hematol. 15 (1), 49-58 (2008).
