Summary
Descrevemos um novo método cirúrgico para cateterizar "alças intestinais" dentro do íleo de ovelhas. Uma vez que os animais têm recuperado de uma cirurgia e que tenha limpado antibióticos e analgésicos, múltiplos tratamentos podem ser depositados diretamente em loops através dos cateteres.
Abstract
O intestino é uma estrutura complexa que está envolvido não somente na absorção de nutrientes, mas também atua como uma barreira entre o indivíduo eo mundo exterior. Como tal, o intestino tem um papel fundamental na vigilância imunológica e proteção contra patógenos entéricos. Investigação da fisiologia intestinal e imunologia comumente emprega "alças intestinais" como um modelo experimental. A maioria destes modelos de alça são não-recuperação de procedimentos cirúrgicos que estudo de curta duração (<24 h) alterações no intestino (1-3). Nós anteriormente criou um modelo de recuperação alça intestinal especificamente para medida de longo prazo (<6 meses) alterações imunológicas no intestino de ovelha exposição segue para vacinas, adjuvantes, e vírus (4). Este procedimento tratamentos localizados a um 'loop' específicas, permitindo-nos a amostra esta área do intestino. Uma desvantagem significativa deste método é a única janela de oportunidade para administrar tratamentos (ou seja, no momento da cirurgia). Além disso, amostras de ambos os mucosa intestinal e conteúdo luminal só pode ser tomada ao término do projeto. Outras limitações importantes do modelo acima são de que a manipulação cirúrgica e pós-operatórios necessários medidas (por exemplo, administração de antibióticos e analgésicos) pode afetar diretamente o tratamento em si e / ou alterar a função imunológica, assim, resultados de confusão. Portanto, nós modificamos o nosso modelo de alça intestinal através da inserção de cateteres de longo prazo para a loops. Ovelhas recuperar totalmente do procedimento, e não são afetados pela cateteres exteriorizados. Nomeadamente, o estabelecimento de cateteres em loops nos permite introduzir múltiplos tratamentos durante um intervalo prolongado, após a recuperação da cirurgia e depuração de fármacos administrados durante a cirurgia e no período pós-operatório.
Protocol
Discussion
Neste procedimento, fomos capazes de estabelecer com êxito cateteres em alças intestinais estabelecido na íleo dos ovinos. Ao aderir a cuidados pós-operatórios rigorosos, os animais rapidamente recuperado do procedimento e retomou as atividades normais dia 07/05 após a cirurgia. Determinou-se que o estabelecimento de cateteres dentro de loops não afeta a função da mucosa intestinal ou imunes (dados não mostrados) e animais podem viver por pelo menos 8 semanas após a cirurgia. Este procedimento permite-nos apr…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
A pesquisa não poderia ter sido concluído sem a dedicação e esforços de muitas pessoas no Agriculture and Agri-Food Canada Research Centre, Lethbridge, Alberta, Canadá. A este respeito, nós agradecemos: Tara Shelton para pré e cuidados pós-operatórios de animais, preparação cirúrgica e anestesiologia, análise de amostras, e assistência com o vídeo de imagem; Randy Wilde e Estela Costa para os cuidados pré e pós-operatório; Jenny Gusse para análise de amostras; Byron Lee para trocar a imagem, e Brian Egland criação de ovinos. Agradecemos também Brent Selinger (Departamento de Ciências Biológicas da Universidade de Lethbridge) para fornecimento de equipamentos de vídeo e conselhos, bem como outras formas de assistência (ou seja, produção executiva), e do Curriculum Development Re-Centre, Universidade de Lethbridge para perícia videografia. Este estudo foi apoiado em parte por concessões do Foods Avançado e Rede de Materiais (GDI), o Canadá, Alberta Beef Fundo de Desenvolvimento da Indústria (GDI), e Agricultura e Agri-Food Canada (GDI e JPK).
Materials
| Category / Item Number | Company | Catalogue |
| Surgeon supplies | ||
| Surgical gloves | WDDCa | 103091 |
| Surgical mask | WDDC | MAX53013 |
| Surgical gown | CDMVb | 3365 |
| OB Apron | WDDC | 900062 |
| Surgical cap | WDDC | 903271 |
| EZ Scrub brush | WDDC | BDC377479 |
| Anesthesia and drugs | ||
| Anesthetic machine | Boyle | — |
| Sodasorb | WDDC | 108638 |
| Laryngoscope | WDDC | — |
| Laryngoscope blade (Miller blade #4) | WDDC | 902667 |
| Endotracheal tube (7.0 – 8.5 mm) | WDDC | — |
| Lidocaine endotracheal spray | WDDC | 103364 |
| Acepromazine | WDDC | AUS01020 |
| Glycopyrrolate | WDDC | SAB2880 |
| Butorphanol tartrate | WDDC | AYE304541 |
| Diazepam | WDDC | sab790 |
| Thiopental sodium | WDDC | 103508 |
| Epinephrine hydrochloride | WDDC | 103856 |
| Doxapram | Strathcona Pharmacy | — |
| Isoflurane | WDDC | 100339 |
| Hemostam | WDDC | 103857 |
| Flunixin | WDDC | sch140100 |
| Enrofloxacin | WDDC | hll0049 |
| Metronidazole | WDDC | 101653 |
| Ampicillin | WDDC | NOV67185-6 |
| Cefazolin | WDDC | nov69397 |
| Surgical equipment and supplies | ||
| Electroscapel | Macan | MV8 |
| Heating mat | Kane | PHMD-48 |
| Stomach tube (Nalgene tubing 5/16″ ID) | Fisher Scientific | — |
| Needle driver | WDDC | 108338 |
| Addison brown forcep | WDDC | 911075 |
| Rat tooth forcep | CDMV | 5275 |
| Kelly forcep | WDDC | 901133 |
| Mosquito hemostat | WDDC | 108471 |
| Carmalt forcep | WDDC | 901225 |
| Scalpel handle | WDDC | 900285 |
| Scalpel blade #22 | WDDC | 900511 |
| Metzenbaum scissor | WDDC | 901166 |
| Sharp-sharp scissor | WDDC | 108264 |
| Towel clamp | WDDC | 901213 |
| Allis tissue forcep | WDDC | 901201 |
| Doyen’s forcep | WDDC | 904226 |
| Stainless steel bowl | WDDC | 903601 |
| Stainless steel trocar (curved) | Local supplier | — |
| Catheter introducer | WDDC | 11440 |
| Surgical towel | CDMV | 7972 |
| Disposable drape | WDDC | 900035 |
| Steri drape | CDMV | 2323 |
| Drape (40 x 40 cm) | CDMV | 8358 |
| Surgical drape (7″ x 11 ¼” opening) | CDMV | 2694 |
| Vicryl (2-0) | WDDC | JJMJ333H |
| Silk 2-0 | WDDC | 105248 |
| Catgut #3 | WDDC | CSL547-2070 |
| Supramid #1 | WDDC | CSL547-3040 |
| Needles (cutting and non-cutting) | WDDC | — |
| Catheter | ||
| Silastic tubing (0.040″ ID, 0.085″ OD) | Fisher Scientific | 11-189-15D |
| Orbeseal ointment | WDDC | 106344 |
| Clear silicone (732 multi-purpose sealant) | Local supplier | — |
| Blunt end needle | WDDC | 905035 |
| Marker (permanent industrial) | Local supplier | — |
| Catheter pouch (constructed of Elastoplast 7.5 cm) | WDDC | 104094 |
| Bandages | ||
| Hospital tape (2″) | WDDC | 103842 |
| Hospital tape (1″) | WDDC | VLMRENF20 |
| Gauze sponge 4×4 | WDDC | 107551 |
| Gauze cling | WDDC | 107633 |
| Elastoplast 7.5cm | WDDC | 104094 |
| Elastoplast rippable bandage | WDDC | 104093 |
| Needles and syringes | ||
| Syringe (60 ml) | WDDC | 104004 |
| Syringe (10 ml) | WDDC | bdc301604 |
| 25G Needle | WDDC | BDC305122 |
| 20G Needle | WDDC | BDC305175 |
| 18G Needle | WDDC | 903353 |
| Intravenous | ||
| Intracath IV catheter (16G 8″) | WDDC | bdc3831621 |
| IV administration set (10 drop) | WDDC | 101797 |
| 0.9% NaCl solution | WDDC | BAXJB1322P |
| Plasmalyte 148 solution | WDDC | BAXJB2534 |
| Dextrose | WDDC | MCT60190 |
| Peristaltic pump | Cole Parmer | 7524-10 |
| Livestock identification tag cement | Local supplier | — |
| Sanatizers / disinfectants | ||
| Germex solution | WDDC | mtc60270 |
| Isopropyl alcohol | WDDC | 104590 |
| Stanhexidine cleanser | WDDC | 109248 |
| Prepodyne solution | WDDC | 105710 |
| Prepodyne scrub | WDDC | 105711 |
aWestern Drug Distribution Center LTD, Edmonton, AB.
bThe Veterinary Medication Distribution Center Inc., St. Hyacinthe, QE.
References
- Vidal, J. E., McClane, B. A., Saputo, J., Parker, J., Uzal, F. A. Effects of Clostridium perfringens beta-toxin on the rabbit small intestine and colon. Infect. Immun. 76, 4396-4404 (2008).
- Santos, R. L., Zhang, S., Tsolis, R. M., Baumler, A. J., Adams, L. G. Morphologic and molecular characterization of Salmonella typhimurium infection in neonatal calves. Vet. Pathol. 39, 200-215 (2002).
- Uzzau, S., Leori, G. S., Petruzzi, V., Watson, P. R., Schianchi, G., Bacciu, D., Mazzarello, V., Wallis, T. S., Rubino, S. Salmonella enterica serovar-host specificity does not correlate with the magnitude of intestinal invasion in sheep. Infect. Immun. 69, 3092-3099 (2001).
- Gerdts, V., Uwiera, R. R. E., Mutwiri, G. K., Wilson, D. J., Bowersock, T., Kindane, A., Babiuk, L. A., Griebel, P. J. Multiple intestinal ‘loops’ provide an in vivo model to analyse multiple mucosal immune responses. J. Immunol. Methods. 256, 19-33 (2001).
- Greibel, P. J., Davis, W. C., Reynolds, J. D. An analysis of the growth and differentiation of b cells isolated from follicles from ileal Peyer’s patch of sheep. Immunology. 75, 601-607 (1992).
- Motyka, G., Greibel, P. J., Reynolds, J. D. Agents that activate protein kinase C resue sheep ileal Peyer’s patch B cells from apoptosis. Eur. J. Immunol. 23, 1314-1321 (1993).
