Summary

אינדוקציה ניקוד קליני כרוני, relapsing Encephalomyelitis אוטואימונית ניסויית

Published: July 04, 2007
doi:

Summary

וידאו זה מדגים את הניקוד אינדוקציה קליני במודל חיה של טרשת נפוצה: כרוני, relapsing Encephalomyelitis אוטואימונית ניסיונית התובע חולדות. המחלה, הנגרמת על ידי חולדות מחסנת עם תחליב המכיל חוט השדרה שלם חולדה adjuvant פרוינד של שלמה, מציג סימנים קליניים דומים מחלות אנושיות.

Abstract

טרשת נפוצה (MS) היא מחלה דלקתית כרונית של מערכת העצבים המרכזית (CNS), כי בדרך כלל משפיע על אנשים צעירים. הוא מאופיין על ידי demyelination ו מפחיד גלייה באזורי המופץ במוח ובחוט השדרה. נגעים אלה לשנות הולכה עצבית ו להשרות את הגירעונות נוירולוגיות השבתת המשתנות בהתאם למיקום של הפלאק demyelinated את מערכת העצבים המרכזית (למשל, paraparesis שיתוק, עיוורון, אי שליטה).

Encephalomyelitis אוטואימונית ניסויית (EAE) הוא המודל של טרשת נפוצה. EAE הושרה first בטעות במהלך חיסון נגד מחלת הכלבת בבני אדם, באמצעות וירוסים גדל על מיתרי השדרה ארנב. שאריות של השדרה מוזרק עם נגיף מומת המושרה המחלה במערכת העצבים המרכזית. בעקבות תצפיות אלה, המודל הראשון של EAE תוארה פרימטים שאינם בני אדם שחוסנו עם CNS homogenate על ידי נהרות Schwenther בשנת 1935. EAE מאז שנוצר במגוון המינים יכולים לעקוב אחר קורסים שונים בהתאם המין / זן ו מחסנת אנטיגן בשימוש. לדוגמה, מחסנת חולדות לואיס עם חלבון המיאלין הבסיסי תחליב עם גורם משלים מודל חריפה של EAE, בעוד אנטיגן אותו גורם מחלה כרונית שרקנים.

המודל EAE המתואר כאן הוא המושרה על ידי מחסנת חולדות התובע כנגד חוט השדרה עכברוש התובע אמולסיה ב adjuvant פרוינד של שלמה. החולדות לפתח שיתוק רפה עולה תוך 7-14 ימים לאחר החיסון. סימנים קליניים בעקבות קורס בשלב ההתקפי במשך מספר שבועות. פתולוגיה מראה מחלחל החיסונית גדולים CNS ושלטים demyelination. שיקולים מיוחדים בטיפול בבעלי חיים עם EAE מתוארים בסוף הוידאו.

Protocol

אינדוקציה וניטור של EAE-כרונית ההתקפי התחליב הוא תערובת 01:01 של אנטיגן בתמיסה מימית להוסיף בתוספת adjuvant המלא של פרוינד. חשוב מאוד להוסיף את אנטיגן כדי adjuvant ולא להיפך! יש הרבה פסולת בעת ביצוע והזרק?…

Discussion

ישנם כמה שיקולים חשובים עבור פרוטוקול זה.

גנטיקה של חולדות התובע יהיה שונה מעט בהתאם מגדל הם קנו. הבדלים אלה עשויים להגדיל או להקטין את הרגישות של חולדות EAE אינדוקציה. אם חולדות שלך רגישים יותר EAE אתה רוצה לצמצם את כוחו של חיסון באמצעות אי – בתוספת adjuvant המ…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Materials

Material Name Type Company Catalogue Number Comment
Complete Freund’s Adjuvant Reagent Fisher DF 311-360-5 Manufactured by Difco
Mycobacterium tuberculosis H37Ra Reagent Fisher DF3114-33-8 Manufactured by Difco
DA rat Animal Harlan Sprague Dawley   Females, 7-9 weeks old.
Glass syringes – 5 ml Tool Fisher 14-823-10 B  
Metal bridge – 18G Tool Fisher 14-825-17L  
Luer Lok plastic syringes – 3 ml Tool Becton Dickinson 309585  
Needles – 20G 1 1/2 Tool Fisher 14-826-5C  
check_url/cn/224?article_type=t

Play Video

Cite This Article
Beeton, C., Garcia, A., Chandy, K. G. Induction and Clinical Scoring of Chronic-Relapsing Experimental Autoimmune Encephalomyelitis. J. Vis. Exp. (5), e224, doi:10.3791/224 (2007).

View Video