Este video muestra la puntuación de inducción y clínicas de un modelo animal de esclerosis múltiple: las enfermedades crónico-recidivante la encefalomielitis autoinmune experimental en ratas DA. La enfermedad, inducida por la inmunización de ratas con una emulsión que contiene la médula espinal de ratas y toda adyuvante completo de Freund, presenta un cuadro clínico parecido a la enfermedad humana.
Abstract
La esclerosis múltiple (EM) es una enfermedad inflamatoria crónica del sistema nervioso central (SNC) que afecta comúnmente a los adultos jóvenes. Se caracteriza por la desmielinización y cicatrización glial en zonas diseminadas en el cerebro y la médula espinal. Estas lesiones alteran la conducción nerviosa e inducir el déficit neurológica incapacitante, que varían con la ubicación de las placas de mielina en el SNC (por ejemplo, paraparesia, parálisis, ceguera, incontinencia).
La encefalomielitis autoinmune experimental (EAE) es un modelo para la EM. EAE se les indujo accidentalmente en los seres humanos durante la vacunación contra la rabia, a partir de virus cultivados en la médula espinal de conejo. Los residuos de inyección espinal con el virus inactivado induce la enfermedad del SNC. A raíz de estas observaciones, un primer modelo de EAE se ha descrito en primates no humanos inmunizados con un homogeneizado de SNC por los ríos y Schwenther en 1935. EAE ha sido generada en una variedad de especies y pueden seguir diferentes cursos en función de la especie / variedad y la inmunización de antígeno utilizado. Por ejemplo, la inmunización de ratas Lewis con la proteína básica de mielina en emulsión con adyuvante induce un modelo de EAE aguda, mientras que el mismo antígeno induce una enfermedad crónica en los conejillos de indias.
El modelo de EAE se describe aquí es inducida por la inmunización de ratas DA contra la médula espinal de ratas DA en emulsión en adyuvante completo de Freund. Ratas desarrollan una parálisis flácida ascendente dentro de 7-14 días después de la inmunización. Los signos clínicos siguen un curso remitente-recurrente durante varias semanas. Patología muestra gran infiltrado inmune en el SNC y las placas de desmielinización. Consideraciones especiales para el cuidado de los animales con EAE se describen al final del vídeo.
Protocol
Inducción y control de enfermedades crónico-recurrente de EAE La emulsión es una mezcla de 1:1 de antígeno en solución acuosa añadido a complementarse adyuvante completo de Freund. Es muy importante añadir el antígeno al adyuvante y no al revés! Hay una gran cantidad de residuos y la hora de hacer la inyección de una emulsión. Siempre prepare 1,5 o 2 veces más de lo que usted necesita. El uso de mo…
Discussion
Hay algunas consideraciones importantes para este protocolo.
La genética de las ratas DA variará ligeramente dependiendo del criador que se compran. Estas diferencias pueden aumentar o disminuir la susceptibilidad de las ratas de EAE la inducción. Si su ratas son más susceptibles a la EAE tendrá que reducir la fuerza de la vacunación mediante el uso sin suplemento completo de Freund adyuvante o neoadyuvante aunque incompleto de Freund. También puede considerar la reducción de la cantidad de emulsión inyecta o diluir el homo…
Beeton, C., Garcia, A., Chandy, K. G. Induction and Clinical Scoring of Chronic-Relapsing Experimental Autoimmune Encephalomyelitis. J. Vis. Exp. (5), e224, doi:10.3791/224 (2007).