誘導および慢性-再発実験的自己免疫性脳脊髄炎の臨床スコアリング

Summary

DAラットの慢性再発性実験的自己免疫性脳脊髄炎：このビデオでは、多発性硬化症の動物モデルの誘導と臨床スコアを示しています。全体ラット脊髄と完全フロイントアジュバントを含むエマルジョンをラットを免疫することにより誘導される疾患は、、人間の病気に似た臨床症状を示しています。

Abstract

多発性硬化症（MS）は、一般的に若い成人に影響を与える中枢神経系（CNS）の慢性炎症性疾患である。それは脳と脊髄に散在地域における脱髄とグリア瘢痕によって特徴づけられる。これらの病変は、神経の伝導を変更し、中枢神経系の脱髄斑（例：対麻痺、麻痺、失明、失禁）の位置によって変化無効に神経学的欠損を引き起こす。

実験的自己免疫性脳脊髄炎（EAE）はMSのためのモデルです。 EAEは、最初のウサギの脊髄上に成長させたウイルスを使用して、狂犬病予防接種の間に人間に誤って誘導した。不活化ウイルスによる脊髄注入の残基は、中枢神経系疾患を誘発した。これらの観​​察に続いて、EAEの最初のモデルは1935年に河川によってホモジネートCNSとSchwentherで免疫した非ヒト霊長類に記載されていた。 EAEはそれ以来、様々な種で生成されており、種/系統と使用される免疫抗原に応じてさまざまなコースをたどることができます。同じ抗原がモルモットにおける慢性疾患を誘導しながら例えば、アジュバントとエマルジョンのミエリン塩基性蛋白質とのLewisラットを免疫すると、EAEの急性モデルを誘導する。

EAEモデルここで説明するが、完全フロイントアジュバントでエマルジョン中のDAラット脊髄に対してDAラットを免疫することによって誘導される。ラットは7〜14日後の予防接種の中で昇順弛緩性麻痺を開発する。臨床症状は数週間にわたって再発寛解型経過をたどる。病理学は、中枢神経系脱髄斑の大きい免疫浸潤を示しています。 EAEと動物のために世話をするための特別な考慮事項は、ビデオの最後で説明されています。

Protocol

慢性再発性EAEの誘導とモニタリングエマルジョンは、補足完全フロイントアジュバントに添加水溶液中の抗原の1:1混合物である。それは、アジュバントとしない他の方法でラウンドして抗原を追加することが非常に重要です！ 作り、エマルジョンを注入する際に廃棄物がたくさんある。常に必要なものよりも1.5〜2倍以上を準備。 …

Discussion

このプロトコルにはいくつかの重要な考慮事項があります。

DAラットの遺伝学は、それらがから購入されているブリーダーによって多少異なります。これらの違いは、誘導をEAEラットの感受性を増減する場合があります。あなたのラットはEAEに影響を受けやすい場合には、非添加の完全フロイントアジュバント、あるいは不完全フロイントアジュバントを使用することによって予防接種の強さを減ら?…

Materials

Material Name	Type	Company	Catalogue Number	Comment
Complete Freund’s Adjuvant	Reagent	Fisher	DF 311-360-5	Manufactured by Difco
Mycobacterium tuberculosis H37Ra	Reagent	Fisher	DF3114-33-8	Manufactured by Difco
DA rat	Animal	Harlan Sprague Dawley		Females, 7-9 weeks old.
Glass syringes – 5 ml	Tool	Fisher	14-823-10 B
Metal bridge – 18G	Tool	Fisher	14-825-17L
Luer Lok plastic syringes – 3 ml	Tool	Becton Dickinson	309585
Needles – 20G 1 1/2	Tool	Fisher	14-826-5C