このビデオでは、遺伝子デリバリーの研究のためのex vivoでのモデルのような患者組織の使用について説明します。手術時に得られた新鮮な患者の組織を培養にスライスされ、維持されます。 ex vivoのモデルシステムは、そのまま患者の組織や遺伝子発現に遺伝子の物理的な配信を可能にIVIS検出システムを用いて生物発光イメージングにより解析される。生物発光検出システムは、組織の犠牲を必要とせず、個々のスライス内の遺伝子発現の迅速かつ正確な定量化を示しています。このスライスの組織培養系は、正常および悪性組織を含む組織のさまざまなタイプが使用され、私たちは無傷の組織の均質性と個々の患者間の変化度の高い効果を研究することができますすることができます。このモデルシステムは、動物モデルに代わるものとして、臨床試験に入る前に補完的な臨床モードなど、特定の状況で使用することができる。
Protocol
メディアと試薬の調製 抗生物質溶液 リン酸塩は、200 U / mlペニシリン、200μg/ mlのストレプトマイシン、5μg/ mlのfungizoneで緩衝食塩水(PBS) コレクションと治療培地 200 U / mlペニシリンとダルベッコ改変イーグル培地(DMEM)、200μg/ mlのストレプトマイシン、5μg/ mlのfungizone 培地 10%熱不活性化ウシ胎児血清を含むコレ…
Rajendran, S., Salwa, S., Gao, X., Tabirca, S., O’Hanlon, D., O’Sullivan, G. C., Tangney, M. Ex Vivo Culture of Patient Tissue & Examination of Gene Delivery. J. Vis. Exp. (46), e2378, doi:10.3791/2378 (2010).