Ototoxicity의 치료에 대 한 트랜스-귀 약물 전달
Summary
우리는 달팽이 관에 트랜스 귀 경로 통해 약물의 지역화 된 관리 기법을 제시. Cisplatin 같은 화학요법 약물의 항 암 효능이이 경로 통해 약물 전달 방해 하지 것 이다.
Abstract
약물 유발 ototoxicity 치료 보호 에이전트의 체계적 관리는 이러한 보호 에이전트의 기본 약물 화학요법 효능 방해할 수 가능성에 의해 제한 됩니다. 이것은 특히 그의 제 행동 청각 상실에 대 한 적절 한 보호를 제공 하는 항 산화에 의해 감쇠는 약 cisplatin에 대 한 사실입니다. 다른 현재 또는 잠재적인 otoprotective 에이전트는 체계적으로 관리 하는 경우 비슷한 문제를 내포할 수 있습니다. 달팽이 관에 직접 다양 한 체액 또는 보호 에이전트의 응용 프로그램 로컬 제한 조직의 부작용으로 이러한 에이전트의 높은 수준에 대 한 수 것입니다. 이 보고서는 달팽이 관에 기초 과학 연구를 강화 하 고 클리닉에서 otoprotective 에이전트의 사용을 감독의 간단한 방법을 제공 하는 달팽이 관에 다양 한 약물 또는 생물학적 시 약의 납품의 트랜스-귀 방법 보여 줍니다. 이 보고서 트랜스 귀 약물 전달의 방법 하 고 어떻게이 기술은 성공적으로 실험 동물에서 치료에 사용 되었습니다 cisplatin ototoxicity의 예제를 제공 합니다.
Introduction
주변 청각 시스템 같은 cisplatin 및 aminoglycoside 항생제 약물에 절 묘하게 과민 하다. Cisplatin은 단단한 종양, 난소, 고환, 머리 등의 다양 한 치료에 대 한 널리 사용 되는 화학요법 에이전트와 목 암. 이 약의 사용에 익숙한 ototoxicity은 복용량 제한 그리고 흔히1치료 환자의 75-100%에 영향을 미치는. Carboplatin oxaliplatin, 등 다른 약 cisplatin2,3,,45, 대 안으로 등장 하지만 그들의 유용성은 몇 가지 암에 제한 됩니다.
초기 연구 cisplatin 및 aminoglycosides 제작한 ototoxicity 중재에 반응성 산소 종 (선생님)의 중요 한 역할을 보여왔다. 후속 연구 보여주었다 NADPH 산화 효소의 NOX3 isoform는 달팽이 관에서 선생님의 기본 소스 이며, cisplatin6,7에 의해 활성화 됩니다. 선생님 타협의 세대 선도 셀의 용량을 버퍼링 하는 항 산화8세포 막 지질 과산화를 증가 했다. 또한, cisplatin 매우 독성 알데하이드 4-hydroxynonenal (4-HNE), 세포 죽음9,10의 초기자를 생성 하는 수 산 기 급진 파의 생산을 증가 시킵니다. 이러한 결과에 따라, 여러 가지 항 산화 cisplatin ototoxicity의 치료에 대 한 조사가 되어 있습니다. N-아 세 틸 시스테인 (NAC), 나트륨 thiosulfate (STS), amifostine, 및 D-메티오닌 포함 됩니다. 그러나, 항 산화 요법의 중요 한 관심사는 이러한 항 산화 cisplatin 화학요법 효능11 cisplatin의 항 산화 분자의 thiol 그룹 상호 작용을 통해 체계적으로 관리 하는 경우를 줄일 수 있습니다.
항 산화 치료와 함께 이러한 문제에 비추어이 연구의 목표는 청력 손실을 줄이기 위해 달팽이 관에 산화 방지 제 및 기타 약물 전달의 트랜스 귀 경로 검사 했다. 약물 및 짧은 방해 (si) RNA, 아래 설명의 트랜스 귀 경로 특히 유망 나타납니다.
Protocol
Representative Results
Discussion
트랜스-귀 관리 경로 수 그렇지 않으면 부작용을 생산 중요 한 조직의 체계적으로 관리 하는 경우는 달팽이 관에 약물 및 기타 에이전트의 지역화 된 배달 수 있습니다. 의약품 안전 청의이 방법은 조직의 경로 통해 달성 될 것 보다 훨씬 더 높은 복용량에서 행동의 사이트에 약물의 급속 한 액세스할을 수 있습니다. 여기에 제시 하 고 출판 결과 이전 보여주었다 [R]-N-페 닐 이소프로필 아데?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
이 문서에서 설명 하는 작업은 NCI RO1 CA166907, NIDCD RO1-DC 002396 및 RO3 DC011621에 의해 지원 되었다.
Materials
| Ketathesia (100 mg/ml) 10 ml | Henry Schein | 56344 | Controlled substance |
| AnaSed Injection/Xylazine (20 mg/ml) 20 ml | Henry Schein | 33197 | |
| 2.5 mm disposable ear specula | Welch Allyn | 52432 | |
| Surgical Scope | Zeiss | ||
| 29 G X 1/2 insulin syringe | Fisher Scientific | 14-841-32 | Can be purchased through other vendors |
| cis-Diammineplatinum(II) dichloride | Sigma Aldrich | P4394 | TOXIC – wear proper PPE |
| Harvard 50-7103 Homeothermic Blanket Control Unit | Harvard Apparatus | Series 863 | |
| Excel International 21 G X 3/4 butterfly needle | Fisher | 14-840-34 | Can be purchased through other vendors |
| BSP Single Speed Syringe Pump | Brain Tree Sci, Inc | BSP-99 | |
| Pulse Sound Measurement System | Bruel & Kjaer | Pulse 13 software | |
| High-Frequency Module | Bruel & Kjaer | 3560C | |
| 1/8″ Pressure-field Microphone —-Type 4138 | Bruel & Kjaer | bp2030 | |
| High Frequency Transducer | Intelligent Hearing System | M014600 | |
| Opti-Amp Power Transmitter | Intelligent Hearing System | M013010P | |
| SmartEP ABR System | Intelligent Hearing System | M011110 | |
| Disposable Subdermal EEG Electrodes | CareFusion | 019-409700 | |
| 16% Formaldehyde, Methanol-free | Fisher Scientific | 28908 | TOXIC – wear proper PPE |
| 7 mL Borosilicate Glass Scintillation Vial | Fisher Scientific | 03-337-26 | Can be purchased through other vendors |
| EDTA | Fisher Scientific | BP118-500 | Can be purchased through other vendors |
| Sucrose | Fisher Scientific | S5-500 | Can be purchased through other vendors |
| Tissue Plus OCT Compound | Fisher Scientific | 4585 | |
| CryoMolds (15 mm x 15 mm x 5mm) | Fisher Scientific | 22-363-553 | Can be purchased through other vendors |
| Microscope Slides (25mm x 75mm) | MidSci | 1354W | Can be purchased through other vendors |
| Coverslips (22 x 22 x 1) | Fisher Scientific | 12-542-B | Can be purchased through other vendors |
| Poly-L-Lysine Solution (0.01%) | EMD Millipore | A-005-C | Can be purchased through other vendors |
| HM525 NX Cryostat | Thermo Fischer Scientific | 956640 | |
| MX35 Premier Disposable Low-Profile Microtome Blades | Thermo Fischer Scientific | 3052835 | |
| Wheaton™ Glass 20-Slide Staining Dish with Removable Rack | Fisher Scientific | 08-812 | |
| Super Pap Pen Liquid Blocker | Ted Pella, Inc. | 22309 | |
| Normal Donkey Serum | Jackson Immuno Research | 017-000-121 | Can be purchased through other vendors |
| TritonX-100 | Acros | 21568 | Can be purchased through other vendors |
| BSA | Sigma Aldrich | A7906 | Can be purchased through other vendors |
| Phospho-Stat1 (Ser727) antibody | Cell Signaling | 9177 | |
| VR1 Antibody (C-15) | Santa Cruz | sc-12503 | |
| DyLight 488 Donkey anti Rabbit | Jackson Immuno Research | 711-485-152 | Discontinued |
| DyLight 488 Donkey anti Goat | Jackson Immuno Research | 705-485-003 | Discontinued |
| Rhodamine (TRTIC) Donkey anti Rabbit | Jackson Immuno Research | 711-025-152 | Discontinued |
| ProLong® Diamond Antifade Mountant w/ DAPI | Thermo Fisher | P36971 | |
| (−)-N6-(2-Phenylisopropyl)adenosine | Sigma Aldrich | P4532 | |
| 8-Cyclopentyl-1,3-dipropylxanthine | Sigma Aldrich | C101 | |
| siRNA pSTAT1 | Qiagen | Custome Made | Kaur et al. 201120 |
| siRNA NOX3 | Qiagen | Custome Made | Kaur et al. 201120 |
| Scrambled Negative Control siRNA | Qiagen | 1022076 | Kaur et al. 201120 |
References
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