副鼻腔癌と嗅神経芽細胞腫の 2 つの可能な分子マーカーとして OTX1、OTX2 の同定
Summary
ホメオ ボックス遺伝子は遺伝子発現しばしば大人の有機体の腫瘍に関連付けられています。免疫組織化学的および正常および炎症性鼻粘膜や副鼻腔腫瘍診断と治療対象としてそれらを使用するためにリアルタイム PCR 解析による発現の比較を行った。
Abstract
OTX (HB) ホメオ ボックス遺伝子は胚形態形成期および大人の有機体の嗅上皮の開発中に表されます。これらの遺伝子で発生する突然変異は人間の腫瘍頻繁に関連しています。OTX遺伝子と鼻腔内の腫瘍の可能な相関について現在利用可能なデータはありません。この作業の目的は、 OTX1 、 OTX2を鼻腔内腫瘍の開発の分子マーカーとして考えることがかどうかを理解することです。我々 は、鼻腔と副鼻腔の腺癌の免疫組織化学的およびリアルタイム PCR 解析を通じてOTX1 、 OTX2遺伝子の発現を調査するを選択します。OTX1 、 OTX2欠席した副鼻腔腸型腺癌 (ITACs) のすべてのサンプルで。OTX1 mRNA は、嗅神経芽細胞腫 (アドオン) でのみ発現していたOTX2 mRNA 中非腸型腺癌 (NITACs) でのみ確認されました。副鼻腔腫瘍の種類を区別するために有用な分子マーカーをことがありますOTX1 、 OTX2遺伝子の遺伝子発現を確認しました。
Introduction
OTXHB 遺伝子ショウジョウバエ orthodenticle 遺伝子 (otd) の脊椎動物ホモログと彼らは転写因子が胚の形態形成時に通常のエンコードしますが、異なる機能を持った大人の有機体で表すこともできます。.萌芽期の開発の間に細胞の識別、細胞分化および体 axis¹ の位置決めの仕様を制御します。OTXファミリには、さまざまな機能を表示するOTX1 、 OTX2遺伝子が含まれています。OTX1は脳および感覚的な器官の開発に関与しています。大人の有機体のそれは感覚器官で表され、下垂2; の前葉の低レベルで転写されます。また、多能性造血前駆細胞3で表現される造血に役割を果たしています。OTX2は吻側のヘッドの開発に関与し、モルフォゲンとして翻訳されたタンパク質行為を他の遺伝子をグラデーションを生成するのでがアクティブ化またはセルに貢献時空間的な抑圧増殖・分化します。大人の有機体では、 OTX2は脈絡叢および pineal 腺4排他的に見られます。
OTX遺伝子の突然変異は先天性、体や代謝の不具合に人間の姿によく関連しています。OTX遺伝子の利得または損失の突然変異は、細胞の成長や分化5を正しく制御することがされていない場合、腫瘍を促進でした。白血病や悪性リンパ腫も多くの固形腫瘍 (あり髄芽腫6など、積極的な非ホジキン リンパ腫2乳房癌7、大腸癌8、および網膜芽細胞腫9) のように、OTX HB 遺伝子の発現はよくとり上げられる10です。また、 OTX2突然変異は、無眼球、microphtalmia11目の開発の制御のこの遺伝子の重要な役割のための例で実証されています。
固形腫瘍の中では、分子および表現型マーカーの発見、診断、分類、および腫瘍の11鼻腔と副鼻腔で発生するものを含むいくつかの種類の治療のための重要な課題副鼻腔。実際には、それにもかかわらずこれらの区域を占めるのみささやかな解剖学的スペース、粘膜上皮、腺、軟部組織、骨、軟骨または神経/神経と hematolymphoid 細胞はしばしば複雑で、組織学的に別の起源のサイトをすることができます。腫瘍のグループ。副鼻腔管を含む腫瘍の種類は、通常上部延びる気道消化管または12体のほとんどの部分も全体に見られるものを克服するための機能の様々 なを紹介します。副鼻腔の悪性腫瘍はまれであり、1: 100,000 人の住民の年間発生率を世界中に存在、ので、腫瘍と代替治療戦略のテストに関与する経路に関する研究できません。これ、画像診断の進歩にもかかわらず、外科的アプローチと放射線治療副鼻腔癌の臨床管理を改善しています。さらに、細胞株、動物モデル、がん遺伝プロファイリングの開発現在将来癌標的治療13の基礎となります。日には、鼻腔、副鼻腔、上咽頭の腫瘍におけるOTX1および/またはOTX2式に関する報告はありません。以来、我々 は以前OTX1 、 OTX2が乳房癌7で関与していることを観察している、我々 はこれらの遺伝子が通常鼻の粘膜だけでなく、鼻腔内の腫瘍だけではなく存在できれば疑問。我々 は、「オスペダーレ ・ ディ ・ Circolo」ヴァレーゼ サンプルで正常粘膜および 2012 年までの 1985 年から収集し、分類される世界保健機構 (WHO) によると鼻腔と副鼻腔の腺癌の病理科から得られるこの目標を達成するには頭と首の腫瘍の分類。リアルタイム PCR および免疫組織化学的解析を通じてそれらを分析することを選択し、彼らがこれらのタイプの腫瘍の分子マーカーを考えることができるかどうかを決定するOTX1 、 OTX2式を評価しました。
Protocol
Representative Results
Discussion
本研究は、はじめてであり、mRNA レベルに基づいて HB 遺伝子 OTX1 OTX2 通常副鼻腔粘膜と粘膜下腺、炎症性ポリープ、副鼻腔 Schneiderian 乳頭腫と別の表現と神経外胚葉性上皮腫瘍、扁平上皮癌、非腸型副鼻腔腺癌、唾液腺型腫瘍、神経内分泌腫瘍、およびアドオンを含みます。
変更とトラブルシューティング:
RNA の劣化を避けるためには、病理研究室で de…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
この仕事に支えられセントロ グランディ楽器そして dell’Insubria、財団 Comunitaria ・ デル ・ Varesotto 財団・ デル ・ モンテ ・ ディ ・ ロンバルディアとスタンパーリアラヴェッロ アンナ ヴィラ e フェリーチェ Rusconi。
Materials
| RecoverAll Total Nucleic Acid Isolation | Applied Biosystem | AM1975 | |
| High-Capacity cDNA Reverse Transcription Kit | Applied Biosystem | 4368814 | |
| TaqMan Universal PCR Master Mix, no AmpErase UNG | Applied Biosystem | 4326614 | |
| ABI Prism 7000 | Applied Biosystem | 270001857 | |
| ACTB probe | Applied Biosystem | Out of production. Sequence protected by copyright | |
| OTX1 probe | Applied Biosystem | Out of production. Sequence protected by copyright | |
| OTX2 probe | Applied Biosystem | Out of production. Sequence protected by copyright | |
| Acqueous Hydrogen Peroxide | Merk | 1072090250 | |
| Citrate Buffer | Sigma-Aldrich | 20276292 | |
| Triton | Sigma-Aldrich | 101473728 | |
| Tris | Merk | 108382 | |
| NaCl | Merk | 106404 | |
| Goat Anti-OTX2 Antibody | Vector Laboratories | Out of production. Catalog number not available | |
| Rabbit Anti-Goat Antibody | Vector Laboratories | BA5000 | |
| ABC-Peroxidase Complex | Vector Laboratories | PK6100 | |
| 3,3'-diaminobenzidine tetrahydrocloride (DAB) | Sigma-Aldrich | D5905 | |
| Harris Hematoxylin | Bioptica | 0506004/L | |
| Pertek | Kaltek SRL | 1560 | |
| BioClear | Bioptica | W01030799 |
References
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