Summary

Extraction et analyse des taïwanaise Propolis verte

Published: January 07, 2019
doi:

Summary

Nous présentons un protocole pour l’utilisation de l’éthanol comme solvant d’extraire et de caractériser la propolis verte taïwanaise qui présente une activité antibactérienne.

Abstract

Taïwanaise propolis verte est riche en flavonoïdes prénylés et présente un large éventail d’activités biologiques, comme antioxydant, antibactérien et les anticancéreux. Les composés bioactifs de propolis verte taïwanaise sont propolins, à savoir C, D, F et G. La concentration de propolins dans la propolis verte taïwanaise varie selon la saison et la localisation géographique. Ainsi, il est essentiel d’établir une procédure standard et reproductible pour la détermination de la qualité de la propolis verte taïwanaise. Nous présentons ici un protocole qui utilise l’extraction à base d’éthanol, chromatographie liquide à haute performance et une analyse de l’activité antibactérienne pour caractériser la qualité de la propolis verte taïwanais. Cette méthode indique que 95 % et 99,5 % des extractions de l’éthanol atteignent les rendements en matière sèche maximale de la propolis verte taïwanaise, réduisant ainsi aux plus fortes concentrations de propolins qui ont des propriétés antibactériennes. Selon ces résultats, le présent protocole est réputé fiable et reproductible pour la détermination de la qualité de la propolis verte taïwanaise.

Introduction

La propolis est un mélange de résineux naturel produit par l’espèce d’abeille Apis mellifera. La propolis a été largement utilisée depuis l’antiquité en médecine folklorique. Une étude a récemment rapporté que la propolis est bénéfique pour prévenir les infections microbiennes et inflammation1. De nombreuses études ont démontré que les principaux composés bioactifs dans la propolis sont des flavonoïdes, des esters de l’acide phénoliques, prénylés p-coumarique acides et diterpenic acides2,3. A ce jour, 10 dérivés de flavanone prénylés de propolis verte taïwanaise ont été identifiés par chromatographie liquide à haute performance (HPLC)4,5,6,7. Les plus abondantes parmi ceux-ci sont propolins C, D, F et G5,7. Les effets biologiques considérables de propolis verte taïwanaise sont corrélés avec sa haute teneur de propolins8.

Les concentrations de composés bioactifs dans la propolis varient considérablement selon la saison et l’emplacement géographique d’où provient la propolis. La propolis européenne contient essentiellement des flavonoïdes aglycone et phénoliques acides9. Les principaux composés bioactifs dans la propolis du Brésil sont prénylés p-coumarique acides, tels qu’artepillin C10. Une étude a démontré que la saison est un facteur essentiel pour déterminer la teneur totale propolin taïwanais propolis verte11. Le contenu de propolin en taïwanais propolis verte est plus élevé en été (mai – juillet) et plus faible en hiver11. La propriété antibactérienne de la propolis a été considérée comme un indicateur de l’activité biologique. En général, les échantillons de la propolis provenant de diverses régions ont manifesté une propriété antibactérienne similaire ; par exemple, il est généralement efficace contre presque toutes les bactéries gram-positives et présente un effet antibactérien limité contre les bactéries gram-négatives10,12,13. Ont démontré que des interactions synergiques entre les flavonoïdes contenus dans la propolis ont un effet antibactérien14. De même, la propolis verte taïwanaise aurait ont un effet antimicrobien contre les bactéries gram-positives,15. En outre, une étude a également un effet antimicrobien de l’interaction de propolins en taïwanais propolis verte8.

La caractérisation des composés bioactifs dans la propolis est difficile parce que sa composition chimique peut varier selon sa source d’origine. Par conséquent, il est nécessaire d’établir une méthode faisable et reproductible pour la détermination de la qualité de la propolis verte taïwanaise. Cependant, aucune procédure standard n’a été établi pour l’extraction de la propolis verte taïwanais et analyse fonctionnelle. Plusieurs méthodes s’appliquant indifféremment des solvants organiques et inorganiques ont été proposées pour la propolis extraction16,17,18,19,20. Parce que la propolis est un mélange lipophile, les études ont démontré que l’extraction organique est mieux qu’extraction inorganiques8,18,19. La concentration totale propolin taïwanaise propolis verte et ses propriétés antibactériennes sont des indicateurs clés de la qualité de la propolis verte taïwanaise. Ainsi, le but de cette étude est de présenter un protocole pour l’utilisation d’éthanol comme solvant d’extraire et de caractériser les propriétés antibactériennes de propolis verte taïwanaise.

Protocol

1. préparation de l’extrait l’éthanol composés Peser 10 g de gelée propolis verte taïwanaise, qui ont été recueillie des ruches à Taïwan de mai à juillet, et les broyer à l’aide du moulin à épices. Confirmer qu’entiers morceaux de propolis verte taïwanaise est broyés en une fine poudre sans les particules volumineuses. Ajouter 100 mL de diverses concentrations d’éthanol (60 %, 70 %, 80 %, 95 % et 99,5 %) et de l’eau pour séparer les flacons et mélanger chaque concentratio…

Representative Results

Résultats positifs des données représentatives pour l’extraction de l’éthanol sont présentées au tableau 1. Le rendement en matière sèche de la propolis verte taïwanais était corrélée positivement avec la concentration d’éthanol. Les extraits de l’éthanol 95 % et 99,5 % avaient la matière sèche plus élevée rendement de propolis verte taïwanaise. Le rendement en matière sèche plus faible de la propolis verte taïwanais s’est produite lorsque …

Discussion

Une étude a rapporté que macération, avec différentes concentrations d’éthanol, pourrait servir pour l’ extraction de la propolis brésilienne17; Toutefois, le processus était long17. Il a fallu au moins 10 jours pour extraire les composés bioactifs, comme la teneur en composés phénoliques, de propolis brésilienne17. Par ailleurs, extraction de l’éthanol en combinaison avec chauffage à 37 ° C, 50 ° C ou 70 ° C pendant 30 min a ét?…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Ce manuscrit a été édité par Wallace édition académique.

Materials

ethanol Sigma-Aldrich E7023
Whatman no. 4 filter paper Sigma-Aldrich WHA1004125
methanol Sigma-Aldrich 34860
reverse phase RP-18 column Phenomenex Inc. 00G-0234-E0
Staphylococcus aureus ATCC BCRC 10780
Escherichia coli ATCC BCRC 10675
tryptic soy broth Sigma-Aldrich 22092
nutrient broth Sigma-Aldrich 70122
dimethyl sulfoxide Sigma-Aldrich D2650
spice grinder Waring WSG60K
microplate Reader Molecular Devices EMAX PLUS
HPLC system Agilent 1200 Series
vacuum evaporation BÜCHI Rotavapor R-215

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Cite This Article
Chen, C., Chien, Y., Yu, Y., Chen, Y. Extraction and Analysis of Taiwanese Green Propolis. J. Vis. Exp. (143), e58743, doi:10.3791/58743 (2019).

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