Summary

Murin Yolk Sac ve AGM Erken Hematopoetik Kök Hücre İzolasyonu

Published: June 27, 2008
doi:

Summary

Bu video yolk kesesi ve aort-gonad mesonephros bölge embriyolardan mikro incelemek ve hematopoietik kök hücreler sıralamak için flow sitometri kullanmak nasıl gösterir.

Abstract

Fare embriyo, erken hematopoez yolk kesesi ve aort-gonad-mesonephros bölge içeren birden fazla organlar, aynı anda oluşur. Bu bölgeler embriyoların kan sisteminin kurulması çok önemlidir ve fetal karaciğer bonemarrow yetişkin kök hücrelerin gelişmesi ve daha sonra kök hücrelerin nihai hareketi sağlar. Erken hematopoietik kök hücreler, bu organların akım sitometrik sıralayarak daha saf bir nüfusa elde etmek için embriyonun mikrodiseksiyon yoluyla izole edilebilir. Bu kök hücre popülasyonlarının fetal ve yetişkin kök hücre havuzu nasıl katkıda belirsizliğini koruyor. Ayrıca, laboratuvar erken kök hücreler işlevsel, fetal ve yetişkin hematopoetik kök hücreler nasıl farklı inceler. Ayrıca, laboratuvar türlü hematopoietik kök hücrelerin farklı popülasyonlar ve çeşitli genetik modelleri bağlamında işlevsel rolü test. Koloni testleri ve kemik iliği nakli: Bu videoda, biz, sık kullandığınız ve aynı zamanda bu nadir nüfusun izole tipik bir FACS plotfter sonuçlarını göstermek mikro diseksiyon prosedürü göstermektedir, fonksiyonel testlerinin de dahil olmak üzere çeşitli gerçekleştirmek mümkündür.

Protocol

Diseksiyon ve izolasyon fare yolk kesesi ve aort-gonad-mesonephros bölgenin erken hematopoetik kök hücrelerin Başlamadan önce, prosedürü için gerekli tüm reaktifler ve araçlar için önemlidir: Makas Forseps, büyüklüğü 4 ve cerrahi sınıf kıvrık uçlu forseps, büyüklüğü 5 / 45 (isteğe bağlı) Şırınga ile 30 insülin iğnesi 35mm ve 100mm Petri kapları PBS% 10 ve% 20 fetal sığır serumu ve son olarak, kollajenaz </l…

Play Video

Cite This Article
Morgan, K., Kharas, M., Dzierzak, E., Gilliland, D. G. Isolation of Early Hematopoietic Stem Cells from Murine Yolk Sac and AGM. J. Vis. Exp. (16), e789, doi:10.3791/789 (2008).

View Video