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Einzel-Molekül-Imaging der Genregulation<em> In vivo</em> Verwenden cotranslationalen Aktivierung durch Spaltung (CoTrAC)
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Single-molecule Imaging of Gene Regulation In vivo Using Cotranslational Activation by Cleavage (CoTrAC)
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Einzel-Molekül-Imaging der Genregulation<em> In vivo</em> Verwenden cotranslationalen Aktivierung durch Spaltung (CoTrAC)

DOI:
10.3791/50042-v

•

11:31 min

•

March 15, 2013

•

, ,
1Department of Biophysics and Biophysical Chemistry,Johns Hopkins University School of Medicine, 2Changchun Institute of Applied Chemistry,Chinese Academy of Sciences , 3Department of Physics,Jilin University

Chapters

  • 00:05Title
  • 01:54Strain Engineering Workflow
  • 03:11Sample Preparation
  • 06:17Imaging and Acquisition of Timelapse Movies
  • 08:48Results: Typical Data from a CoTrAC Experiment
  • 11:06Conclusion

Summary

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Wir beschreiben ein Verfahren der Fluoreszenzmikroskopie, Co-translationale Aktivierung durch Spaltung (CoTrAC), zur Abbildung der Herstellung von Protein-Molekülen in lebende Zellen mit Einzel-Molekül-Präzision ohne Stören des Proteins Funktionalität. Dieses Verfahren wurde verwendet, um die Expression stochastische Dynamik eines Transkriptionsfaktors, dem λ-Repressor CI folgen<sup> 1</sup>.

Tags

Single-molecule ImagingGene RegulationIn VivoCotranslational Activation By Cleavage (CoTrAC)Fluorescence MicroscopyProtein ProductionLive CellsFluorescent ReporterMembrane TargetingProtease RecognitionProtein Of InterestFluorescence ImagingPhotobleachingCell LineagesGene ExpressionLambda Repressor CISystems Biology

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