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Singola molecola di imaging del regolamento Gene<em> In vivo</em> Utilizzo di attivazione Cotranslational da Cleavage (CoTrAC)
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JoVE 杂志 生物学
Single-molecule Imaging of Gene Regulation In vivo Using Cotranslational Activation by Cleavage (CoTrAC)
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Singola molecola di imaging del regolamento Gene<em> In vivo</em> Utilizzo di attivazione Cotranslational da Cleavage (CoTrAC)

DOI:
10.3791/50042-v

•

11:31 min

•

March 15, 2013

•

, ,
1Department of Biophysics and Biophysical Chemistry,Johns Hopkins University School of Medicine, 2Changchun Institute of Applied Chemistry,Chinese Academy of Sciences , 3Department of Physics,Jilin University

Chapters

  • 00:05Title
  • 01:54Strain Engineering Workflow
  • 03:11Sample Preparation
  • 06:17Imaging and Acquisition of Timelapse Movies
  • 08:48Results: Typical Data from a CoTrAC Experiment
  • 11:06Conclusion

Summary

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Descriviamo un metodo di microscopia a fluorescenza, Co-traslazionale di attivazione da Cleavage (CoTrAC), per l'immagine della produzione di molecole di proteine ​​in cellule vive con singola molecola di precisione senza perturbare la funzionalità della proteina. Questo metodo è stato utilizzato per seguire la dinamica stocastica espressione di un fattore di trascrizione, il repressore λ CI<sup> 1</sup>.

Tags

Keywords: Single-molecule ImagingGene RegulationIn VivoCotranslational Activation By Cleavage (CoTrAC)Fluorescence MicroscopyProtein ProductionLive CellsFluorescent ReporterMembrane TargetingProtease RecognitionProtein Of InterestFluorescence ImagingPhotobleachingCell LineagesGene ExpressionLambda Repressor CISystems Biology

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