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Identificación de Kinesin-1 Cargos El uso de microscopía de fluorescencia
JoVE 杂志
生物学
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JoVE 杂志 生物学
Identification of Kinesin-1 Cargos Using Fluorescence Microscopy
DOI:

08:06 min

February 14, 2016

Chapters

  • 00:05Title
  • 00:39Cell Culture for Immunofluorescence Microscopy
  • 01:32Preparation of Transfection Complex and Transfection of Cells
  • 03:08Live Cell Imaging and Indirect Immunofluorescence
  • 05:40Results: Identifying Kinesin Cargo via Fluorescence Microscopy
  • 06:50Conclusion

Summary

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A continuación, se presenta un protocolo para identificar Kinesin-1 cargamentos. Un mutante sin motor de la Kinesin-1 de cadena pesada (KIF5B) agregados en el citoplasma e induce la agregación de sus cargas. Ambos agregados se detectan bajo microscopía de fluorescencia. Una estrategia similar se puede emplear para identificar cargamentos de otras proteínas de motor.

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