Création d'expérimental murin anévrismes aortiques abdominaux avec l'élastase
Summary
Cette vidéo montre comment provoquer un anévrisme aortique abdominal (AAA) chez des souris par perfusion intraluminale transitoires de l'élastase pancréatique porcine dans le segment sous-rénal de l'aorte abdominale. Le modèle a la possibilité d'ajouter bon aperçu du pathobiologie de AAA en raison de l'émergence des cultures transgéniques et des souris knockout de nombreux gènes.
Abstract
Transient perfusion intraluminale de l'élastase pancréatique porcine dans le segment sous-rénal de l'aorte abdominale est le modèle animal le plus largement utilisé des anévrismes de l'aorte abdominale (AAA) depuis qu'elle a été décrite pour la première chez le rat par Anidjar et ses collègues 1. La justification de son développement a été basée sur la nature perturbée de l'élastine observée en AAA. Ce modèle de rat a été modifié pour produire AAA dans la région de l'aorte de souris. 2 Le modèle a la possibilité d'ajouter un aperçu général sur la pathobiologie de AAA en raison de l'émergence de nombreuses transgéniques et des souris knockout du gène. Par ailleurs, il est une plateforme viable pour tester des agents thérapeutiques potentiels pour AAA. Dans cette vidéo, nous démontrons la procédure perfusion d'élastase AAA utilisées dans notre laboratoire.
Les souris sont anesthésiées à l'aide de 2,5% d'isoflurane, et une laparotomie est effectuée dans des conditions stériles. Le aortais abdominale isolée avec l'aide d'une loupe binoculaire d'exploitation (Leica). Après avoir placé des ligatures temporaires autour de l'aorte proximale et distale, une aortotomie est créé à la bifurcation avec la pointe d'une aiguille de calibre 30. Un segment de la chaleur conique de tube PE-10 en polyéthylène est introduit par l'aortotomie et sécurisé. La lumière aortique est ensuite perfusé pendant 5-15 minutes à 100 mm Hg avec le type de contenant une solution saline, je l'élastase pancréatique porcine (4,5 U / ml; Sigma Chemical Co.). Après avoir retiré le cathéter de perfusion, la aortotomie est réparé sans constriction de la lumière.
Protocol
Discussion
Des études antérieures ont noté significative lot à lot de variation dans le développement AAA de différentes préparations commerciales élastase 3. Ainsi, il est essentiel de surveiller des lots de production ainsi que d'avoir des groupes de contrôle appropriées afin de documenter la capacité de la préparation d'induire AAA.
Fait intéressant, la susceptibilité au développement AAA dans ce modèle dépend de la souche de souris utilisée 3. Les sou…
Offenlegungen
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Ce travail a été soutenu la subvention SCCOR "Maladie AAA: Mécanismes, la stratification et de traitement» (P50 HL083800-03) de la National Institutes of Health
Materials
| Material Name | Typ | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Type I porcine pancreatic elastase | Reagent | Sigma | E1250 | |
| polyethylene tubing (PE-10) | CLAY ADAMS | 427400 | ||
| CHANGE-A-TIP | Bovie | 18010-00 (FST) | cautery knife | |
| LEICA MZ6 | Leica | stereomicroscope | ||
| LEICA DFC290HD | Leica | USB camera | ||
| Image Pro Express ver. 6.0 | Media Cybernetics | software |
Referenzen
- Anidjar, S., Salzmann, J. L., Gentric, D. Elastase-induced experimental aneurysms in rats. Circulation. 82 (3), 973-973 (1990).
- Pyo, R., Lee, J. K., Shipley, J. M. Targeted gene disruption of matrix metalloproteinase-9 (gelatinase B) suppresses development of experimental abdominal aortic aneurysms. J Clin Invest. 105 (11), 1641-1641 (2000).
- Carsten, C. G., Calton, W. C., Johanning, J. M. Elastase is not sufficient to induce experimental abdominal aortic aneurysms. J Vasc Surg. 33 (6), 1255-1255 (2001).
