Ensaio da sonda de calor local: um método para avaliar a nocicepção de altas temperaturas em larvas de Drosophila

Abstract

Fonte: Chattopadhyay, A., et al. Métodos Locais e Globais de Avaliação do Nociception Térmico em Larvas de Drosophila . J. Vis. Exp. (2012).

As larvas de drosophila têm neurônios sensoriais dedicados – nociceptores – cuja resposta a estímulos térmicos potencialmente prejudiciais desencadeia comportamentos aversivos – ou os chamados “nocifensivos” – comportamentos no animal. Este vídeo descreve um método para avaliar a nocicepção térmica registrando o comportamento larval em resposta à aplicação local de uma sonda de calor na cutícula. Este método é, portanto, chamado de ensaio de sonda de calor local.

Protocol

Este protocolo é um trecho de Chattopadhyay et al., Métodos Locais e Globais de Avaliação do Nociception Térmico em Drosophila Larvae, J. Vis. Exp. (2012). 1. Ensaio da sonda de calor local Fornecemos um estímulo térmico nocivo a um segmento de corpo larval individual usando uma sonda térmica personalizada fabricada pela Pro-Dev Engineering (ver Tabela de materiais). Embora esta sonda tenha características de design ótimas (uma pe…

Representative Results

Figura 1: Configuração experimental para ensaio de sonda de calor local. A sonda de calor é controlada por uma unidade de controle térmico que é usada para definir e manter a temperatura da sonda. A sonda é mantida perpendicular ao eixo anteroposterior e usada para estimular a larva em um ângulo de 45° para a horizontal. O contato com a sonda é feito especificamente no segmento abdominal A4, como mostrado. O usu?…

Materials

Thermal Probe	Pro-Dev Engineering	Custom-built on demand	Contact information can be provided on request
Leica DFC290 12v/400mA Color camera	Leica Microsystems	12730080	Any equivalent camera will do.
Leica MZ6 microscope	Leica Microsystems	Part number for MZ6 zoom body (optics carrier) is 10445614
Schott Ace Modulamp Unit	Schott AG	A20500
Schott Dual Gooseneck 23 inch Fiber Optic Light Guide	Schott AG	Schott A08575
Thermal Control Unit	TSCI corp.	Custom Built	Details can be provided on request
Zeiss Stemi 2000 microscope	Carl Zeiss, Inc.	NT55-605	Any equivalent microscope will do.
Forceps	Fine Science Tools	FS-1670
Paintbrush	Blick Art Materials	06762-1002
35 X 10 mm Polystyrene Petri Dish	Falcon BD	351008	We have not tested alternative dishes.
Piece of vinyl	Office Depot	480009