Lokale hittesondetest: een methode om nociceptie van hoge temperaturen bij Drosophila-larven te beoordelen
Published: April 30, 2023
Abstract
Bron: Chattopadhyay, A., et al. Local and Global Methods of Assessing Thermal Nociception in Drosophila Larvae. J.Vis. Exp. (2012).
Drosophila-larven hebben speciale sensorische neuronen – nociceptoren – waarvan de reactie op potentieel schadelijke thermische stimuli aversief – of zogenaamd “nocifensief” – gedrag bij het dier veroorzaakt. Deze video beschrijft een methode om thermische nociceptie te beoordelen door larvaal gedrag op te nemen als reactie op lokale toepassing van een warmtesonde op de cuticula. Deze methode wordt daarom de lokale hittesondetest genoemd.
Protocol
Dit protocol is een uittreksel uit Chattopadhyay et al., Local and Global Methods of Assessing Thermal Nociception in Drosophila Larvae, J. Vis. Exp. (2012). 1. Lokale hittesondetest We leveren een schadelijke thermische stimulus aan een individueel larvaal lichaamssegment met behulp van een op maat gemaakte thermische sonde vervaardigd door Pro-Dev Engineering (zie tabel met materialen). Hoewel deze sonde optimale ontwerpkenmerken heeft (e…
Representative Results
Figuur 1: Experimentele opstelling voor lokale warmtesondetest. De warmtesonde wordt aangestuurd door een thermische regeleenheid die wordt gebruikt om de temperatuur van de sonde in te stellen en te handhaven. De sonde wordt loodrecht op de anteroposterior-as gehouden en gebruikt om de larve onder een hoek van 45° ten opzichte van het horizontale vlak te stimuleren. Sondecontact wordt specifiek gemaakt bij abdominale se…
Materials
| Thermal Probe | Pro-Dev Engineering | Custom-built on demand | Contact information can be provided on request |
| Leica DFC290 12v/400mA Color camera | Leica Microsystems | 12730080 | Any equivalent camera will do. |
| Leica MZ6 microscope | Leica Microsystems | Part number for MZ6 zoom body (optics carrier) is 10445614 | |
| Schott Ace Modulamp Unit | Schott AG | A20500 | |
| Schott Dual Gooseneck 23 inch Fiber Optic Light Guide | Schott AG | Schott A08575 | |
| Thermal Control Unit | TSCI corp. | Custom Built | Details can be provided on request |
| Zeiss Stemi 2000 microscope | Carl Zeiss, Inc. | NT55-605 | Any equivalent microscope will do. |
| Forceps | Fine Science Tools | FS-1670 | |
| Paintbrush | Blick Art Materials | 06762-1002 | |
| 35 X 10 mm Polystyrene Petri Dish | Falcon BD | 351008 | We have not tested alternative dishes. |
| Piece of vinyl | Office Depot | 480009 |
Diesen Artikel zitieren
Local Heat Probe Assay: A Method to Assess Nociception of High Temperatures in Drosophila Larvae. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20146, doi: (2023).