FitC-Dextran Кормление: Метод количественной оценки проницаемости кишечника в C. elegans

Published: April 30, 2023

Abstract

Источник: Le, T. A. N., et al. Измерение воздействия бактерий и химических веществ на проницаемость кишечника Caenorhabditis elegans. J. Vis. Exp. (2019). 

Это видео вводит метод визуализации и измерения целостности C. elegans кишечника люмена путем кормления червей FITC помечены декстран.  Пример протокола показывает анализ, проделанной с 3,3′-diindolylmethane (DIM)-обработанных и патогенных червей.

Protocol

Этот протокол является выдержка из Le et al, Измерение воздействия бактерий и химических веществ на кишечной проницаемости Caenorhabditis elegans, J. Vis. Exp. (2019). <stro…

Representative Results

Рисунок 1: Влияние ДИМ на проницаемость кишечника C. elegans кормили P. aeruginosa. Микроскопические изображения червей из (A) E. coli OP50 без кормления FITC-декстран, ( B )E.</str…

Materials

3,3’-diindolylmethane  Sigma D9568
90×15 mm Petri dishes SPL Life Sciences, South Korea 10090
Bactor Agar Beckton Dickinson REF. 214010
Formaldehyde solution  Sigma F1635
Caenorhabditis elegans N2 Caenorhabditis Genetics Center (CGC) Wild type 
Cholesterol Sigma C3045
Costa Assay Plate, 96 Well Black With Clear Flat Bottom Non-treated, No Lid Polystyrene Corning Incorporated REF. 3631
Dimethyl sulfoxide Sigma D2650
Escherichia coli OP50 Caenorhabditis Genetics Center (CGC)
Fluorescein isothiocyanate – dextran Sigma FD10S
Harmony software  PerkinElmer verson 3.5
Magnesium sulfate heptahydrate  Fisher Bioreagents BP2213-1
Fluoromount aqueous mounting medium Sigma F4680
Operetta CLS High-Content Analysis System PerkinElmer  HH16000000
Peptone Merck EMD 1.07213.1000
Pseudomonas aeruginosa PA01 Korean Collection for Type Culture KCTC NO. 1637
Sodium Chloride Fisher Bioreagents BP358-1
Stereo Microscope Nikon, Japan SMZ800N

Play Video

Diesen Artikel zitieren
FITC-Dextran Feeding: A Method to Quantify Intestinal Permeability in C. elegans. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20167, doi: (2023).

View Video