אגר-Block מיקרוקוסמוס של פירוק רקמות הצמח מבוקרת על ידי פטריות אירובית
Summary
וידאו זה מדגים גישה בסביבה מבוקרת ללמוד השפלה של רקמות הצמח lignocellulosic ידי פטריות אירובית. היכולת לשלוט במקורות מזין לחות היא יתרון המפתח של אגר, לחסום מיקרוקוסמוס, אך הגישה לרוב מניב הצלחה מעורבת. אנו כתובת החסרונות קריטי תשואה לשחזור, השתנות נמוך התוצאות.
Abstract
שתי השיטות העיקריות לחקר ביודגרדציה פטרייתי של רקמות הצמח lignocellulosic פותחו עבור בדיקות משמר עץ (אדמה לחסום; אגר בלוק). זה טוב כי קיבל אדמה לחסום מיקרוקוסמוס להניב שיעורי עששת גבוה יותר, פחות בעיות רטיבות, השתנות נמוך יותר בקרב מחקרים, ועל סף גבוה יותר של רעילות חומר משמר. אדמה היא לחסום בדיקות ובכך הטכניקה מנוצל יותר כבר טופל על ידי האגודה האמריקאית לבדיקות וחומרים (ASTM) (שיטה D 1413-1407). העיצוב אדמה לחסום יש חסרונות, לעומת זאת, שימוש במקורות אדמה מקומית משתנה וגם להגביל את השליטה של חומרים מזינים חיצוני (אקסוגני) לרקמות מתפורר. חסרונות אלה התפתחו כמו בעיה ביישום שיטה זו, מטרות אחרות מחקר פופולרי יותר ויותר. אלה מטרות המודרני כוללים lignocellulosics משפיל למחקר Bioenergy, בדיקות bioremediation של שיתוף מטבוליזם רעלים, הערכת המנגנונים חמצוני, ועוד אלמנטים translocated מעקב לאורך רשתות hyphal. קרקע, בלוקים לא להשאיל לשלוט מספיק ביישומים אלה. גישה מעודן אגר לחסום הכרחי.
כאן, אנו משתמשים ריקבון חום עץ משפיל פטרייה Serpula lacrymans להשפיל עץ אגר לחסום מיקרוקוסמוס, באמצעות עמוק צלחות פטרי עם אגר סידן נמוכה. אנחנו בודקים את התפקיד של אקסוגניים גבס על ריקבון בסדרה פעמי, כדי להדגים את השירות ואת השתנות צפוי. רחובות אחד לוח לקרוע (חתך אורך) מותנים, שקל, autoclaved, והציג בסביבה נקייה מחיידקים, על גבי רשת פלסטיק. חיסונים פטרייתיים הם על הפנים כל בלוק, עם גבס אקסוגניים נוסף על ממשקים. היבולים הם aseptic עד הקציר הרסני הסופי. מיקרוקוסמוס אלה נועדו לחסום להימנע ממגע עם אגר או קירות פטרי צלחת. עיבוי ממוזער במהלך צלחת שופך במהלך הדגירה. לבסוף, inoculum / גבס / עץ המרווח ממוזער אך מבלי לאפשר קשר. אלה ההיבטים הטכניים של עיצוב פחות אגר לחסום גם הם הגורמים השכיחים ביותר של כישלון המקור המפתח של השתנות בין המחקרים. פרסום וידאו ולכן הוא שימושי במקרה הזה, ואנחנו מראים השתנות נמוך, תוצאות באיכות גבוהה.
Protocol
Discussion
באמצעות אגר לחסום שלנו הגדרת (איור 1) Serpula lacrymans גדל במגע ישיר עם משטחי גבס לתוך גושי עץ (איור 2), מובילה לאובדן יותר מ 60% במשקל של חום נרקב לשלוט בלוקים אורן (איור 3 ). זה בקלות עונה על המטרה תקן ASTM של ריקבון> 50%, ואת הממוצע של מקדם השונות (C V) ב ריקבון בבית היה 0.055 ב?…
Offenlegungen
The authors have nothing to disclose.
Materials
| Material Name | Typ | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Petri dishes | Nunc | 4014 | 25 x 150 mm | |
| Agar, Type A | Sigma | A4550 | ||
| Ammonium nitrate, NH4NO3 | Millinckrodt | 3436-12 | ||
| Potassium phosphate, KH2PO4 | J.T. Baker | 3246-01 | ||
| Magnesium sulfate 7-hydrate, MgSO4•7H2O | Sigma | 230391 | ||
| D-(+)-Glucose | Sigma | G8270 | Dextrose | |
| Boric acid, H3BO4 | Mallinckrodt | 2549-04 | ||
| Zinc sulfate 7-hydrate, ZnSO4•7H2O | Mallinckrodt | 8880-12 | ||
| Manganous chloride 4-hydrate, MnCl2•4H2O | J.T. Baker | 2540-04 | ||
| Copper(II) sulfate 5-hydrate, CuSO4•5H2O | Sigma | 209198 | ||
| Ammonium heptamolybdate 4-hydrate, (NH4)6Mo7O24•4H2O | Sigma-Aldrich | 431346 | ||
| Calcium chloride dihydrate, CaCl2•2H2O | Mallinckrodt | 4160-12 | ||
| Sodium chloride, NaCl | Mallinckrodt | 7581-12 | ||
| Ferrous sulfate 7-hydrate, FeSO4•7H2O | Mallinckrodt | 5056-12 | ||
| Pipet-aid | Drummond | 4-000-110 | Cordless EtOH the surface |
|
| 10 ml sterile polystyrene pipette | BD Biosciences | 357551 | ||
| Gutter Guard | Thermwell Products Co. | VX620 | Pre-scrubbed with soap Hardware store |
|
| Calcium sulfate hemihydrate, CaSO4•0.5H2O | Acros Organics | 385355000 | ||
| #4 cork borer | Boekel | 1601 | ||
| Parafilm “M” | Pechiney | PM-996 |
Referenzen
- ASTM D1413-07. Standard test method for testing wood preservatives by laboratory soil-block cultures. . Annual Book of ASTM Standards. , 185-192 (2007).
- Bravery, A. F. . A miniaturized wood block for the rapid evaluation of wood preservative fungicides. , (1978).
- Low, G. A., Young, M. E., Martin, P., Palfreyman, J. W. Assessing the relationship between the dry rot fungus Serpula lacrymans and selected forms of masonry. Int. Biodeterior. Biodegrad. 46, 141-150 (2000).
- Nicolas, D. Volume I (One/1) – Degradation and Protection of Wood (Syracuse Wood Science Series #5). Wood Deterioration and Its Prevention by Preservative Treatments. , (1973).
- Schilling, J. S. Effects of calcium-based materials and iron impurities on wood degradation by the brown rot fungus Serpula lacrymans. Holzforschung. 64, 93-99 (2010).
