分子クローニング

分子クローニングとは、組み換えDNAをベクター（DNAの担体）に挿入し宿主生物内でそのDNA断片を複製させる一連のテクニックです。DNA断片（目的遺伝子）は、原核生物又は真核生物サンプルから単離できます。目的断片、別名インサート、を単離後、ベクターとインサートを同じ制限酵素で切断し精製します。その精製したベクターとインサートをライゲーションという手法を利用し繋ぎ合わせます。ライゲーション反応を触媒する酵素はリガーゼです。

このビデオでは、主要な実験方法の説明と共に全般的な分子クローニング工程をご覧いただけます。分子クローニング実験の鍵となる、実験戦略の重要性や形質転換したバクテリアコロニーのトラッキング方法、さらに精製したプラスミドにインサートが含まれているか制限酵素処理により確認する方法やシークエンシングによる確認方法も紹介しています。