における嗅覚受容ニューロンのホールマウント免疫標識<em>ショウジョウバエ</em>アンテナ
Summary
Herein we describe the process of whole mount immunostaining of Drosophila antennae, which enables us to better understand the molecular mechanisms involved in the diversification of olfactory receptor neurons (ORN)s.
Abstract
付臭剤の分子は、正確かつ協調的にそれらの標的受容体に結合する。各受容体は、特定の信号を認識し、脳にその情報を中継します。このように、嗅覚情報が知覚や行動、メリットの調査の両方を修正すること、脳へ転送する方法を決定する。興味深いことに、細胞のシグナル伝達および転写因子が嗅覚受容ニューロンの多様化に関与しているという新たな証拠がある。ここでは、in vivoでの嗅覚受容ニューロン組織をアッセイする免疫学的標識法をマウント堅牢全体を提供する。この方法を用いて、抗ELAV抗体、既知の汎神経マーカー及びOr49a-mCD8 :: GFP、特に抗GFP抗体を用いたNBAのニューロンに発現し嗅覚受容ニューロンを持つすべての嗅覚受容ニューロンを同定した。
Introduction
嗅覚系は臭気分子の巨大な様々な区別するために、その後、高次脳センターに得られた情報を送信するために使用される。この入力は、正確にそのような摂食及び相手1-6のような基本的な動物の行動を制御するために使用される。各嗅覚ニューロンタイプが臭いの特定のセットに関連付けられているように、嗅覚受容ニューロン（ORN）Sの多様化は、適切な嗅覚システム機能7に不可欠である。
ショウジョウバエの遺伝学はORNの開発と生理機能8月16日に関連する分子機構が関与する単一細胞レベルの調査を行うために私達を可能にします。 ショウジョウバエの触角の全マウント免疫染色は、より詳細に嗅覚受容ニューロンの多様化に関わる分子機構（ORN）S 7を理解することができました。ここに我々はACに簡単な方法の包括的な説明を提供これをhieve。
Protocol
Representative Results
Discussion
我々は説明しショウジョウバエのアンテナの解剖は、簡単で実験室環境で実行するのは簡単です。成功した切開を確保するためには、微細なエッジのはさみを利用することが不可欠である。解剖アンテナ免疫染色が、抗体溶液の蒸発を回避するために、水分で満たされた容器でそれらをインキュベートすることが重要である。解剖アンテナは、溶液中に浮遊する傾向がある。定着時にP…
Offenlegungen
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
この研究は、私立大学の戦略研究財団と私たちは、ビデオクリップを編集する大竹徳仁に感謝したいと思い、HT用の日本学術振興会若手Bの許諾のための文部科学省支援プログラムによってサポートされていました。
Materials
| Stemi DV4 dissection microscope | Zeiss | Stemi DV4 | |
| Glass bottom culture dishes | MatTek corporation | P35G-0-10-C | |
| Dissection scissor | Fine Science Tools | 15000-08 | |
| Rat anti-ELAV | Developmental Studies Hybridoma Bank | 7E8A10 | Dilution 1:200 |
| Mouse anti-GFP | Invitrogen | A11122 | Dilution 1:400 |
| Donkey Anti-Rabbit IgG | Jackson ImmunoResearch Laboratories | 711-225-152 | Dilution 1:200 |
| Donkey Anti-Rat IgG | Jackson ImmunoResearch Laboratories | 712-165-150 | Dilution 1:200 |
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