Химиотерапия индуцированных Сосудистая токсичность - в режиме реального времени<em> В естественных условиях</em> Изображений судна обесценение
Summary
We herein describe the method of fibered confocal fluorescent microscopy (FCFM) based imaging, which provides an innovative mode to understand physiological phenomena at the cellular and sub-cellular levels in animal subjects.
Abstract
Некоторые классы химиотерапии могут оказывать острые сосудистые изменения, которые могут прогрессировать в долгосрочных условий, которые могут предрасполагают пациента с повышенным риском сосудистых заболеваний. Тем не менее, хотя монтажной клинических данных, есть недостаток четких исследований сосудистой токсичности и, следовательно, этиологии гетерогенной группе сердечно-сосудистых заболеваний сосудов / еще предстоит выяснить. Кроме того, механизм, который может лежать в основе сосудистой токсичности может полностью отличаться от принципов, вызванной химиотерапией кардиотоксичности, которая связана с прямым ущербом миоцитов. Мы создали в режиме реального времени, в естественных условиях платформы молекулярной визуализации для оценки потенциального острая сосудистая токсичность противоопухолевых препаратов.
Мы создали платформу в естественных условиях, молекулярной визуализации высокого разрешения у мышей, подходит для визуализации сосудистую сеть в труднодоступных органов и справочных БлоOD судах, находящихся в одних и тех же лиц в то время как каждый человек служить ее собственным контролем. Кровь стенки сосудов отмечались нарушения после введения доксорубицина, представляющая собой уникальный механизм сосудистой токсичности, которые могут быть ранним событием травмы органов-мишеней. При этом метод расслаивается конфокальной флуоресцентной микроскопии (FCFM) на основе визуализации описано, которая обеспечивает новаторский режим, чтобы понять физиологические явления на клеточном и субклеточном уровнях в субъектах животных.
Introduction
Клинические данные показывают, что несколько классов химиотерапии вызывают различные сосудистых патологий, проявляющихся в болезнь Рейно, гипертония, инфаркта миокарда, цереброваскулярные атаки, и печеночной вено-occlusivedisease 1,2. "« Случайных »антиангиогенные наркотики" является довольно новый термин, который описывает обычные химиотерапевтические средства, которые действуют в качестве возможных ингибиторов ангиогенеза, хотя они не первоначально разработана для этой цели 3-5, но предназначен для устранения опухолевых клеток путем введения всего "обеспечение ущерб "в нормальных клетках, как это возможно 3. Несколько химиотерапии были подразумеваемых, сосудисто-токсикантов, как отмечено в клинических исследованиях с использованием сыворотки биомаркеров. Среди них являются алкилирующие агенты (например, циклофосфамид), соединения платины (например, цисплатин) и антрациклинов 1,2,5-7.
Острые сердечно-сосудистые осложнения могут возникнуть в РЕЗУЛЬТАТОВт сосудистой токсичности, вызванной химиотерапией. Они могут прогрессировать в хронических заболеваний, как атеросклероз и учета повышенного риска поздних сосудистых осложнений. Тем не менее, несмотря на растущее клинических доказательств, есть нехватка назначенных исследований, подчеркивающих механизм сосудистой токсичности и поэтому далее в выяснение точного патогенезе они причиняют является оправданным.
Основная задача в выявлении механизма, вызванной химиотерапией сосудистой токсичности происходит от сложности исследования сосудистой функции в естественных условиях. Мы описываем здесь платформу с высоким разрешением в молекулярной визуализации естественных мышей, что позволяет захватить поток крови и характеристики судов. Эта платформа облегчает обнаружение прямых вызванных лечением сосудистых эффектов: в режиме реального времени, а также после них в течение периода времени в пределах одних и тех же лиц.
Protocol
Representative Results
Discussion
Оценка вызванной химиотерапией сосудистой токсичности является сложной задачей из-за трудности в визуализации динамики сосудистой в ответ на раздражители в режиме реального времени. Многочисленные клинические исследования указывают на, что несколько химиотерапии привести к прямом…
Offenlegungen
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
None
Materials
| Name of Material/ Equipment | Company | Catalog Number | Comments/Description |
| general anesthesia (100mg/kg ketaset and 6mg/kg XYL-M2). | Fort Dodge Animal Health, IA, USA and Biove Laboratories, France | ||
| a depilatory cream (Veet) | ReckittBenckiser, Bristol, UK | ||
| A 30-gauge, 1/2-inch needle attached to 1 ml syringe | |||
| FITC dextran at a volume of 100 µl (10 mg/ml; FD2000S, MW 2000000 Dalton) | Sigma | ||
| Doxorubicin (8 mg/kg, Adriamycin) | Teva, Israel | ||
| paclitaxel (1.2 mg/kg, Medexel) | Taro, Israel | ||
| Saline |
Referenzen
- Chow, A. Y., et al. Anthracyclines cause endothelial injury in pediatric cancer patients: a pilot study. J Clin Oncol. 24 (6), 925-928 (2006).
- Nuver, J., et al. Acute chemotherapy-induced cardiovascular changes in patients with testicular cancer. J Clin Oncol. 23 (36), 9130-9137 (2005).
- Vos, F. Y., et al. Endothelial cell effects of cytotoxics: balance between desired and unwanted effects. Cancer Treat Rev. 30 (6), 495-513 (2004).
- Kerbel, R. S., et al. ‘Accidental’ anti-angiogenic drugs. anti-oncogene directed signal transduction inhibitors and conventional chemotherapeutic agents as examples.Eur. J Cancer. 36 (10), 1248-1257 (2000).
- Soultati, A., et al. Endothelial vascular toxicity from chemotherapeutic agents: preclinical evidence and clinical implications. Cancer Treat Rev. 38 (5), 473-483 (2012).
- Tempelhoff, G. F., et al. Blood coagulation during adjuvant epirubicin/cyclophosphamide chemotherapy in patients with primary operable breast cancer. J Clin Oncol. 14 (9), 2560-2568 (1996).
- Ben Aharon, I., et al. Doxorubicin-induced vascular toxicity–targeting potential pathways may reduce procoagulant activity. PLoS One. 8 (9), e7515 (2013).
- Laemmel, E., et al. Fibered confocal fluorescence microscopy (Cell-viZio) facilitates extended imaging in the field of microcirculation. A comparison with intravital microscopy. J Vasc Res. 41 (5), 400-411 (2004).
- Al-Gubory, K. H., Houdebine, L. M. In vivo imaging of green fluorescent protein-expressing cells in transgenic animals using fibred confocal fluorescence microscopy. Eur J Cell Biol. 85 (8), 837-845 (2006).
- Bar-Joseph, H., et al. In vivo bioimaging as a novel strategy to detect doxorubicin-induced damage to gonadal blood vessels. PLoS One. 6 (9), e23492 (2011).
- Kaushal, V., Kaushal, G. P., Mehta, P. Differential toxicity of anthracyclines on cultured endothelial cells. Endothelium. 11 (5-6), 253-258 (2004).
- Kim, E. J., et al. Doxorubicin-induced platelet cytotoxicity: a new contributory factor for doxorubicin-mediated thrombocytopenia. J Thromb Haemost. 7 (7), 1172-1183 (2009).
- Walsh, J., Wheeler, H. R., Geczy, C. L. Modulation of tissue factor on human monocytes by cisplatin and adriamycin. Br J Haematol. 81 (4), 480-488 (1992).
- Kotamraju, S., et al. Doxorubicin-induced apoptosis in endothelial cells and cardiomyocytes is ameliorated by nitrone spin traps and ebselen. Role of reactive oxygen and nitrogen species. J Biol Chem. 275 (43), 33585-33592 (2000).
- Vasquez-Vivar, J., et al. Endothelial nitric oxide synthase-dependent superoxide generation from adriamycin. Biochemie. 36 (38), 11293-11297 (1997).
