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Immunoprécipitation de la chromatine (ChIP) des Modifications d’Histone de Saccharomyces cerevisiae
JoVE Journal
Genetik
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JoVE Journal Genetik
Chromatin Immunoprecipitation (ChIP) of Histone Modifications from Saccharomyces cerevisiae
DOI:

11:06 min

December 29, 2017

, , ,

Kapitel

  • 00:05Titel
  • 00:52In Vivo Crosslinking of Proteins to DNA
  • 02:19Making Yeast Lysates
  • 04:08Immunoprecipitation (IP) of Modified Histones
  • 05:11Washing IPs, Eluting Histone-DNA Complexes and Reversing Protein-DNA Crosslinks
  • 07:24Quantitative PCR (qPCR) to Detect Enriched Genomic Regions
  • 08:46Results: ChIP Reveals Histone Modification Status at ant Genomic Region
  • 10:17Conclusion

Summary

Automatische Übersetzung

Nous décrivons ici un protocole pour l’immunoprécipitation de la chromatine des histones modifiées de la levure Saccharomyces cerevisiae. ADN immunoprécipitée est ensuite utilisé pour la PCR quantitative pour interroger l’abondance et la localisation des modifications post-traductionnelles des histones dans tout le génome.

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