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Imunoprecipitação de Cromatina (ChIP) de Modificações de Histonas de Saccharomyces cerevisiae
JoVE Journal
Genetik
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JoVE Journal Genetik
Chromatin Immunoprecipitation (ChIP) of Histone Modifications from Saccharomyces cerevisiae
DOI:

11:06 min

December 29, 2017

, , ,

Kapitel

  • 00:05Titel
  • 00:52In Vivo Crosslinking of Proteins to DNA
  • 02:19Making Yeast Lysates
  • 04:08Immunoprecipitation (IP) of Modified Histones
  • 05:11Washing IPs, Eluting Histone-DNA Complexes and Reversing Protein-DNA Crosslinks
  • 07:24Quantitative PCR (qPCR) to Detect Enriched Genomic Regions
  • 08:46Results: ChIP Reveals Histone Modification Status at ant Genomic Region
  • 10:17Conclusion

Summary

Automatische Übersetzung

Aqui, descrevemos um protocolo para a imunoprecipitação da cromatina de histonas modificadas de brotamento levedura Saccharomyces cerevisiae. Immunoprecipitated DNA é usado posteriormente para PCR quantitativo para interrogar a abundância e a localização de modificações borne-translational do histone durante todo o genoma.

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