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Optimization, Design and Avoiding Pitfalls in Manual Multiplex Fluorescent Immunohistochemistry

Otimização, design e evitando armadilhas em manual multiplex fluorescente imuno-histoquímica

DOI:
10.3791/59915-v

•

09:15 min

•

July 26, 2019

•

, , , , , , , , , ,
1Department of Surgery,University of Michigan, 2Department of Molecular and Cellular Physiology,University of Michigan, 3Department of Pathology,University of Michigan

Kapitel

  • 00:04Titel
  • 00:55Deparaffinization and Rehydration
  • 02:24Slide Staining
  • 05:05DAPI Application
  • 05:55Imaging of Monoplexes and Multiplex Preparation
  • 07:18Results: Monoplex and Multiplex Optimization
  • 08:39Conclusion

Summary

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Multiplex fluorescente imunoistoquímica é uma tecnologia emergente que permite a visualização de vários tipos de células dentro de formalina intacta-fixo, parafina incorporado (FFPE) tecido. Apresentados são diretrizes para garantir um multiplex de 7 cores bem sucedido com instruções para otimizar anticorpos e reagentes, preparando slides, design e dicas para evitar problemas comuns.

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Keywords: Multiplex Fluorescent ImmunohistochemistryCell IdentificationTumor MicroenvironmentDeparaffinizingRehydratingAntigen RetrievalPrimary AntibodyFluorophoreDAPI

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