Neurocircuit Testen voor epileptische aanvallen mutanten van Drosophila</em
Summary
Met behulp van hoogfrequente elektrische stimulatie, beslag-achtige activiteit kan worden geïnduceerd in<em> Drosophila</em>. Deze activiteit is gemakkelijk opgenomen van de reus vezel systeem.
Abstract
Drosophila melanogaster is een nuttig instrument voor het bestuderen van aanvallen achtige activiteit. Een verscheidenheid van mutanten waarin de epileptische aanvallen kunnen worden opgewekt door middel van zowel fysieke schokken of elektrische stimulatie is beschikbaar voor onderzoek naar verschillende aspecten van epileptische activiteit en gedrag. Alle vliegen, waaronder wild-type, zal ondergaan aanvallen-achtige activiteit indien gestimuleerd op een voldoende hoog voltage. Inbeslagneming achtige activiteit is een alles-of-niets-reactie en elk genotype heeft een specifieke drempel voor epileptische aanvallen. De drempel voor epileptische aanvallen van een bepaald genotype van vliegen kan worden veranderd door een behandeling met een medicijn of door genetische onderdrukking of verbetering. De drempel is gemakkelijk te meten door de elektrofysiologie. Inbeslagneming-achtige activiteit kan worden opgewekt via hoogfrequente elektrische stimulatie rechtstreeks geleverd aan de hersenen en opgenomen via de dorsale longitudinale spieren (DLMS) in de thorax. De DLMS worden geïnnerveerd door een deel van de reus vezel systeem. Te beginnen met lage spanning, hoge frequentie stimulatie, en daarna het verhogen van de spanning in kleine stappen, kan de drempel voor epileptische aanvallen voor een enkele vlieg worden gemeten.
Protocol
Discussion
Deze video heeft aangetoond dat de basisstappen in het bepalen van de drempel voor epileptische aanvallen van een individu Drosophila vliegen. In plaats van het gebruik van de digitale oscilloscoop, kan een computer digitizer ook worden gebruikt. Deze techniek is handig voor het bepalen van de effecten van een geneesmiddel of genetische verandering op de drempel voor epileptische aanvallen van een vlieg.
Acknowledgements
Dit werk werd ondersteund door een NIH onderzoek te verlenen, een Epilepsy Foundation subsidie en een McKnight Foundation te verlenen aan MT Experimenten op Drosophila fruitvliegjes werden uitgevoerd in overeenstemming met de richtlijnen en voorschriften uiteengezet door de UC Berkeley dierproeven comite.
Materials
| Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Digital oscilloscope | Hitachi | VC-6523 | ||
| Stimulator | Cornerstone | S-900 | ||
| Preamplifier | World Precision Instruments | Electro 705 | ||
| Micromanipulators | Narishige | various |
Referencias
- Kuebler, D., Tanouye, M. A. Modifications of seizure susceptibility in Drosophila. J Neurophysiol. 83, 998-1009 (2000).
- Kuebler, D., Zhang, H., Ren, X., Tanouye, M. A. Genetic suppression of seizure susceptibility in Drosophila. J Neurophysiol. 86, 1211-1225 (2001).
- Song, J., Tanouye, M. A. Seizure suppression by shakB2, a gap junction mutation in Drosophila. J Neurophysiol. 95, 627-635 (2006).
