Summary

, Epilepsi Mutants Nöbetler Neurocircuit Tahliller Drosophila</em

Published: April 15, 2009
doi:

Summary

Yüksek frekanslı elektrik stimülasyonu, nöbet benzeri aktivite kullanma uyarılabilir<em> Drosophila</em>. Bu etkinlik kolayca dev fiber sistemi kaydedilir.

Abstract

Drosophila melanogaster aktivite gibi nöbet çalışmak için yararlı bir araçtır. Nöbetler ya fiziksel şok ya da elektrik stimülasyonu ile indüklenen olabilir mutantlar çeşitli nöbet aktivite ve davranış çeşitli yönleriyle çalışma için kullanılabilir. Eğer yeterince yüksek bir voltaj uyarılmış yabani tip dahil olmak üzere tüm sinekler, nöbet benzeri aktivite uğrayacaktır. Nöbet aktivitesi gibi bir ya hep ya hiç yanıt ve her genotip belirli bir nöbet eşiğini vardır. Sinek belirli bir genotip nöbet eşiğini bir ilaç tedavisi ya da genetik baskılanması ya da donanım tarafından değiştirilebilir. Eşiği kolayca elektrofizyoloji ile ölçülür. Gibi nöbet aktivite-beyne doğrudan teslim ve toraks dorsal longitudinal kasları (DLMS) aracılığıyla kaydedilen yüksek frekanslı elektrik stimülasyonu ile indüklenen olabilir. DLMS dev fiber sistemi tarafından innerve. Düşük voltajlı, yüksek frekanslı stimülasyon ile başlayan ve daha sonra küçük artışlarla gerilimi yükselterek, bir sinek için nöbet eşiğini ölçülebilir.

Protocol

Numune Hazırlama: Deneyden önce gece, istenilen genotip erkek sineklerin, anestezisiz ve yumuşak bir naylon fiş ile bir şişe yerleştirilir. Bir pamuk da çalışmaya devam eder. Anesthetization ardından, nöbet eşiğini değişir, gece ideal olsa da üzerinde, sineklerin en iyi, en az 6 saat süreyle bırakılır. Deney günü, sinekler, bir tarafta diş balmumu tabakası ile cam slaytlara bir defada bir monte edilir. Tek bir s…

Discussion

Bu video, bireysel bir Drosophila sineği nöbet eşiğini belirleyen temel adımları ortaya koymuştur . Dijital osiloskop kullanarak yerine, bilgisayarlı sayısallaştırıcı de kullanılıyor olabilir. Bu teknik, bir sineğin nöbet eşiğini bir ilaç ya da genetik değişiklik etkilerini belirlemek için yararlıdır.

Acknowledgements

Bu çalışma, bir araştırma NIH hibe, Epilepsi Vakfı'nın hibe ve McKnight Vakfı Hibe UC Berkeley Hayvan Kullanım Komitesi tarafından belirlenen kurallara ve yönetmeliklere uygun olarak MT Drosophila meyve sinekleri üzerindeki deneyler yapıldı tarafından desteklenmiştir.

Materials

Material Name Tipo Company Catalogue Number Comment
Digital oscilloscope   Hitachi VC-6523  
Stimulator   Cornerstone S-900  
Preamplifier   World Precision Instruments Electro 705  
Micromanipulators   Narishige various  

Referencias

  1. Kuebler, D., Tanouye, M. A. Modifications of seizure susceptibility in Drosophila. J Neurophysiol. 83, 998-1009 (2000).
  2. Kuebler, D., Zhang, H., Ren, X., Tanouye, M. A. Genetic suppression of seizure susceptibility in Drosophila. J Neurophysiol. 86, 1211-1225 (2001).
  3. Song, J., Tanouye, M. A. Seizure suppression by shakB2, a gap junction mutation in Drosophila. J Neurophysiol. 95, 627-635 (2006).
check_url/es/1121?article_type=t

Play Video

Citar este artículo
Howlett, I. C., Tanouye, M. A. Neurocircuit Assays for Seizures in Epilepsy Mutants of Drosophila. J. Vis. Exp. (26), e1121, doi:10.3791/1121 (2009).

View Video