Агар-Block Микрокосмы для управляемого разложения тканей завод по Аэробные Грибы
Summary
Это видео демонстрирует контролируемый подход среду для изучения деградации лигноцеллюлозных тканях растения аэробных грибов. Возможность контролировать источники питательных веществ и влаги является ключевым преимуществом агар-блок микрокосм, но подход часто приводит к переменным успехом. Мы обращаемся критических ошибок, чтобы выход воспроизводимых с низким уровнем изменчивости результатов.
Abstract
Два основных метода для изучения грибковых биодеградации лигноцеллюлозных растительных тканей были разработаны для консерванта древесины тестирования (почвенно-блок; агар-блока). Хорошо принято считать, что почвенно-блок микрокосмы дают более высокие скорости распада, меньше проблем влаги, снижение изменчивости в различных исследованиях, и выше порогов консервант токсичности. Почвенно-блок тестирования, таким образом, больше использовали технику и был стандартизован Американского общества по испытанию материалов (ASTM) (метод D 1413-07). Почвенно-блочная конструкция имеет свои недостатки, однако, использование местных источников переменного почве и в ограничении контроля питательных веществ внешние (экзогенные), чтобы распадающихся тканей. Эти недостатки возникли как проблемы в применении этого метода к другим, более популярным цели исследования. Эти современные цели включают унижающие lignocellulosics для производства биоэнергии исследований, испытаний биоремедиации совместно метаболизируется токсичных веществ, оценки окислительных механизмов, а также отслеживания транслоцируется элементов вдоль гиф сетей. Почва-блоки не поддаются достаточно контроля в этих приложениях. Изысканный агар-блок подход.
Здесь мы используем бурая гниль древесины, разрушающих грибов Serpula lacrymans деградировать древесины в агар-блок микрокосм, используя глубокие чашки Петри с низким содержанием кальция агара. Мы проверяем роли экзогенных гипса на распад временных рядов, чтобы продемонстрировать полезность и ожидалось изменчивости. Блоки из одной печатной плате рип (продольный разрез) обусловлены, взвешивают, в автоклаве, и представил асептически поверх пластиковой сетки. Грибковые прививки в каждом блоке лицо, с экзогенными гипса добавляют в интерфейсах. Урожаи асептических до последнего разрушительного урожая. Эти микрокосмы предназначены, чтобы избежать контакта с блоком агар или стены чашку Петри. Конденсация сводится к минимуму в течение пластины льет и во время инкубации. Наконец, посевной / гипс / дерево расстояния сводится к минимуму, но не допуская контакта. Эти менее технические аспекты агар-блочной конструкции также являются наиболее распространенными причинами выхода из строя и основной источник изменчивости в различных исследованиях. Видео публикации Поэтому полезно в этом случае, и мы демонстрируем низкой изменчивости, высококачественные результаты.
Protocol
Discussion
Используя наши агар-блок настройки (рис. 1) Serpula lacrymans вырос в прямом контакте с гипсовой поверхности и в деревянных блоков (рис. 2), что приводит к более чем 60% потери веса в контрольной коричнево-сгнили блоков сосны (рис. 3 ). Это легко удовлетворяет цели ASTM стандарт> 50% распада, а средн?…
Divulgaciones
The authors have nothing to disclose.
Materials
| Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Petri dishes | Nunc | 4014 | 25 x 150 mm | |
| Agar, Type A | Sigma | A4550 | ||
| Ammonium nitrate, NH4NO3 | Millinckrodt | 3436-12 | ||
| Potassium phosphate, KH2PO4 | J.T. Baker | 3246-01 | ||
| Magnesium sulfate 7-hydrate, MgSO4•7H2O | Sigma | 230391 | ||
| D-(+)-Glucose | Sigma | G8270 | Dextrose | |
| Boric acid, H3BO4 | Mallinckrodt | 2549-04 | ||
| Zinc sulfate 7-hydrate, ZnSO4•7H2O | Mallinckrodt | 8880-12 | ||
| Manganous chloride 4-hydrate, MnCl2•4H2O | J.T. Baker | 2540-04 | ||
| Copper(II) sulfate 5-hydrate, CuSO4•5H2O | Sigma | 209198 | ||
| Ammonium heptamolybdate 4-hydrate, (NH4)6Mo7O24•4H2O | Sigma-Aldrich | 431346 | ||
| Calcium chloride dihydrate, CaCl2•2H2O | Mallinckrodt | 4160-12 | ||
| Sodium chloride, NaCl | Mallinckrodt | 7581-12 | ||
| Ferrous sulfate 7-hydrate, FeSO4•7H2O | Mallinckrodt | 5056-12 | ||
| Pipet-aid | Drummond | 4-000-110 | Cordless EtOH the surface |
|
| 10 ml sterile polystyrene pipette | BD Biosciences | 357551 | ||
| Gutter Guard | Thermwell Products Co. | VX620 | Pre-scrubbed with soap Hardware store |
|
| Calcium sulfate hemihydrate, CaSO4•0.5H2O | Acros Organics | 385355000 | ||
| #4 cork borer | Boekel | 1601 | ||
| Parafilm “M” | Pechiney | PM-996 |
Referencias
- ASTM D1413-07. Standard test method for testing wood preservatives by laboratory soil-block cultures. . Annual Book of ASTM Standards. , 185-192 (2007).
- Bravery, A. F. . A miniaturized wood block for the rapid evaluation of wood preservative fungicides. , (1978).
- Low, G. A., Young, M. E., Martin, P., Palfreyman, J. W. Assessing the relationship between the dry rot fungus Serpula lacrymans and selected forms of masonry. Int. Biodeterior. Biodegrad. 46, 141-150 (2000).
- Nicolas, D. Volume I (One/1) – Degradation and Protection of Wood (Syracuse Wood Science Series #5). Wood Deterioration and Its Prevention by Preservative Treatments. , (1973).
- Schilling, J. S. Effects of calcium-based materials and iron impurities on wood degradation by the brown rot fungus Serpula lacrymans. Holzforschung. 64, 93-99 (2010).
