Poliovirus 식별을위한 입자 응집 방법
Summary
바이러스 수용체 분자를 이용한 최근에 개발된 새로운 입자 응집 (PA) 분석은 poliovirus (PV)의 신속하고 쉬운 식별을 허용했다. 이 문서에서는, 우리는 PV 식별을 위해 PA 분석을위한 절차를 표시합니다.
Abstract
세계 소아 마비 박멸 이니셔티브에서 실험실 진단 급성 이완된 마비 (AFP) 가지 경우 대변 샘플에서 PV를 분리하고 식별하여 중요한 역할을한다. 세계 보건기구 (WHO)의 글로벌 소아 마비 실험실 네트워크, PV 고립과 신원은 현재 각각 세포 배양 시스템 및 실시간 RT – PCR을 사용하여 수행되고있다. PV의 포스트 박멸의 시대에, 간단하고 신속한 식별 절차는 국가 실험실에서 소아 마비 가지 경우 신속한 확인 도움이 될 것입니다. 현재 연구에서 우리는 PV 식별용으로 개발된 새로운 PA 분석의 절차를 표시합니다. 이 PA의 분석은 PV 수용체 (PVR) 분자와 PV의 모든 serotypes에 구체적이고 균일 친화력이다 virion의 상호 작용을 활용합니다. 절차는 간단합니다 (반응 판에 한 단계 절차)와 빠른 (결과는 반응 2 H 내에서 얻을 수있다), 그리고 그 결과는 시각 (젤라틴 입자 응집의 관찰) 관찰합니다.
Protocol
Discussion
이 PA의 분석의 독특한 점은 PV 2의 검출을위한 안티 – PV 항체 대신 PVR 분자의 활용이다. 이것은 PV 3-6의 세 serotypes에 균일 친화력과 PV와 sensitized 젤라틴 입자의 구체적인 상호 작용을 허용합니다. PVR의 monomeric 형태 virion에서 단일 바인딩 사이트에만 중간 동질성 (~ -8 M 10 -7의 해리 상수) 7을 가지고 있기 때문에 우리는, 젤라틴 입자의 sensitization에 대한 PVR의 i…
Divulgaciones
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
우리는 그녀의 뛰어난 기술 지원을 준코 와다에게 감사하고 있습니다. 우리는 친절 PVR – IgG2a위한 baculovirus 발현 벡터를 제공하는 교수 아키오 노모토에게 감사하고 있습니다. 이 연구에 의해 부분적으로 지원되었다 기금 – – 에이드의 소아 마비 박멸의 추진 및 후생 노동 장관의 전염병을 신흥 다시 새로운 연구하십시오.
Materials
| Name of the reagent | Company | Catalogue number | Comments |
|---|---|---|---|
| Sensitized-gelatin particles | Fujirebio Inc. | Test kit | |
| Reconstitution buffer | Fujirebio Inc. | Test kit | |
| Microtitration plate | Fujirebio Inc. | Test kit | |
| Anti-PV antibody | RIVM |
Referencias
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