Summary

פלורסנט מיקרוסקופית עצמים ללא עדשה על שבב

Published: August 17, 2011
doi:

Summary

פלטפורמה עצמים ללא עדשה מיקרוסקופ על שבב ניאון הוא הוכיח כי אובייקטים בתמונה ניאון מעל אולטרה רחב בתחום לצפות-של של למשל יכול,> 0.6-8 CM2 עם רזולוציה 4μm <באמצעות דגימה דחיסה מבוסס אלגוריתם פענוח. כאלה לערוץ קומפקטי רחב בתחום ניאון על שבב הדמיה יכול להיות בעל ערך עבור cytometry תפוקה גבוהה, נדיר תאים מחקר microarray ניתוח.

Abstract

על שבב הדמיה עצמים ללא עדשה בכלל שואפת להחליף עדשה מגושם מבוססי מיקרוסקופים אופטיים עם עיצובים קומפקטית פשוטה יותר, במיוחד עבור תפוקה גבוהה יישומים ההקרנה. זו פלטפורמה טכנולוגית המתעוררים יש פוטנציאל לבטל את הצורך רכיבים אופטיים מגושם ו / או יקר בסיועו של תיאוריות רומן ואלגוריתמים שחזור דיגיטלי. לאורך אותם קווים, כאן אנחנו מדגימים מודליות על שבב במיקרוסקופ פלואורסצנטי שניתן להשיג למשל, <4μm ברזולוציה מרחבית על אולטרה רחב בתחום של נוף (FOV) של> 0.6-8 ס"מ 2 ללא שימוש בעדשות כל , מכני או סריקת סרט דק מסננים הפרעות מבוסס. בטכניקה זו, עירור פלורסנט מושגת באמצעות ממשק פריזמה או חצי כדור זכוכית מואר על ידי מקור מבולבל. לאחר אינטראקציה עם נפח את האובייקט כולו, לאור זאת נדחית על ידי עירור השתקפות מוחלטת, פנימית (TIR) ​​תהליך זה מתרחש בחלק התחתון של השבב מדגם מיקרו fluidic. פליטת פלורסנט מן האובייקטים נרגש נאסף מכן על ידי לוחית סיבים אופטיים או להתחדד והוא מועבר מערך חיישן אופטו כגון מכשיר תשלום מצמידים (CCD). באמצעות דגימה דחיסה מבוסס אלגוריתם פענוח, רכשה את התמונות lensfree פלורסנט הגלם של המדגם יכול להיות מעובד במהירות כדי להניב למשל, <4μm ברזולוציה מעל FOV של> 0.6-8 ס"מ 2. יתר על כן, מוערמים אנכית ערוצים מיקרו כי מופרדות למשל, 5-10 מיקרומטר יכול להיות גם צילמו בהצלחה באמצעות lensfree אותו על שבב פלטפורמת מיקרוסקופית, אשר מגביר את התפוקה הכוללת של שיטת זו. זו פלטפורמה קומפקטית על שבב דימות פלואורסצנטי, עם מפענח דחיסה מהירה מאחורי זה, יכול להיות יקר למדי cytometry תפוקה גבוהה, נדיר תאים מחקר microarray ניתוח.

Protocol

בחלק זה נסקור את שיטות ניסיוניות של פלטפורמת עצמים ללא עדשה על השבב שלנו במיקרוסקופ פלואורסצנטי 1-4. כדי להדגים את היכולות של טכניקה זו, אנו נראה על שבב תוצאות ההדמיה עבור מיקרו חלקיקים פלורסנט שכותרתו כדוריות הדם הלבנות. אמנם לא דנו כאן, פלטפורמת מיקרוסקופיה או?…

Discussion

הפגנו פלטפורמה על שבב במיקרוסקופ פלואורסצנטי שניתן להשיג למשל, <4μm ברזולוציה מרחבית מעל למשל> 0.6-8 ס"מ 2 בתחום של נוף ללא שימוש עדשות, סריקה מכני או סרט דק הפרעה מסננים. בטכניקה זו, עם השימוש לוחית סיבים אופטיים או להתחדד, פליטת פלורסנט מעצמים נאסף עם מערך-2D ש?…

Divulgaciones

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

א Ozcan בתודה מכיר את התמיכה של פרס קריירה NSF, בפרס החוקר הצעיר ONR 2009 ואת פרס ממציא ניו המנהל של NIH DP2OD006427 מהמשרד של המנהל, NIH. המחברים גם להכיר את התמיכה של ביל ומלינדה גייטס, קרן אמריקה וודאפון ו-NSF התוכנית שהבישוף (תחת פרסים # 0754880 ו 0930501).

Materials

Material Name Company Catalogue number
Charge-coupled device(CCD) KODAK KAF-8300
Charge-coupled device(CCD) KODAK KAF-11002
Charge-coupled device(CCD) KODAK KAF-39000
Complementary Metal-Oxide-Semiconductor (CMOS) Micron MT9T031C12STCD
High power LED light source Thorlabs M455L2-C2
High power LED driver Thorlabs LEDD1B
Fiber coupled LED light source Mightex FCS-0625-000
Vacuum Pen Edmund Optics NT57-636
2, 4, 10 μm Fluospheres Invitrogen F-8826, F-8859, F-8836
RBS lysis buffer 1X eBioscience 00-4333
SYTO 16 labeling reagent Invitrogen S7578
Fiber-optic faceplate Edmund Optics NT55-142
Fiber-optic taper Edmund Optics NT55-134
Prisms Edmund Optics NT47-626, NT45-403
Filters Edmund Optics NT39-417
PDMS Elastomers Dow Corning Slygard 184

Referencias

  1. Coskun, A. F., Su, T., Ozcan, A. Wide field-of-view lens-free fluorescent imaging on a chip. Lab Chip. 10, 824-824 (2010).
  2. Coskun, A. F., Sencan, I., Su, T., Ozcan, A. Lensless wide-field fluorescent imaging on a chip using compressive decoding of sparse objects. Opt. Express. 18, 10510-10523 (2010).
  3. Coskun, A. F., Sencan, I., Su, T., Ozcan, A. Lensfree Fluorescent On-Chip Imaging of Transgenic Caenorhabditis elegans Over an Ultra-Wide Field-of-View. PLoS ONE. 6, e15955-e15955 (2011).
  4. Coskun, A. F., Sencan, I., Su, T., Ozcan, A. Wide-field lensless fluorescent microscopy using a tapered fiber-optic faceplate on a chip. Analyst. , (2011).
  5. Seo, S. High-Throughput Lens-Free Blood Analysis on a Chip. Analytical Chemistry. 82, 4621-4627 (2010).
  6. Mudanyali, O. Compact, light-weight and cost-effective microscope based on lensless incoherent holography for telemedicine applications. Lab Chip. 10, 1417-1417 (2010).
  7. Tseng, D. Lensfree microscopy on a cellphone. Lab Chip. 10, 1787-1787 (2010).
  8. Lucy, L. B. An iterative technique for the rectification of observed distributions. The Astronomical Journal. 79, 745-745 (1974).
  9. Richardson, W. H. Bayesian-Based Iterative Method of Image Restoration. J. Opt. Soc. Am. 62, 55-59 (1972).
  10. Biggs, D. S. C., Andrews, M. Acceleration of iterative image restoration algorithms. Appl. Opt. 36, 1766-1775 (1997).
  11. Candes, E., Wakin, M. An Introduction To Compressive Sampling. Signal Processing Magazine, IEEE. 25, 21-30 (2008).
  12. Kim, S., Koh, K., Lustig, M., Boyd, S., Gorinevsky, D. An Interior-Point Method for Large-Scale L1-Regularized Least Squares. Selected Topics in Signal Processing, IEEE. 1, 606-617 (2007).
  13. Candes, E. The restricted isometry property and its implications for compressed sensing. Comptes Rendus Mathematique. 346, 589-592 (2008).
  14. Baraniuk, R. Compressive Sensing [Lecture Notes]. Signal Processing Magazine, IEEE. 24, 118-121 (2007).
  15. Romberg, J. Imaging via Compressive Sampling. Signal Processing Magazine, IEEE. 25, 14-20 (2008).
check_url/es/3181?article_type=t

Play Video

Citar este artículo
Coskun, A. F., Su, T., Sencan, I., Ozcan, A. Lensless Fluorescent Microscopy on a Chip. J. Vis. Exp. (54), e3181, doi:10.3791/3181 (2011).

View Video