Summary

Senza lenti microscopia a fluorescenza su un chip

Published: August 17, 2011
doi:

Summary

Un senza lenti on-chip piattaforma microscopia a fluorescenza è dimostrato in grado di oggetti immagini fluorescenti su un ultra-ampio campo di vista di esempio,> 0,6-8 cm2 con <4 _m risoluzione utilizzando un campionamento di compressione basata algoritmo di decodifica. Tale compattezza e grande campo fluorescente on-chip modalità di imaging potrebbe essere prezioso per high-throughput citometria, rare cellule di ricerca e di analisi dei microarray.

Abstract

On-chip di imaging senza lenti, in generale, mira a sostituire ingombranti microscopi ottici con lenti a base di più semplice e più compatto design, soprattutto per le applicazioni high-throughput screening. Questa piattaforma tecnologia emergente ha il potenziale per eliminare la necessità di componenti ottici ingombranti e / o costose attraverso l'aiuto di nuove teorie e gli algoritmi di ricostruzione digitale. Sulla stessa linea, qui si dimostrano una modalità on-chip microscopia a fluorescenza che può raggiungere ad esempio, <4 _m risoluzione spaziale su un ultra-ampio campo di vista (FOV) di> 0,6-8 cm 2 senza l'uso di lenti , meccanico-scansione o film sottile basati filtri interferenziali. In questa tecnica, eccitazione fluorescente è raggiunto attraverso una interfaccia prisma o emisferica di vetro illuminato da una sorgente incoerente. Dopo aver interagito con il volume intero oggetto, questa luce di eccitazione è respinta da total-interno-riflessione (TIR), processo che si sta verificando nella parte inferiore del chip campione di micro-fluidico. L'emissione di fluorescenza dagli oggetti eccitato è poi raccolto da una fibra ottica frontalino o una candela e viene consegnato a una matrice di sensori optoelettronici come un accoppiamento di carica-device (CCD). Utilizzando un algoritmo di compressione-campionamento basato decodifica, l'acquisito lensfree prime immagini fluorescenti del campione può essere rapidamente trattati per produrre ad esempio, <4 _m risoluzione su un campo visivo di> 0,6-8 cm 2. Inoltre, impilati verticalmente micro-canali separati da esempio, 50-100 micron può essere ripreso con successo utilizzando le stesse lensfree on-chip piattaforma microscopia, che aumenta ulteriormente il throughput complessivo di questa modalità. Questa compatta on-chip piattaforma di imaging fluorescente, con un decoder rapida compressione dietro di esso, potrebbe essere piuttosto utile per high-throughput citometria, rare cellule di ricerca e di analisi dei microarray.

Protocol

In questa sezione passeremo in rassegna i metodi sperimentali della nostra senza lenti on-chip piattaforma di microscopia a fluorescenza 1-4. Per dimostrare le capacità di questa tecnica, ci mostrerà i risultati on-chip di imaging per le micro-particelle fluorescenti ed etichettato globuli bianchi. Anche se non discusso qui, la stessa piattaforma lensfree microscopia a fluorescenza può essere utilizzato anche per gli animali modello immagine di piccole dimensioni come transgenici C. campioni e…

Discussion

Abbiamo dimostrato una piattaforma on-chip microscopia a fluorescenza che può raggiungere ad esempio, <4 _m risoluzione spaziale oltre ad esempio,> 0,6-8 cm 2 di campo di vista, senza l'uso di lenti, meccanico-scansione o film sottile interferenze filtri. In questa tecnica, con l'utilizzo di una fibra ottica frontalino o un cono, l'emissione fluorescente dagli oggetti viene raccolta con un 2D-array di cavi in ​​fibra ottica prima di essere consegnato ad un sensore opto-elettronico-array…

Divulgaciones

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

A. Ozcan riconosce con gratitudine il sostegno del Premio CARRIERA NSF, l'Investigatore ONR Premio Giovani 2009 e Innovator Award nuovo direttore NIH DP2OD006427 presso l'Ufficio del Direttore, NIH. Gli autori riconoscono anche il sostegno della Bill & Melinda Gates Foundation, Fondazione Vodafone Americhe, e NSF programma Bish (sotto Awards # 0754880 e 0930501).

Materials

Material Name Company Catalogue number
Charge-coupled device(CCD) KODAK KAF-8300
Charge-coupled device(CCD) KODAK KAF-11002
Charge-coupled device(CCD) KODAK KAF-39000
Complementary Metal-Oxide-Semiconductor (CMOS) Micron MT9T031C12STCD
High power LED light source Thorlabs M455L2-C2
High power LED driver Thorlabs LEDD1B
Fiber coupled LED light source Mightex FCS-0625-000
Vacuum Pen Edmund Optics NT57-636
2, 4, 10 μm Fluospheres Invitrogen F-8826, F-8859, F-8836
RBS lysis buffer 1X eBioscience 00-4333
SYTO 16 labeling reagent Invitrogen S7578
Fiber-optic faceplate Edmund Optics NT55-142
Fiber-optic taper Edmund Optics NT55-134
Prisms Edmund Optics NT47-626, NT45-403
Filters Edmund Optics NT39-417
PDMS Elastomers Dow Corning Slygard 184

Referencias

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Citar este artículo
Coskun, A. F., Su, T., Sencan, I., Ozcan, A. Lensless Fluorescent Microscopy on a Chip. J. Vis. Exp. (54), e3181, doi:10.3791/3181 (2011).

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