Summary

Human Interne borstslagader (IMA) Transplantatie en stenting: een humaan model aan de ontwikkeling van in-stent restenose Studie

Published: May 09, 2012
doi:

Summary

Deze video toont een model om de ontwikkeling van intima hyperplasie studeren na stent met behulp van een menselijk vat (IMA) in een immunodeficiënte rat model.

Abstract

Gegevens uit het preklinisch in vivo onderzoek modellen om pathobiological en pathofysiologische processen te onderzoeken in de ontwikkeling van intima hyperplasie na schip stenting zijn cruciaal voor translationele benadering 1,2.

De meest gebruikte diermodellen zijn muizen, ratten, konijnen en varkens 3-5. Echter, de vertaling van deze modellen in de klinische omgeving blijft het moeilijk, omdat die biologische processen zijn reeds bestudeerd in dier schepen, maar niet eerder in de menselijke onderzoeksmodellen 6,7. In deze video demonstreren we een nieuw gehumaniseerd model om dit translationele kloof te overwinnen. De getoonde werkwijze is reproduceerbaar, gemakkelijk en snel uit te voeren en is geschikt voor de ontwikkeling van intimale hyperplasie en de toepasbaarheid van diverse stents bestuderen.

Deze video laat zien hoe u de stent techniek in menselijke voertuigen, gevolgd door transplantatie in immunodeficiënte ratten enidentificeert de oorsprong van prolifererende cellen mens.

Protocol

1. Interne borstslagader (IMA) Voorbereiding De arteriële endotheel wordt kaal door de passage van een 2-franse Fogarty arteriële embolectomie katheter (Baxter Healthcare, Deerfield, IL, USA). De katheter wordt getrokken door het gehele schip lengte twee keer op endotheliale schade te verzekeren. Gebruik een menselijke stent van 8 mm lang en 2,5 mm-3 mm in diameter (bijv. Translumina, Yukon stent). Let: De diameter van de stent de bloedvaten met niet meer dan 10% vóór en na stent stenose voorkom…

Discussion

Hoewel verschillende in-vivo-onderzoek modellen zijn de bestaande aan de ontwikkeling van intima hyperplasie te onderzoeken na het plaatsen van een stent, deze modellen nog steeds geconfronteerd met translationeel hindernissen te overwinnen. Bovendien, grote diermodellen zijn duur en speciale huisvesting en medische apparatuur is niet beschikbaar voor alle laboratoria.

Een menselijke IMA de ontwikkeling van intimale menselijke proliferatie en in-stent restenose bestudeerd voor e…

Divulgaciones

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

De auteurs bedanken Christiane Pahrmann voor haar bijdrage. Met dank aan Ethicon, Norderstedt, Hamburg (Duitsland) voor het verstrekken van hechtmateriaal.

Financiering

Sonja Schrepfer heeft een onderzoeksbeurs van de Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG) (SCHR992 / 3 1 en SCHR992/4-1).] Het werk werd ondersteund door de ISHLT Shumway Career Development Grant 2010 en de Falk Onderzoek Financiering (Stanford University).

Materials

Name of the reagent Company Catalog number Comments
2 French Fogarty catheter Baxter Healthcare, Deerfield, IL, USA 120602F  
Yukon Stent Translumina GmbH, Hechingen, Germany   Use the stent of your choice according to your study protocol
RPMI media Biochrom Nr.F1275  
heparin Baxter 2B0953  
isoflurane Abbot B506  
Provo-Iodine Betadine Puredue Pharma EAN:5995327165830  
80% ethanol Geyer ETV 80/0500  
Micro clamp Harvard Apparatus PY2-61-0186  
Sutures 8-0 Johnson& Johnson, 2808G  
Sutures 6-0 Johnson& Johnson, 1698 H  
Carprofen Feizer Vet PZN:0110208  
Metamizol Ratiopharm    
Target retrieval solution, pH9 Dako S2368  
Image-iT FX signal enhancer Invitrogen I36933  
mouse monoclonal anti-GFP antibody BD living colors 632381  
primary antibody diluent Dako S3022  
goat-anti-mouse IgG, Alexa Fluor 488 Invitrogen A11017  
secondary antibody diluent Dako S0809  
rabbit polycolonal anti-smooth muscle α-actin Abcam, ab5694  
goat-anti-rabbit IgG, Alexa Fluor 555 Invitrogen A21430  
Prolong Gold antifade reagent Invitrogen P36930  

Referencias

  1. Deuse, T., Ikeno, F., Robbins, R. C., Schrepfer, S. Imaging In-Stent Restenosis: An Inexpensive, Reliable, and Rapid Preclinical Model. J. Vis. Exp. (31), e1346 (2009).
  2. Oyamada, S. Trans-iliac rat aorta stenting: a novel high throughput preclinical stent model for restenosis and thrombosis. J. Surg. Res. 166, e91-e95 (2011).
  3. Chamberlain, J. A novel mouse model of in situ stenting. Cardiovascular research. 85, 38-44 (2010).
  4. Deuse, T. Introducing the first polymer-free leflunomide eluting stent. Atherosclerosis. 200, 126-134 (2008).
  5. Finn, A. V. Differential healing after sirolimus, paclitaxel, and bare metal stent placement in combination with peroxisome proliferator-activator receptor gamma agonists: requirement for mTOR/Akt2 in PPARgamma activation. Circulation research. 105, 1003-1012 (2009).
  6. Tellez, A. Coronary bare metal stent implantation in homozygous LDL receptor deficient swine induces a neointimal formation pattern similar to humans. Atherosclerosis. 213, 518-524 (2010).
  7. Suzuki, Y., Yeung, A. C., Ikeno, F. The pre-clinical animal model in the translational research of interventional cardiology. JACC Cardiovasc. Interv. 2, 373-383 (2009).
  8. Holt, C. M. Intimal proliferation in an organ culture of human internal mammary artery. Cardiovascular research. 26, 1189-1194 (1992).
  9. Swanson, N., Javed, Q., Hogrefe, K., Gershlick, A. Human internal mammary artery organ culture model of coronary stenting: a novel investigation of smooth muscle cell response to drug-eluting stents. Clin. Sci. (Lond). 103, 347-353 (2002).

Play Video

Citar este artículo
Hua, X., Deuse, T., Michelakis, E. D., Haromy, A., Tsao, P. S., Maegdefessel, L., Erben, R. G., Bergow, C., Behnisch, B. B., Reichenspurner, H., Robbins, R. C., Schrepfer, S. Human Internal Mammary Artery (IMA) Transplantation and Stenting: A Human Model to Study the Development of In-Stent Restenosis. J. Vis. Exp. (63), e3663, doi:10.3791/3663 (2012).

View Video