Humanos da artéria mamária interna (IMA) Transplante e implante de stent: um modelo humano para estudar o desenvolvimento de reestenose intra-stent

Summary

Este vídeo mostra um modelo para estudar o desenvolvimento da hiperplasia intimal após a implantação stent utilizando um recipiente humano (IMA) em um modelo murino imunodeficientes.

Abstract

Estudos pré-clínicos em modelos de pesquisa in vivo para investigar os processos Pathobiological e fisiopatológico no desenvolvimento de hiperplasia da íntima após stent navio são cruciais para ^1,2 abordagens translacional.

Os modelos animais usados ​​incluem ratinhos, ratos, coelhos, e porcos ^3-5. No entanto, a tradução desses modelos em ambientes clínicos continua a ser difícil, uma vez que esses processos biológicos já estudados em vasos de animais, mas nunca realizada antes em modelos de pesquisa humanos ^6,7. Neste vídeo mostramos um novo modelo humanizado de colmatar esta lacuna de translação. O procedimento apresentado é reprodutível, fácil e rápido para executar e é adequado para estudar o desenvolvimento da hiperplasia intimal ea aplicabilidade dos stents diversas.

Este vídeo mostra como executar a técnica de stent em vasos humanos seguidos por transplantes em ratos imunodeficientes, eidentifica a origem das células em proliferação como humana.

Protocol

1. Artéria mamária interna Preparação (IMA) O endotélio arterial é desnudada pela passagem de uma 2-francês cateter de embolectomia Fogarty arterial (Baxter Healthcare, Deerfield, IL, EUA). O cateter é puxado através de todo o comprimento do vaso duas vezes para garantir o dano endotelial. Use qualquer stent humana de comprimento de 8 mm e 2,5 milímetros-3 milímetros de diâmetro (por exemplo, Translumina, Yukon stent). CUIDADO: O diâmetro do stent não deve exceder o diâmetro do vaso p…

Discussion

Embora diferentes em modelos de pesquisa in vivo são existentes para investigar o desenvolvimento da hiperplasia intimal após a colocação do stent, estes modelos ainda enfrentam obstáculos de translação de superar. Além disso, os modelos animais de grande porte são as condições de habitação caros e especiais, bem como equipamento cirúrgico não está disponível para todos os laboratórios.

Usando um IMA humano para estudar o desenvolvimento da prolif…

Materials

Name of the reagent	Company	Catalog number	Comments
2 French Fogarty catheter	Baxter Healthcare, Deerfield, IL, USA	120602F
Yukon Stent	Translumina GmbH, Hechingen, Germany		Use the stent of your choice according to your study protocol
RPMI media	Biochrom	Nr.F1275
heparin	Baxter	2B0953
isoflurane	Abbot	B506
Provo-Iodine	Betadine Puredue Pharma	EAN:5995327165830
80% ethanol	Geyer	ETV 80/0500
Micro clamp	Harvard Apparatus	PY2-61-0186
Sutures 8-0	Johnson& Johnson,	2808G
Sutures 6-0	Johnson& Johnson,	1698 H
Carprofen	Feizer Vet	PZN:0110208
Metamizol	Ratiopharm
Target retrieval solution, pH9	Dako	S2368
Image-iT FX signal enhancer	Invitrogen	I36933
mouse monoclonal anti-GFP antibody	BD living colors	632381
primary antibody diluent	Dako	S3022
goat-anti-mouse IgG, Alexa Fluor 488	Invitrogen	A11017
secondary antibody diluent	Dako	S0809
rabbit polycolonal anti-smooth muscle α-actin	Abcam,	ab5694
goat-anti-rabbit IgG, Alexa Fluor 555	Invitrogen	A21430
Prolong Gold antifade reagent	Invitrogen	P36930