تقييم وظيفة الأوعية الدموية في المرضى الذين يعانون من مرض الكلى المزمن

Summary

درجة ضعف الأوعية الدموية والمساهمة الآليات الفسيولوجية يمكن تقييمها في المرضى الذين يعانون من مرض الكلى المزمن عن طريق قياس العضدية الشريان تدفق بوساطة تمدد، الأبهر نبض سرعة الموجة، والأوعية الدموية البطانية التعبير بروتين الخلية.

Abstract

المرضى الذين يعانون من مرض مزمن في الكلى (كد) قد زادت بشكل ملحوظ خطر الإصابة بأمراض القلب والأوعية الدموية بالمقارنة مع السكان عامة، ويفسر هذا جزئيا فقط عن عوامل خطر الأمراض القلبية الوعائية التقليدية. ضعف الأوعية الدموية هو عامل خطر غير التقليدية الهامة، والتي تتميز ضعف بطانة الأوعية الدموية (تقييم الأكثر شيوعا في قيمتها تعتمد على البطانة تمدد [EDD]) وتشنج الشرايين مرنة كبيرة. في حين وجود تقنيات مختلفة لتقييم EDD وتصلب الشرايين الكبيرة المرنة، والأكثر شيوعا هي الشريان العضدي بوساطة تدفق للدم (FMD _BA) والأبهر سرعة نبض الموجة (aPWV)، على التوالي. كل من هذه التدابير موسع ضعف الأوعية الدموية هي تنبئ مستقلة للأحداث القلب والأوعية الدموية في المستقبل في المرضى الذين يعانون من أمراض الكلى وبدون. المرضى الذين يعانون من كد تثبت على حد سواء ضعف الحمى القلاعية _{على درجة البكالوريوس،} وزيادة aPWV. في حين أن الآليات الدقيقة التي ضعف الأوعية الدموية ديفييشذب في كد وغير مفهومة، وزيادة الاكسدة وانخفاض لاحق في اكسيد النيتريك (NO) التوافر البيولوجي هي المساهمة الهامة. التغيرات الخلوية في الاكسدة يمكن تقييمها من خلال جمع خلايا بطانة الأوعية الدموية من الوريد المرفقية وقياس البروتين التعبير عن علامات الاكسدة باستخدام المناعي. نحن نقدم هنا مناقشة هذه الأساليب لقياس مرض الحمى القلاعية _{على درجة البكالوريوس،} aPWV، والأوعية الدموية البطانية التعبير بروتين الخلية.

Introduction

مرض مزمن في الكلى (كد) هو مصدر قلق كبير للصحة العامة التي وصلت إلى مستويات وبائية، والتي تؤثر ~ 11.5٪ من السكان في الولايات المتحدة وحدها ^1. يتم زيادة خطر الموت القلب والأوعية الدموية أو الحدث القلب والأوعية الدموية في المرضى الذين يعانون من كد بكثير بالمقارنة مع عامة السكان ^2-4. على الرغم من أن المرضى الذين يعانون من كد تظهر ارتفاع معدل انتشار عوامل الخطر التقليدية القلب والأوعية الدموية، وهذا يفسر جزءا فقط من لهم زيادة حدوث أمراض القلب والأوعية الدموية (الأمراض القلبية الوعائية) ^5. ضعف الأوعية الدموية هو عامل خطر غير تقليدية القلب والأوعية الدموية المهم كسب اعتراف متزايد في مجال أمراض الكلى ^6-9.

بينما العديد من التغييرات من المرجح أن تسهم في تطوير ضعف الشرايين، من بين تلك الأكثر إثارة للقلق هي تطوير ضعف بطانة الأوعية الدموية، المقررة الأكثر شيوعا في قيمتها تعتمد على البطانة تمدد (EDD)، وتشنج لللاRGE الشرايين مرنة ^10. توجد تقنيات مختلفة لتقييم EDD وتصلب الشرايين مرنة كبيرة، ولكن الأكثر شيوعا هي الشريان العضدي بوساطة تدفق تمدد الحمى القلاعية _BA الأبهر وسرعة نبض الموجة (aPWV)، على التوالي. آخر تقنية تستخدم عادة لتقييم EDD يتم قياس استجابة الساعد تدفق الدم إلى وكلاء الدوائية مثل أستيل باستخدام الوريدي انسداد تخطيط التحجم ^11،12. ومع ذلك، وهذا يتطلب منهجية القسطرة من الشريان العضدي، والتي هي أكثر الغازية من مرض الحمى القلاعية _{على درجة البكالوريوس،} ويمكن بطلان في المرضى الذين يعانون من كد. تقنية بديلة لتقييم تصلب الشرايين هو لقياس الامتثال الشرياني المحلية (معكوس صلابة) من الشريان السباتي، على الرغم من أن هذه ليست كما تستخدم على نطاق واسع أو التأكد من صلاحيتها مع النهاية السريرية كما aPWV ^13.

المرضى الذين يعانون من كد تثبت على حد سواء ضعف الحمى القلاعية _BA ^14-16 الأبهر وزيادة نبض سرعة الموجة ا ف بWV ^13،17،18، حتى قبل الحاجة لغسيل الكلى. الأهم من وجهة نظر سريرية، وكلاهما من هذه التدابير موسع ضعف الأوعية الدموية هي تنبئ مستقلة للأحداث القلب والأوعية الدموية في المستقبل على حد سواء والوفيات في المرضى الذين يعانون من كد ^19-21، وكذلك في غيرهم من السكان ^22-26. هذه التقنيات يمكن تطبيقها على دراسة مختلف السكان المعرضين لخطر الأمراض القلبية الوعائية، بما في ذلك المرضى الذين يعانون من كد.

وغير مفهومة تماما الآليات الدقيقة التي ضعف الشرايين يتطور في كد؛ ومع ذلك، خفضت أكسيد النيتريك (NO) التوافر البيولوجي هو المساهم الحرجة ^27-30 وآلية المشتركة لكلا ضعاف EDD وزيادة تصلب الشرايين ^10،31. في كد، وزيادة الاكسدة ويساهم في خفض NO التوافر البيولوجي ^32-34. يتم تعريف الاكسدة كما التوافر البيولوجي المفرط للأنواع الاكسجين التفاعلية (ROS) نسبة إلى الدفاعات المضادة للأكسدة. المنبهات الفسيولوجية، المؤتمر الوطني العراقيluding إشارات التهابات، وتعزيز نظم الانزيم المؤكسد لإنتاج ROS، بما في ذلك أنيون الفائق (O ₂ ● ^-) (على سبيل المثال، انزيم أوكسيديز NADPH أكسدة.) ^35. إنتاج الفائق يؤدي في النهاية إلى يقلل من التوافر البيولوجي من أكسيد النيتريك (NO).

ضعاف NO التوافر الحيوي قد يساهم بدوره في تطوير كد، واختلال وظيفي البطانية هو مؤشرا مستقلا للحادث كد ^36. وهذا يتفق مع البيانات الحيوانية مشيرا إلى أن ارتفاع ضغط الدم يؤدي الى تثبيط أنوش (النظامية والكبيبي)، نقص التروية الكبيبي، الكبيبات، وانبوبية الخلالي إصابة ^37. في الواقع، يبدو خفض NO التوافر البيولوجي الضرورية لتطور وتقدم مرض الكلى التجريبية التي تحاكي الأمراض التي تصيب البشر، مما يشير إلى الدور الرئيسي لاختلال وظيفي البطانية في كد الإنسان ^38،39.

يمكن تقييم علامات الاكسدة الأوعية الدموية في الخامسascular الخلايا البطانية التي تم جمعها من الموضوعات البحثية الإنسان، وذلك باستخدام تقنية ضعت أصلا من قبل كولومبو وآخرون ⁴⁰ وتعديل الأختام وآخرون ^41-43. باستخدام 2 العقيمة J-الأسلاك، يتم جمع الخلايا من الوريد المرفقية، تعافى، ثابتة، وبعد ذلك حددت بشكل إيجابي كما الخلايا البطانية وتحليلها من أجل التعبير عن البروتينات ذات الاهتمام باستخدام المناعي.

نحن نقدم هنا مناقشة هذه المنهجية التي يمكن استخدامها لأ) تدبير الحمى القلاعية _BA؛ ب) قياس aPWV؛ ج) قياس الأوعية الدموية البطانية التعبير البروتين خلية من علامات الاكسدة. وينصب التركيز على المرضى الذين يعانون من كد، لا تتطلب غسيل الكلى المزمن.

Protocol

هذا البروتوكول يتبع المبادئ التوجيهية كولورادو متعددة مجلس المراجعة المؤسساتي (COMIRB). 1. التحضير لاختبار الدورة ينبغي للمشاركين اتبع القيود المفروضة على قياسات أدق: 12 ساعة بسرعة م?…

Representative Results

وكميا الحمى القلاعية BA كما تغير الذروة في قطر الشريان العضدي التالية تبيغ رد الفعل. وبالتالي، تتم مقارنة في بقية القطر لقطر بعد انتهاء فترة 5 دقائق ضغط الدم الكفة انسداد (الشكل 1). لوحة ويظهر صورة الموجات فوق الصوتية ممثل الشريان العضدي، وفريق B يعرض الر?…

Discussion

الحصول على نتائج دقيقة لمرض الحمى القلاعية _وBA aPWV يتطلب الحصول على صور الموجات فوق الصوتية عالية الجودة والطول الموجي الضغط، على التوالي. المركزية لهذا هو التدريب المناسب والمستمر واستخدام كل تقنية من قبل المشغل ^44. بالإضافة إلى ذلك، فمن الأهمية بمكان للس?…

Materials

Name of Material/ Equipment	Company	Catalog Number	Comments/Description
J-wire	St. Jude	404584	2 per collection
Disposable shorts (MediShorts)	Quick Medical	4507
Non-invasive hemodynamic workstation (NIHem)	Cardiovascualr Engineering	N/A	Includes custom ruler.  An alternate system is the Sphygmocor
Ultrasound	G.E.	Model: Vivid7 Dimension	We use a G.E., but there are many companies and models
Vascular software (Vascular Imager)	Medical Imaging Applications	N/A
R-wave trigger box	Medical Imaging Applications	N/A	custom made
Rapid Cuff Inflation System	Hokanson	Model: Hokanson E20
Forearm blood pressure cuff	Hokanson	N/A	custom cuff with 6.5 x 34 cm bladder
HUVECs	Invitrogren	C-015-5C
Donkey serum	Jackson	017-000-121
Pap pen	Research Products International	195505
VE Cadherin	Abcam	ab33168
AF568	Life Technologies	A11011	depends on specifications of microscpe
AF488	Life Technologies	A11034	depends on specifications of microscpe
Nitrotyrosine antibody	Abcam	ab7048
NADPH oxidase antibody	Upstate	07-001
DAPI	Vector	H-1200
Delicate task wipe (Kimwipe)	Fisher Scientific	06-666-A
Plastic paraffin film (parafilm)	Fisher Scientific	13-374-10
Confocal microscope	Olympus	Model: FV1000 FCS/RICS	many options exist