Erstellung von Kolon Anastomose bei Mäusen
Summary
Anastomosen Leck oder Aufschlüsselung nach der Operation ist eine der Hauptursachen der postoperativen Morbidität und Mortalität. Unsere Praxis für die Erstellung eines Kolon Anastomose ist eine zuverlässige und reproduzierbare Methode zur Untersuchung der heilenden Mechanismen der Anastomosen.
Abstract
Intestinale Anastomosen werden häufig in Wahl- und emergent Operationen durchgeführt. Trotzdem, Anastomosen Lecks sind eine sehr gefürchtete Komplikationen des Kolon Operationen und können in bis zu 26 % der chirurgischen Anastomosen mit Sterblichkeit wird bis zu 39 % für Patienten mit solch ein Leck auftreten. Derzeit bleibt eine geringe Menge von Daten, die Detaillierung der zellulären Mechanismen der Anastomosen Heilung. Entwicklung von Präventionsstrategien und Behandlungsmethoden für Anastomosen Leck könnte stark potenzierte werden, durch ein besseres Verständnis der entsprechenden Anastomosen Heilung.
Ein Mausmodell ist ideal, da frühere Studien gezeigt haben, dass die murine Anastomose klinisch ähnlich dem menschlichen Fall im Vergleich zu anderen Tiermodellen. Wir bieten ein leicht reproduzierbar Mausmodell des Kolon Anastomose bei Mäusen, die zur weiteren Veranschaulichung der Anastomosen Heilung ermöglichen.
Introduction
Eine sehr gefürchtete Komplikation der chirurgischen Anastomose des Darmes ist Anastomosen Panne oder Leck. Anastomosen-Leck, das Auslaufen von Intraluminal Inhalt in die Bauchhöhle verursacht, ist lebensgefährlich und kann schnell zu intra-abdominalen Sepsis führen; Schock-Preise schwanken zwischen 0,3 % und 5,5 % nach Dünndarm Anastomosen und steigen um 0,5 % bis 26 % für Kolon Anastomosen1,2. Sterblichkeit nach Leckagen können so hoch wie 39 % durch das rasche Auftreten von Sepsis und schnelle Progression zu Tode nach intraabdominellen Kontamination3sein. Präventive Strategien und Behandlungsmethoden basieren derzeit auf Pathophysiologie, die nicht vollständig verstanden wird.
Derzeit ist Anastomosen Heilung oft die breiter studierte kutanen Wundheilung, verglichen mit denen erweist sich ein relativ armes Faksimile. Heilung geschieht in einer Reihe von überlappenden Phasen, beginnend mit der anfängliche Verzögerung-Phase. Bei 0-4 Tage nach Erstellung der die intestinale Anastomose ist die Lag-Phase durch eine akute entzündliche Reaktion definiert, die die Wunde der Zelltrümmer löscht. Als nächstes in ca. 3-4 Tagen verkörpert handelt Verbreitung und Produktion von Kollagen die Fibrophasia Phase. Schließlich, nach dem 10. Tag, längere Kollagen remodeling der Reifungsphase nennt. Es ist wichtig zu beachten, dass Anastomosen Stärke relativ gering ist und von der extrinsischen Unterstützung von chirurgisch platzierte Heftklammern hängt oder Naht bis Kollagen hinterlegten4ist. Verständnis der Rolle und Timing jede Schicht der Darmwand spielt in Anastomosen Wundheilung und die Beteiligung an entzündlichen vermittelte Zelltypen wie Makrophagen sowie erhellendes Surrogat-Marker, Anastomosen Fehlervorhersage oder Erfolg könnte erheblich verringern Sie Morbidität, Mortalität und Gesundheitsausgaben nach Dickdarm-Operationen-5.
Das Mausmodell in früheren Studien nachweislich in imitiert menschliche Anastomose6nützlich. Zwar gibt es beliebte, erprobte und gut untersuchte Beispiele für die Darmspülung Anastomosen Mausmodell, insbesondere die Methode von Komen Et Al. beschrieben 7, begünstigen diese Modelle Ileocecal oder aufsteigender Colocolonic Anastomosen Techniken8. Frühere Studien an menschlichen Patienten haben Leckageraten signifikanten Unterschied zwischen Ileocecal, Colocolonic und kolorektalen Anastomosen, die Notwendigkeit für weitere experimentelle Modelle zu unterschiedlichen anatomische Standorten gezeigt. Zusätzliche, im Volksmund verwendete Methoden richten sich an die Entwicklung eines Modells, das absichtlich eine Anastomosen Leck schafft, anstatt zu erhellen die zellulären Mechanismen, die für normale Anastomosen Wundheilung9erforderlich. Ratte-Modelle wurden in der Vergangenheit versucht aber haben Preise von Anastomosen Dehiszenz und/oder Anzeichen von Undichtigkeit (z. B. Abszessbildung) deutlich niedriger als Menschen und Mäusen6,7. Darüber hinaus gibt es mehr gentechnisch veränderte experimentelle Linien in Mäusen als Ratten. Dies macht die Rattenmodell weniger nützlich für ein Anastomosen-Modell. Darüber hinaus hatten die Schweine und Hunde Modelle weniger klinische Untersuchung als Mausmodell6,7.
Wir schlagen ein technisch einfach, sicher und schnell und reproduzierbares Verfahren für die Erstellung von Kolon Anastomosen in einem Mausmodell, die weitere Untersuchung der underreported Mechanismus der Anastomosen Wunde heilende10 erleichtern sollte .
Protocol
Representative Results
Discussion
Es gibt mehrere wichtige Schritte zu sichern den Erfolg und die Morbidität/Mortalität mit diesem Verfahren zu minimieren. Erstens gewährleisten Sie schonenden Umgang mit Darmgewebe und kümmern Sie uns um Traktion Verletzungen beim Drehen die Eingeweide um den Doppelpunkt zu setzen. Unnötige Spannung auf den Darm oder Mesenterium können Verletzungen der Darm- oder Gefäßsystem und Ursache Darm Nekrose von den Stätten des Anastomose. Darüber hinaus sollten scharfe Zange oder Pinzette mit Zähnen nicht verwendet we…
Divulgaciones
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Keine
Materials
| C57BL6/J mice | Jackson Labs | #00664 | |
| Fisherbrand Absorbent Underpads, 20" x 24" | Fisher Scientific | 14-206-62 | |
| Polylined Sterile Field, 18" x 24" | Busse Hospital Disposables | 696 | Cut a rectangular hole |
| Isothesia isoflurane | Henry Schein | 50033 | |
| Fisherbrand Sterile cotton gauze pad, 4" x 4" | Fisher Scientific | 22-415-469 | |
| Puralube petrolatum ophthalmic ointment, 1/8 oz. tube | Dechra Veterinary Products | NDC 17033-211-38 | |
| Nair depilatory cream | Church & Dwight Co. | 22339-05 | |
| Buprenex buprenorphine 0.3 mg/ml | Reckitt Benckiser Pharma Inc | NDC 12496-0757-5 | |
| 1 cc insulin syringe, 27 G | Becton Dickinson | 329412 | |
| Chloraprep Shampoo | Medline | APL82287 | |
| Webcol alcohol prep swabs | Covidien | 6818 | |
| BioGel PI surgical gloves | Mölnlycke Health Care | ALA42675Z | |
| Micro Forceps with teeth | Roboz | RS-5150 | |
| Fine scissors- sharp | Fine Science Tools | 14060-09 | |
| Straight serrated forceps | Fine Science Tools | 11050-10 | |
| Castro-Viejo needle driver | Fine Science Tools | 12565-14 | |
| 0.9% Sodium Chloride Irrigation | Baxter | BHL2F7121 | Warm to 37 °C prior to use |
| 10 ml syringe | Becton Dickinson | 309604 | |
| 4-0 Vicryl absorbable braided suture, 18", PS-2 needle | Henry Schein | 6546037 | |
| Blue monofilament suture 24” BV-1 needle | Henry Schein | 8305H | Usually comes double-armed. Cut the suture at the midway point to generate two usable sutures. |
| Cole-Parmer Microscissors, Standard Grade, Straight, 4". | Cole- Parmer | EW-10818-06 | |
| Medline Sterile lubricating jelly | Medline | MDS032273H |
Referencias
- Murrell, Z. A., Stamos, M. J. Reoperation for anastomotic failure. Clinics in colon and rectal surgery. 19, 213-216 (2006).
- Shaban, F., Carney, K., McGarry, K., Holtham, S. Perforated Diverticulitis: To Anastomose or Not to Anastomose? A Systematic Review and Meta-Analysis. International journal of surgery (London, England). , (2018).
- Chambers, W. M., Mortensen, N. J. Postoperative leakage and abscess formation after colorectal surgery. Best practice, research. Clinical gastroenterology. 18, 865-880 (2004).
- Ashkanani, F., Krukowski, Z. H. Surgery – Oxford International Edition. Intestinal Anastomosis. 20, 104-107 (2002).
- Raptis, D., Pramateftakis, M. G., Kanellos, I. Our 20-year experience with experimental colonic anastomotic healing. Journal of medicine and life. 11, 5-14 (2018).
- Pommergaard, H. C., Rosenberg, J., Schumacher-Petersen, C., Achiam, M. P. Choosing the best animal species to mimic clinical colon anastomotic leakage in humans: a qualitative systematic review. European surgical research. Europaische chirurgische Forschung. Recherches chirurgicales europeennes. 47, 173-181 (2011).
- Komen, N., et al. Colorectal anastomotic leakage: a new experimental model. The Journal of surgical research. 155, 7-12 (2009).
- Perry, T., Borowiec, A., Dicken, B., Fedorak, R., Madsen, K. Murine ileocolic bowel resection with primary anastomosis. Journal of visualized experiments : JoVE. , e52106 (2014).
- Pommergaard, H. C., Achiam, M. P., Rosenberg, J. Colon anastomotic leakage: improving the mouse model. Surgery today. 44, 933-939 (2014).
- Bosmans, J. W. A. M., Jongen, A. C. H. M., Bouvy, N. D., Derikx, J. P. M. Colorectal anastomotic healing: why the biological processes that lead to anastomotic leakage should be revealed prior to conducting intervention studies. BMC Gastroenterology. 15, 180 (2015).
