Summary

쥐에 있는 저 승 문 합의 창조

Published: January 17, 2019
doi:

Summary

Anastomotic 누설 또는 수술 후 고장 수술 후 병 적 상태와 사망률의 주요 원인입니다. 저 승 문 합을 만들기 위한 우리의 수술 anastomoses의 치유 메커니즘을 공부에 대 한 안정적이 고 재현 가능한 방법입니다.

Abstract

장 anastomoses 선택 및 응급 작업에서 일반적으로 수행 됩니다. 그럼에도 불구 하 고, anastomotic 누수 저 승 수술의 높은 무서운된 합병증 이며 같은 누출 환자에 대 한 최대 39% 사망률과 수술 anastomoses의 최대 26%에서 발생할 수 있습니다. 현재, anastomotic 치유의 세포 메커니즘을 자세히 설명 하는 데이터의 소수 남아 있습니다. 예방 전략 및 anastomotic 누출에 대 한 치료 modalities 고안 적절 한 anastomotic 치유의 더 나은 이해에 의해 크게 potentiated 될 수 있습니다.

Murine 모델 이전 연구 murine 문 합은 가장 임상적으로 유사한 다른 동물 모델에 비해 인간의 경우에 이상적입니다. 쉽게 재현할 murine 모델 쥐에 대 한 추가 설명을 anastomotic 치유 수 있도록 저 승 문 합을 제공 합니다.

Introduction

내장의 수술 문 합의 높은 무서운된 합병증이입니다 anastomotic 고장 또는 누출. Anastomotic 누수를 복 부 구멍으로 intraluminal 내용의 흘림을 발생, 생명을 위협 하 고 수 있습니다 신속 하 게 리드 복 부 내 패 혈 증; 충격 속도 다음 작은 창 자 anastomoses, 5.5%로 0.3%에서 변화 하 고 0.5%와 26% 저 승 anastomoses1,2사이 상승. 누수를 따라 사망률 때문에 패 혈 증과 죽음 intraabdominal 오염3다음에 빠른 진행의 신속 개시 39%로 높은 수 있습니다. 예방 전략 및 치료 modalities 현재 기준으로 완전히 이해 되지 않습니다 이상 합니다.

현재, anastomotic 치료는 종종에 비해 더 넓게 공부 피부 상처 치유는 상대적으로 가난한 팩스 것을 입증 하는. 치유 하는 것은 일련의 시작 초기 지연 위상으로 겹치는 단계에서 발생 합니다. 장 문 합의 창조 후 0-4 일 동안 지연 위상 세포질 파편의 상처를 지우고 하는 급성 염증 반응에 의해 정의 됩니다. 다음, 3-4 일 동안 fibroblastic 증식과 콜라겐의 생산에 fibrophasia 단계 대표. 마지막으로, 10 일 후 개장 하는 콜라겐의 장기간 성숙 단계로 알려져 있다. 그것은 anastomotic 강도 매우 낮은 이며 수술 배치 스테이플의 외부 지원에 따라 달라 집니다 또는 콜라겐은 입금된4까지 봉합 해야 합니다. 역할을 이해 하 고 타이밍 각 창 자 벽의 층 anastomotic 상처 치유 및 중재 염증 세포 종류 elucidating 대리 표식으로 대 식 세포, anastomotic 실패 예측에 관련 재생 하거나 성공 수 있습니다. 사망률, 사망, 및 다음 콜론 작업5의료 비용을 크게 줄일.

Murine 모델 이전 연구에서 인간의 문 합6을 흉내 낸에 유용한 것으로 표시 되었습니다. 그러나 거기에 murine 저 승 anastomotic 모델의 코 멘 외. 에 의해 설명 하는 방법 특히 인기 입증 하 고 잘 공부 예 7을 이러한 모델 부탁 ileocecal 또는 colocolonic anastomotic 기법8오름차순. 인간의 환자의 이전 연구 ileocecal, colocolonic 및 해 부 위치를 다양 한 추가 실험 모델에 대 한 필요성을 강조 하는 대 장 anastomoses 사이의 누출 속도에 큰 차이 설명 했다. 추가, 널리 사용 방법 보다는 의도적으로 만드는 anastomotic 누출 모델을 개발 하는 겨냥 정상적인 anastomotic 부상9치료에 필요한 세포 메커니즘을 명료 하 게. 쥐 모델 과거에 시도 하지만 anastomotic dehiscence의 속도 또는 누출 (즉, 농 양 형성) 인간과 쥐6,7보다 훨씬 낮은의 흔적. 또한, 더 많은 유전자 변형된 실험 라인 쥐 쥐 보다 사용할 수 있습니다. 이것은 쥐 모델 anastomotic 모델에 대 한 보다 적게 유용 하다. 또한, 돼지 및 개 모델 murine 모델6,7보다 적은 임상 조사를 했다.

우리 anastomotic 상처 치유10의 underreported 메커니즘으로 추가 조사를 촉진 해야 하는 murine 모델에서 저 승 anastomoses의 창조에 대 한 안전, 기술적으로 간단 하 고 쉽고 빠르게 재현할 수 절차 제안 .

Protocol

다음 프로토콜 오클라호마 대학 건강 과학 센터 제도 동물 보호와 사용 위원회 (IACUC)에 의해 승인 되었습니다 고 연구 동물의 사용에 관한 모든 기관 윤리 지침을 준수. 또한, 모든 실험 실험 동물 연구에 관한 제도, 주 및 연방 규정에 따라 수행 했다. 참고:이 프로토콜 사용 했습니다 여성 및 남성 congenic C57BL6/J 쥐에 자란 나이의 12 ~ 72 주에. 이 절차에 사용 되는 모든 마우스 ?…

Representative Results

수술 후 7 일에는 문 합 잘 치유 될 해야 합니다. 문 합 하기 전에 시간 지점에서 하 고 anastomotic 치유의 단계를 설명 하는 더 나은 7 일 후에 수확 될 수 있습니다. 그림 9에서 조직학 분석 보여줍니다 거리 (콜라겐 trichrome 얼룩에 의해 시각) 응답 중재 평활 근 알파 걸 긍정적인 myofibroblasts. 그러나, 우리는 조직학 분석 결과 마우스, 특히 다시 epithelializat…

Discussion

이 절차와 관련 된 병 적/사망률을 최소화 하 고의 성공을 보장 하기 위해 몇 가지 주요 단계가 있습니다. 첫째, 장 조직의 주의 깊은 취급을 확인 하 고 부상을 방지 하기 위해 견인 때 결 노출 내장 회전 돌. 창 자 또는 mesentery에 과도 한 긴장에 부상을 창 자 또는 맥 관 구조와 원인 장 괴 사 문 합의 사이트에서 할 수 있다. 또한, 날카로운 집게 나 이빨으로 겸 해야 사용할 수 없습니다 창 처리 하.<…

Divulgaciones

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

없음

Materials

C57BL6/J mice Jackson Labs #00664 
Fisherbrand Absorbent Underpads, 20" x 24" Fisher Scientific 14-206-62
Polylined Sterile Field, 18" x 24" Busse Hospital Disposables 696 Cut a rectangular hole 
Isothesia isoflurane Henry Schein  50033
Fisherbrand Sterile cotton gauze pad, 4" x 4" Fisher Scientific 22-415-469
Puralube petrolatum ophthalmic ointment, 1/8 oz. tube Dechra Veterinary Products NDC 17033-211-38
Nair depilatory cream Church & Dwight Co. 22339-05
Buprenex buprenorphine  0.3 mg/ml Reckitt Benckiser Pharma Inc NDC 12496-0757-5
1 cc insulin syringe, 27 G Becton Dickinson 329412
Chloraprep Shampoo Medline APL82287
Webcol alcohol prep swabs Covidien 6818
BioGel PI surgical gloves Mölnlycke Health Care ALA42675Z
Micro Forceps with teeth Roboz RS-5150
Fine scissors- sharp Fine Science Tools 14060-09
Straight serrated forceps Fine Science Tools 11050-10
Castro-Viejo needle driver Fine Science Tools 12565-14
0.9% Sodium Chloride Irrigation Baxter BHL2F7121 Warm to 37 °C prior to use
10 ml syringe Becton Dickinson 309604
4-0 Vicryl absorbable braided suture, 18", PS-2 needle Henry Schein  6546037
Blue monofilament suture 24” BV-1 needle Henry Schein  8305H Usually comes double-armed. Cut the suture at the midway point to generate two usable sutures.
Cole-Parmer Microscissors, Standard Grade, Straight, 4". Cole- Parmer EW-10818-06
Medline Sterile lubricating jelly Medline MDS032273H

Referencias

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Citar este artículo
McCarthy, C. K., McGaha, P. K., Rozich, N. S., Yokell, N. A., Lees, J. S., Berry, W. L. Creation of Colonic Anastomosis in Mice. J. Vis. Exp. (143), e58742, doi:10.3791/58742 (2019).

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