다리에 대 한 3 차원 뼈 세포 외 매트릭스 모델
Summary
다리 (OS)의 뼈 기질 (괜 찮) 모델은 잘 설립 하 고 그림 여기. 그것은 기본 종양 성장에서 생체 외에서 흉내 낸 및 OS의 조직학 및 cytogenic이 공부에 대 한 이상적인 모델을 제공 하는 적당 한 발판으로 사용할 수 있습니다.
Abstract
다리 (OS)는 가장 일반적이 고 매우 공격적 기본 뼈 종양 이다. 해부학 및 조직학 변화 진단 또는 전조 어려움 함께 특징입니다. 운영 체제 genotypically 그리고 phenotypically 이종 암 세포를 구성 되어 있습니다. 뼈 microenvironment 요소는 종양이 고 질병 진행에 대 한 계정에 입증 했다. 뼈 기질 (괜 찮) microstructural 행렬 및 기본 세포 외 매트릭스의 생 화 확 적인 구성 요소를 유지합니다. 이 조직의 특정 틈새 OS 셀 시드 및 확산에 대 한 유리한 및 장기 비 계를 제공 합니다. 이 문서는 벰 모델과 더 실험적인 응용 프로그램의 준비에 대 한 프로토콜을 제공합니다. OS 셀 성장 하 고 여러 고기 OS 임상 표본의 histopathological 복잡도와 일치로 분화 수 있습니다. 모델은 또한 다양 한 형태학 그리고 유전 변경 및 내부 규제 메커니즘 함께 그들의 협회의 시각화 수 있습니다. 인간의 OS에 동종로이 벰 OS 모델 개발 고 병 리 및 운영 체제의 임상 연구에 적용 될 수 있습니다.
Introduction
다리 (OS)는 적극적으로 성장 하는 지역, 긴 뼈의 metaphysis 사춘기 동안에 일반적으로 발생 합니다. 운영 체제의 영향을 받는 사이트의 80% 이상이 있다 metaphysis 원심 및 근 위 대 퇴 골, 성장 판1의 위치에 해당 뿐만 아니라 근 위 경골 근 위 상 완 골의 대 한 선호. 운영 체제 여러 셀 하위 엽 속성 및 조직학 특징 및 급료에서 상당한 다양성으로 구성 되어 있습니다. 증거 원본2,3,,45의 셀으로 중간 엽 줄기 세포 (MSCs), osteoblasts 커밋된 선구자 및 pericytes을 지원합니다. 이러한 세포 축적 유전자 또는 후 변경 하 고 특정 뼈 microenvironmental 신호의 영향 아래 운영 체제를 야기할 수 있습니다. 내부 및 외부 메커니즘 genomic 불안정성 및 여러 형태학 상과 임상 고기6,7운영 체제의이 결과. 개별된 치료, 새로운 의약품의 심사에 대 한 새로운 모델이 또는 다른 임상 질환에 대 한 생성 될 필요가 있다.
운영 체제는 내부 뼈가 있는 악성 고체 종양입니다. 복잡성과 활동의 microenvironment 요소를 둘러싼 OS 세포 종양의 다른 위치에 따라 phenotypic와 기능 차이 부여. 뼈 기질 (괜 찮) 미네랄 증 착 및 뼈 구조 및 생 화 확 적인 발판을 제공합니다. 세포 외 기질 (ECM)의 유기 부분은 주로 이루어져 있다 유형 나 콜라겐의 광물 화 된 부분 hydroxyapatite8의 형태로 칼슘 인산 염의 구성 하는 동안 osteoblastic 계보 세포에 의해 분 비. 세포 접착을 규제 하는 ECM 네트워크의 동적 역할, 차별화, 잡담 및 조직 기능 유지 관리9.
광된 벰 및 ECM hydrogels 성공적으로 세포 배양에 사용 되 고 세포 확산10,11을 향상 시킬 수 있습니다. 합성된 뼈 같은 ECM 수영장 크기, 운명 결정 및 MSCs12,,1314의 계보 진행을 조절할 수 있습니다. 또한, 결과 뼈 형성과 재생15,,1617중 자극 세포 프로세스 osteogenic 활동을 제공 하는 임상 의미 증거.
이 문서에서는, 우리의 그룹 수정 모델과 3 차원 장기 문화에 대 한 유리한 대안을 설정합니다. OS 셀 조직 파생 벰 주입 플라스틱 2 차원 문화에 비해 쉽게 heterogeneously 엽 형 제시. 벰에서에서 파생 된 사이트별 동종 조직 쇼 그것의 극적인 이용으로 운영 체제에 대 한 네이티브 틈새 체 외에서 세포 고 운영 체제 이론 및 임상 연구에 큰 잠재력이 있다. 이 특징이 벰 플랫폼 간단 하지만 생체 외에서 연구를 위한 효율적 이며 여러 암 모델링에 확장 될 수 있습니다.
Protocol
Representative Results
Discussion
일반적으로, OS로 osteoblastic 분류 될 수 있다, 그것의 지배적인 더 구성 요소에 따라 chondroblastic, 및 fibroblastic 하위. 그것의 예 지는 그것의 해부학 사이트에 뿐만 아니라 더 매개 변수 뿐만 아니라 의존 합니다. 그것은 extraosseous 사이트19그리고 뼈의 표면에 (intramedullary 또는 intracortical 구획)에서 뼈 안에 발생할 수 있습니다. 출현 및이 운영 체제의 종양 이벤트 및 증가 개발 및 마?…
Divulgaciones
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
저자 가치 뼈 기질 장비의 건설 기간 동안 그의 뛰어난 기술 지원에 대 한 그녀의 행정 지원 및 긴 Zhao Liuying 첸의 지원. 이 연구는 국립 자연 과학 재단의 중국 (31871413)에서 교부 금에 의해 지원 됩니다.
Materials
| 15 mL centrifuge tube | Greiner | 188271 | |
| 50 mL centrifuge tube | Greiner | 227270 | |
| 6 cm cell culture dish | Greiner | 628160 | |
| 6-well plate | Greiner | 657160 | |
| Ampicillin | Sigma-Aldrich | A9393 | |
| C57-BL/6J mouse | Sun Yat-sen University Laboratory Animal Center | ||
| CO2 incubator | SHEL LAB | SCO5A | |
| Dibasic sodium phosphate | Guangzhou Chemical Reagent Factory | BE14-GR-500G | |
| DMEM/F12 | Sigma-Aldrich | D0547 | |
| Fetal bovine serum | Hyclone | SH30084.03 | |
| Hemocytometer | BLAU | 717805 | |
| Kanamycin | Sigma-Aldrich | PHR1487 | |
| MG-63 | Chinese Academy of Science, Shanghai Cell Bank | Human osteosarcoma cell line | |
| MNNG/HOS | Chinese Academy of Science, Shanghai Cell Bank | Human osteosarcoma cell line | |
| Phenol red | Sigma-Aldrich | P4633 | A solution of phenol red is used as a pH indicator: its color exhibits a gradual transition from yellow to red over the pH range 6.6 to 8.0. |
| Potassium chloride | Sangon Biotech | A100395 | |
| Potassium Phosphate Monobasic | Sangon Biotech | A501211 | |
| Sodium chloride | Sangon Biotech | A501218 |
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