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Artículo de método

Inducción de la insuficiencia ventricular derecha por constricción pulmonar de la arteria y evaluación de la función ventricular derecha en ratones

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DOI:

10.3791/59431

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13 de mayo de 2019

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En este artículo

Resumen

Aquí, proporcionamos un enfoque útil para estudiar el mecanismo de la insuficiencia ventricular derecha. Se establece un enfoque más conveniente y eficiente de la constricción de la arteria pulmonar utilizando instrumentos quirúrgicos hechos internamente. Además, se proporcionan métodos para evaluar la calidad de este enfoque mediante ecocardiografía y cateterismo.

Resumen

El mecanismo de insuficiencia ventricular derecha (RVF) requiere aclaración debido a la singularidad, alta morbilidad, alta mortalidad y naturaleza refractaria de la FVR. Se han descrito modelos de ratas anteriores que imitan la progresión de RVF. En comparación con las ratas, los ratones son más accesibles, económicos y ampliamente utilizados en experimentos con animales. Desarrollamos un enfoque de constricción de la arteria pulmonar (PAC) que se compone de bandas del tronco pulmonar en ratones para inducir hipertrofia ventricular derecha (RV). Se diseñó una aguja de pestillo quirúrgico especial que permite una separación más fácil de la aorta y el tronco pulmonar. En nuestros experimentos, el uso de esta aguja de pestillo fabricada redujo el riesgo de arteriorrhexis y mejoró la tasa de éxito quirúrgico al 90%. Utilizamos diferentes diámetros de aguja de relleno para crear con precisión constricción cuantitativa, que puede inducir diferentes grados de hipertrofia RV. Cuantificamos el grado de constricción evaluando la velocidad del flujo sanguíneo de la AP, que se midió mediante ecocardiografía transtorácica no invasiva. La función de RV se evaluó con precisión mediante cateterismo cardíaco derecho a las 8 semanas después de la cirugía. Los instrumentos quirúrgicos hechos internamente estaban compuestos de materiales comunes utilizando un proceso simple que es fácil de dominar. Por lo tanto, el enfoque PAC descrito aquí es fácil de imitar utilizando instrumentos hechos en el laboratorio y puede ser ampliamente utilizado en otros laboratorios. Este estudio presenta un enfoque de PAC modificado que tiene una tasa de éxito más alta que otros modelos y una tasa de supervivencia postcirugía de 8 semanas del 97,8%. Este enfoque PAC proporciona una técnica útil para estudiar el mecanismo de RVF y permitirá una mayor comprensión de RVF.

Introducción

La disfunción RV (RVD), definida aquí como evidencia de una estructura o función anormal de RV, se asocia con resultados clínicos deficientes. RVF, como la etapa final de la función RV, es un síndrome clínico con signos y síntomas de insuficiencia cardíaca que resultan de la RVD progresiva1. Con diferencias en la estructura y la función fisiológica, la falla ventricular izquierda (LV) y la RVF tienen diferentes mecanismos fisiopatológicos. Se han notificado algunos mecanismos fisiopatológicos independientes en RVF, incluida la sobreexpresión de la señalización del receptor adrenérgico2, la inflamación3,....

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Protocolo

Todos los procedimientos se realizaron de acuerdo con las directrices institucionales para la investigación animal, que se ajustan a la Guía para el cuidado y uso de animales de laboratorio publicada por los Institutos Nacionales de Salud de los Estados Unidos (Publicación No 85-23 de la NIH, revisada en 1996). C57BL/6 ratones macho (8-10 semanas de edad, con un peso de 20-25 g) fueron proporcionados por el Centro De Animales de la Universidad Médica del Sur. Después de la llegada, los ratones fueron alojados bajo un ciclo oscuro/claro de 12/12 h, con suficiente comida y agua.

1. Preparación de los instrumentos quirúrgicos y fabricación de la....

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Resultados

En este estudio, los ratones fueron asignados aleatoriamente al grupo pac (n a 9) o al grupo de operaciones falsas (n x 10). La ecocardiografía se realizó a las 1, 4 y 8 semanas después de la cirugía. Ocho semanas después de la cirugía, después de las últimas evaluaciones de ecocardiografía y cateterismo, los ratones fueron eutanasiados, y sus corazones fueron cosechados para una evaluación morfológica e histológica.

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Discusión

Los aumentos patológicos en las presiones de llenado de RV dan como resultado un desplazamiento hacia la izquierda del tabique, que puede alterar la geometría del VL21. Estos cambios contribuyen a la reducción de la producción cardíaca y la fracción de eyección del VL (LVEF), que puede causar un trastorno hemodinámico del sistema circulatorio22. Por lo tanto, un modelo eficiente, estable y económico para estudiar el mecanismo de RVF es valioso.

D.......

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Divulgaciones

Los autores no tienen nada que revelar.

Agradecimientos

Este trabajo fue apoyado por subvenciones de la Fundación Nacional de Ciencias Naturales de China (81570464, 81770271; al Dr. Liao) y los Proyectos de Planificación Municipal de Tecnología Científica de Guangzhou (201804020083) (al Dr. Liao).

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Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo
NombreEmpresaNúmero de catálogoComentarios
Ventilador ALC-V8SSHANGHAI  ALCOTT  BIOTECNOLOGÍA  COALC-V8SVentilación asistida
Mini ventilador para animalesHaverdTipo 845Ventilación asistida
Sistema de ultrasonidos para animales VEVO2100Visual Sonic  VEVO2100Ecocardiografía
Iluminador de luz fríaOlympusILD-2
Light Almohadilla térmica - sistema quirúrgico termostático (ALC-HTP-S1)SHANGHAI  ALCOTT  BIOTECNOLOGÍA  COALC-HTP-S1
Calefacción IsofluranoRWD ciencias de la vidaR510-22Anestesia inhalante
Matrx VIP 3000 Vaporizador de isofuranoMidmark CorporationVIP 3000Anestesia
Sutura de seda trenzada médica (6-0)Shanghai Pudong Jinhuan Medical Supplies Co.6-0Sutura
de nailon médico de ligadura (5-0)Ningbo Medical Needle Co.Catétersutura
5-0 (1.0 F)Instrumentos AD1.0FPara cateterismo cardíaco derecho
Sal sódica de pentobarbitalMerck25MGAnestesia
PowerLab Sistema de registro fisiológico multidireccionalAD instruments4/35Registre el resultado del cateterismo cardíaco derecho
Balanza electrónica de precisiónDenver InstrumentTB-114 Sensor depesaje
pestillo de fabricación propiaSepare la aorta y el tronco pulmonar
Aguja de acolchado de fabricación propia Constricción
Intubación traqueal de fabricación propia, Intubacióntraqueal 
Equipo de microcirugía para animales pequeñosNapoxMA-65Instrumentos quirúrgicos
Gel de transmisiónGuang Gong pai250MLEcocardiografía
Veet crema depilatoriaReckitt BenchiserRQ / B 33 Tipo 2Eliminar el pelo de ratones
Esterilizador de vapor de presión electrotérmica automático verticalHefei Huatai Medical Equipment Co.LX-B50L Limpiezaautomática de los instrumentos quirúrgicos
Microscopio vertical para cirugía de animales pequeñosInstrumento óptico YihuaY-HX-4APara cateterismo cardíaco derecho
millar de Aguja de

Referencias

  1. Mehra, M. R., et al. Right heart failure: toward a common language. The Journal of Heart and Lung Transplantation: The Official Publication of the International Society for Heart Transplantation. 33, 123-126 (2014).
  2. Sun, F., et al.

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