遺伝子改変マウスモデルにおける同所性ATC腫瘍の解析のための高解像度超音波検査
Summary
本プロトコルは、マウス甲状腺全体を視覚化し、未分化甲状腺癌の成長を監視するための高周波超音波検査を記載しています。
Abstract
未分化甲状腺癌(ATC)は予後不良と生存期間の中央値が短いことと関連しているが、アウトカムを有意に改善する効果的な治療法はない。ATCの進行を模倣する遺伝子操作されたマウスモデルは、研究者がこの病気の治療法を研究するのに役立つ可能性があります。マウスの3つの異なる遺伝子型、 TPO-cre / ERT2を交配します。ブラフCA/重量;Trp53 Δex2-10/Δex2-10トランスジェニックATCモデルを開発した。ATCマウスモデルは、タモキシフェンの腹腔内注射により、BrafV600E の過剰発現とTrp53の欠失により誘導され、約1か月以内に腫瘍が発生しました。高解像度超音波を適用して腫瘍の開始と進行を調べ、腫瘍のサイズを測定することにより動的成長曲線を取得しました。磁気共鳴画像法(MRI)やコンピューター断層撮影スキャンと比較して、超音波はATCマウスモデルを観察する上で、非侵襲的、ポータブル、リアルタイムで、放射線被曝がないなどの利点があります。高分解能超音波は、動的および複数の測定に適しています。ただし、マウスの甲状腺の超音波検査には、関連する解剖学的知識と経験が必要です。この記事では、高分解能超音波を利用してトランスジェニックATCモデルの腫瘍をスキャンするための詳細な手順を説明します。一方、超音波パラメータ調整、超音波スキャンスキル、動物の麻酔と回復、およびプロセス中に注意が必要なその他の要素がリストされています。
Introduction
未分化甲状腺癌(ATC)は甲状腺癌の2%未満を占めていますが、毎年甲状腺癌関連の死亡の50%以上を引き起こします。ATCと診断された後の生存期間の中央値はわずか約6か月であり、生存率を大幅に改善する治療法はありません1,2。
ATCの希少性は、病気がどのように始まり、積極的に進行するかを研究する研究を妨げてきました。この病気を模倣する遺伝子操作されたマウスモデルが最近利用可能になり、病気と可能な治療法に対するその反応についての洞察を提供します3,4,5。このような研究では、測定とモニタリングのための正確な腫瘍イメージングが必要であり、これは通常、磁気共鳴画像法、コンピューター断層撮影、または高解像度超音波検査を使用して実行されます6,7。超音波検査はマウスの臓器で広く使用されています。これは、リアルタイムで実行でき、被験者を放射線にさらさないため、磁気共鳴画像法やコンピューター断層撮影よりも利点があり、必要な機器は持ち運びできるほど小さいです8,9。ただし、超音波を使用してATCの成長を継続的に監視する研究はまれです。したがって、この研究は、この文脈における超音波の有用性を探ります。
ここでは、高解像度超音波検査を使用して、ATCのマウスモデルで腫瘍を正確にスキャン、監視、および測定するためのプロトコルが提示されています。
Protocol
Representative Results
Discussion
このプロトコルは、高解像度超音波検査を使用して、遺伝子操作されたマウスモデルで同所性ATC腫瘍を分析します。遺伝子型が TPO-cre/ERT2のトランスジェニックモデル。 ブラフCA/重量;Trp53 Δex2-10/Δex2-10は当研究室で開発されました。動物はブラフV600E を過剰発現し、Trp53を欠いています。動物にタモキシフェンを腹腔内注射すると、約1ヶ月後に腫瘍が増?…
Divulgaciones
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
この研究は、公的、商業的、または非営利の資金提供機関から特定の助成金を受け取っていません。
Materials
| Adhesive tape | Winner | ||
| Anesthesia system | RWDlifescience | ||
| Brafflox/wt mice | Collaboration with Institute of Life Science, eBond Pharmaceutical Technology Ltd, Chengdu, China | ||
| Chamber for anesthesia induction | RWDlifescience | ||
| Cotton swabs | Winner | ||
| Depilatory cream | Veet | ||
| Electric heating blanket | Petbee | ||
| Isoflurane vaporizer | RWDlifescience | ||
| Medical gloves | Winner | ||
| Paper towels | Breeze | B914JY | |
| TPO-cre/ERT2 mice | Collaboration with Institute of Life Science, eBond Pharmaceutical Technology Ltd, Chengdu, China | ||
| Trp53flox/wt mice | Collaboration with Institute of Life Science, eBond Pharmaceutical Technology Ltd, Chengdu, China | ||
| Ultrasound gel | Keppler | KL-250 | |
| Ultrasound machine | VisualSonics | Vevo 3100 |
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